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來源: 發(fā)布時間:2025-08-26

除了His標簽和GST標簽,還有多種融合伴侶技術可以用于提高蛋白的表達和純度,包括但不限于以下幾種:1.Flag標簽:Flag是一個八肽序列(DYKDDDDK),可以通過抗Flag標簽的抗體進行免疫沉淀或西方印跡分析,有助于提高蛋白的純度。2.Fc融合蛋白:Fc標簽是免疫球蛋白的恒定區(qū),可以提高蛋白在哺乳動物細胞中的溶解性和穩(wěn)定性,并且可以通過蛋白A親和層析進行純化。3.人血清白蛋白(HSA):HSA作為融合伴侶可以提高蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,延長半衰期,并通過其固有的結合特性進行純化。4.轉鐵蛋白:轉鐵蛋白可以作為融合伴侶,利用其與鐵的高親和力進行純化,并且有助于提高蛋白的穩(wěn)定性。5.XTEN聚合物:XTEN是一種柔性的多肽聚合物,可以提高蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,有助于防止聚集。6.彈性蛋白樣多肽(ELP):ELP具有可逆的熱響應性質,可以通過溫度誘導的相分離進行純化,有助于提高純度。7.Strep標簽:Strep標簽是一個短肽序列,可以通過Strep-Tactin親和層析進行高效率的純化。8.MBP融合蛋白:麥芽糖結合蛋白(MBP)可以作為融合伴侶,提高蛋白的溶解性,并通過親和層析進行純化。。金黃色葡萄球菌基因敲除是利用自身的Red系統(tǒng)對外源進入的DNA進行同源重組,從而實現(xiàn)目標基因的等位替換。浙江畢赤酵母分泌表達技術服務

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DL100 Plus DNA Marker:精細的DNA分子量標準DL100 Plus DNA Marker 是一種即用型的DNA分子量標準,廣應用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,能夠為DNA分析提供精確的分子量參考。產(chǎn)品特點組成:DL100 Plus DNA Marker 由11條線狀雙鏈DNA片段組成,片段大小分別為100 bp、200 bp、300 bp、400 bp、500 bp、600 bp、700 bp、800 bp、900 bp、1000 bp和1500 bp。即用型設計:已預混1×Loading Buffer,使用時無需額外添加,直接上樣。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存6個月,長期保存建議置于-20℃。使用方法上樣量:建議每次取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當增加上樣量。電泳條件:推薦使用1.2%-2.0%的瓊脂糖凝膠,0.5×TBE或1×TAE緩沖液,電壓5-10 V/cm。染色與觀察:電泳結束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,紫外燈下觀察。注意事項保存條件:建議低溫保存,避免反復凍融。瓊脂糖質量:電泳時應盡量選用質量好的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。染料選擇:如果使用Goldview等染料,由于靈敏度較低,建議適當增加Marker的上樣量。北京九價HPV病毒樣顆粒表達服務技術服務研發(fā)Blood Direct PCR Master Mix 2×的優(yōu)勢在于其能夠直接作用于血液樣本,無需進行繁瑣的DNA提取和純化步驟。

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Tris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE, RNase free):RNA電泳的可靠保障在分子生物學實驗中,RNA的分離和分析是研究基因表達和調控的重要環(huán)節(jié)。然而,RNA的穩(wěn)定性較差,容易被RNase降解,因此在RNA電泳實驗中,使用無RNase污染的緩沖液至關重要。Tris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE, RNase free)憑借其無RNase污染、高效分離和經(jīng)濟實用的特點,成為RNA電泳的理想選擇。產(chǎn)品特點與優(yōu)勢Tris-乙酸電泳緩沖液(50×TAE, RNase free)是一種高濃度、無RNase污染的緩沖液,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、乙酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保RNA的完整性。無RNase污染:經(jīng)過特殊處理,確保無RNase污染,能夠有效保護RNA樣品免受降解。高效分離:TAE緩沖液具有較低的離子強度,適合分離大分子量的RN片段。它能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的電流,確保RNA條帶清晰。經(jīng)濟實用:50×的高濃度設計使得該緩沖液在使用時可以根據(jù)實驗需求靈活稀釋,減少浪費,降低實驗成本。兼容性強:適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實驗需求。

在現(xiàn)代科學研究和工業(yè)生產(chǎn)中,精細測量是確保實驗成功和產(chǎn)品質量的關鍵。DL50作為一種廣使用的DNA分子量標準,為分子生物學實驗提供了可靠的參考,是實驗室中不可或缺的工具。DL50是一種預制的DNA梯,主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段的大小。它包含一系列已知長度的DNA片段,通常覆蓋從50 bp到5,000 bp的范圍,能夠滿足大多數(shù)常規(guī)實驗的需求。這些片段經(jīng)過特殊處理,具有高度的穩(wěn)定性和清晰的條帶,即使在多次凍融后仍能保持良好的性能。DL50的使用非常方便。它已經(jīng)預先混合了上樣緩沖液,用戶只需取適量(通常為5-10 μL)直接加入凝膠孔中即可進行電泳。這種設計簡化了實驗操作流程,節(jié)省了研究人員的時間和精力。同時,DL50還具有良好的兼容性,適用于各種品牌和濃度的瓊脂糖凝膠,以及不同的電泳緩沖液。在實驗中,DL50能夠為研究人員提供準確的分子量參考,幫助快速估算目標DNA片段的大小。例如,在基因克隆、PCR產(chǎn)物分析或質粒提取等實驗中,DL50的清晰條帶能夠清晰地指示目標片段的位置,從而為實驗結果的解讀提供重要依據(jù)。DL50的保存也非常簡單。它可以在-20℃下長期保存,避免反復凍融即可。這種穩(wěn)定性使得DL50成為實驗室中理想的常備試劑,隨時可以用于實驗。該產(chǎn)品預混了電泳指示劑,PCR產(chǎn)物可直接進行電泳分析,無需額外添加Loading Dye進一步提高了實驗的便捷性。

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除了CRISPR-Cas9技術,還有其他幾種基因編輯技術可以用于金黃色葡萄球菌的研究:1.單堿基編輯技術:這是一種新型的基因編輯技術,可以在不切割DNA雙鏈的情況下實現(xiàn)基因的定點突變。季泉江教授課題組與中國科學院北京基因組所韓大力研究員課題組合作,在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術,通過融合失活的Cas9蛋白(Cas9D10A)和胞嘧啶脫氨酶(APOBEC1),實現(xiàn)了高效單堿基編輯,有助于研究耐藥機制和開發(fā)新型手段。2.同源重組(HR)修復技術:在某些細菌中,可以通過同源重組機制對CRISPR-Cas9系統(tǒng)產(chǎn)生的雙鏈DNA斷裂進行修復,實現(xiàn)基因的精確編輯。例如,在谷氨酸棒桿菌中,利用CRISPR/Cas9技術結合同源重組修復模板,實現(xiàn)了高效的基因缺失和點突變。3.非同源末端連接(NHEJ)相關蛋白共表達:通過共表達Cas9蛋白和NHEJ相關蛋白,如連接酶LigD,可以在鏈霉菌中實現(xiàn)有效的基因組編輯,這種方法不依賴于同源重組,可以應用于那些同源重組效率較低的細菌。4.CRISPR干擾技術(CRISPRi):利用失活的Cas9蛋白(dCas9)阻斷基因的轉錄,從而抑制特定基因的表達。這種技術可以用于研究基因功能和調控基因表達,已經(jīng)在多種細菌中得到應用。聚合酶鏈式反應采用了經(jīng)過優(yōu)化的Taq DNA聚合酶與長片段擴增酶的混合體系顯著提高PCR反應的延伸能力和準確。北京HPV病毒樣顆粒表達服務技術服務臨床前研究

基因編輯技術還可以用于大腸桿菌的基因組工程。浙江畢赤酵母分泌表達技術服務

在分子生物學實驗中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DNA片段大小和純度的重要技術。為了確保電泳過程中DNA的完整性和遷移效率,DNA非變性加樣緩沖液(2×)成為了實驗中不可或缺的試劑。DNA非變性加樣緩沖液(2×)是一種專門用于瓊脂糖凝膠電泳的輔助試劑,其主要成分包括甘油、SDS、溴酚藍和EDTA等。其中,甘油增加了樣品的密度,使樣品能夠沉入凝膠孔中;SDS和EDTA則有助于維持DNA的完整性和穩(wěn)定性;溴酚藍作為指示劑,用于監(jiān)測電泳的遷移速度。優(yōu)勢與特點維持DNA完整性:該緩沖液能夠在電泳過程中保持DNA的雙鏈結構,避免高溫或堿性條件導致的DNA變性,特別適用于分析雙鏈DNA片段。高遷移效率:甘油的加入增加了樣品的密度,確保樣品能夠均勻沉入凝膠孔中,從而提高電泳的遷移效率。清晰的電泳條帶:溴酚藍作為指示劑,能夠在電泳過程中清晰地顯示DNA片段的遷移位置,幫助實驗人員準確判斷電泳進程。即用型設計:2×的高濃度設計使得該緩沖液在使用時只需與等體積的DNA樣品混合即可,無需額外配制,操作簡便。使用方法使用DNA非變性加樣緩沖液(2×)時,需按照以下步驟操作:取適量DNA樣品,加入等體積的2×非變性加樣緩沖液,混合均勻。浙江畢赤酵母分泌表達技術服務