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DNA Marker IV：精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DNA Marker IV 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)，廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中，用于估算DNA片段的大小和進(jìn)行粗略定量。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成，能夠?yàn)镈NA分析提供精確的分子量參考。產(chǎn)品特點(diǎn)組成：DNA Marker IV 由6-7條線狀雙鏈DNA片段組成，具體片段大小包括200 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp、3000 bp、4500 bp和7000 bp。即用型設(shè)計(jì)：已預(yù)混1×Loading Buffer，使用時(shí)無(wú)需額外添加，直接上樣。清晰的條帶：電泳圖像清晰，背景干凈，條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高：在室溫下可穩(wěn)定保存六個(gè)月，長(zhǎng)期保存建議置于-20℃。使用方法上樣量：建議每次取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬，可適當(dāng)增加上樣量。電泳條件：推薦使用1.0%-1.5%的瓊脂糖凝膠，1×TAE或0.5-1×TBE緩沖液，電壓4-10 V/cm，電泳時(shí)間20-40分鐘。染色與觀察：電泳結(jié)束后，使用溴化乙錠（EB）或其他DNA染料染色，紫外燈下觀察。注意事項(xiàng)保存條件：建議低溫保存，避免反復(fù)凍融。瓊脂糖質(zhì)量：電泳時(shí)應(yīng)盡量選用質(zhì)量好的瓊脂糖，以獲得比較好分離效果。染料選擇：如果使用Goldview等染料，由于靈敏度較低，建議適當(dāng)增加Marker的上樣量?；蚓庉嫾夹g(shù)在大腸桿菌中的應(yīng)用具有很好的前景。上海畢赤酵母表達(dá)病毒樣顆粒技術(shù)服務(wù)開(kāi)發(fā)

TthDNAPolymerase的高保真性能TthDNAPolymerase具有較高的保真度，在DNA合成過(guò)程中能準(zhǔn)確地識(shí)別和配對(duì)堿基，減少錯(cuò)誤摻入的發(fā)生。其獨(dú)特的活性中心結(jié)構(gòu)使其對(duì)底物具有高度選擇性，降低了堿基錯(cuò)配的概率。在基因克隆、測(cè)序等對(duì)準(zhǔn)確性要求極高的實(shí)驗(yàn)中，能夠保證合成的DNA序列與模板高度一致，為后續(xù)的研究提供了可靠的基因材料，避免因堿基突變導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差，保障了分子生物學(xué)研究的科學(xué)性和嚴(yán)謹(jǐn)性。TthDNAPolymerase的反應(yīng)速度此酶的催化反應(yīng)速度較快，能夠在較短時(shí)間內(nèi)完成DNA鏈的延伸。在PCR反應(yīng)中，它可以快速地添加核苷酸到引物的3'-OH末端，使得目標(biāo)DNA片段的擴(kuò)增效率顯著提高。例如在大規(guī)模的基因篩查實(shí)驗(yàn)中，快速的反應(yīng)速度能夠在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的擴(kuò)增產(chǎn)物，節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間，加快了研究進(jìn)程，滿足了現(xiàn)代分子生物學(xué)高通量、高效率的實(shí)驗(yàn)需求。江蘇畢赤酵母表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)50×TAE是一種高濃度的緩沖液，主要成分包括Tris（三羥甲基氨基甲烷）、醋酸鈉和EDTA（乙二胺四乙酸）。

0×TAE粉劑是一種高濃度的緩沖液原料，主要成分包括Tris（三羥甲基氨基甲烷）、醋酸鈉和EDTA（乙二胺四乙酸）。它是一種廣用于瓊脂糖凝膠電泳的緩沖液，能夠?yàn)镈NA片段的分離和分析提供穩(wěn)定的環(huán)境。50×TAE粉劑的優(yōu)勢(shì)高效分離：TAE緩沖液在低濃度下具有較低的離子強(qiáng)度，特別適合分離大分子量的DNA片段。它能夠提供穩(wěn)定的pH環(huán)境，確保DNA在電泳過(guò)程中保持完整結(jié)構(gòu)。經(jīng)濟(jì)實(shí)用：50×TAE粉劑以高濃度形式提供，用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求自行配制不同體積的工作液，降低了成本，同時(shí)也減少了儲(chǔ)存空間。穩(wěn)定性高：粉劑形式的TAE在保存和運(yùn)輸過(guò)程中更加穩(wěn)定，不易受環(huán)境因素影響。使用時(shí)只需按照說(shuō)明溶解于去離子水中，即可得到所需的緩沖液。使用方法使用50×TAE粉劑時(shí)，需按照以下步驟配制緩沖液：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，稱取適量的50×TAE粉劑。將粉劑溶解于適量的去離子水中，攪拌至完全溶解。定容至所需體積，得到50×TAE濃縮液。使用時(shí)，將50×TAE濃縮液按1:49的比例稀釋至1×TAE工作液，即可用于瓊脂糖凝膠電泳。保存與注意事項(xiàng)50×TAE粉劑應(yīng)保存在干燥、陰涼處，避免受潮和污染。配制好的緩沖液可在室溫或4℃條件下保存，但需注意定期檢查其pH值和透明度，確保緩沖液的穩(wěn)定性。

除了CRISPR-Cas9技術(shù)，還有其他幾種基因編輯技術(shù)可以用于金黃色葡萄球菌的研究：1.單堿基編輯技術(shù)：這是一種新型的基因編輯技術(shù)，可以在不切割DNA雙鏈的情況下實(shí)現(xiàn)基因的定點(diǎn)突變。季泉江教授課題組與中國(guó)科學(xué)院北京基因組所韓大力研究員課題組合作，在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術(shù)，通過(guò)融合失活的Cas9蛋白（Cas9D10A）和胞嘧啶脫氨酶（APOBEC1），實(shí)現(xiàn)了高效單堿基編輯，有助于研究耐藥機(jī)制和開(kāi)發(fā)新型手段。2.同源重組（HR）修復(fù)技術(shù)：在某些細(xì)菌中，可以通過(guò)同源重組機(jī)制對(duì)CRISPR-Cas9系統(tǒng)產(chǎn)生的雙鏈DNA斷裂進(jìn)行修復(fù)，實(shí)現(xiàn)基因的精確編輯。例如，在谷氨酸棒桿菌中，利用CRISPR/Cas9技術(shù)結(jié)合同源重組修復(fù)模板，實(shí)現(xiàn)了高效的基因缺失和點(diǎn)突變。3.非同源末端連接（NHEJ）相關(guān)蛋白共表達(dá)：通過(guò)共表達(dá)Cas9蛋白和NHEJ相關(guān)蛋白，如連接酶LigD，可以在鏈霉菌中實(shí)現(xiàn)有效的基因組編輯，這種方法不依賴于同源重組，可以應(yīng)用于那些同源重組效率較低的細(xì)菌。4.CRISPR干擾技術(shù)（CRISPRi）：利用失活的Cas9蛋白（dCas9）阻斷基因的轉(zhuǎn)錄，從而抑制特定基因的表達(dá)。這種技術(shù)可以用于研究基因功能和調(diào)控基因表達(dá)，已經(jīng)在多種細(xì)菌中得到應(yīng)用。Taq PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 的另一個(gè)優(yōu)勢(shì)在于其使用便捷性。按照實(shí)驗(yàn)需求即可直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

RNA上樣緩沖液簡(jiǎn)介RNA上樣緩沖液是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中用于RNA電泳分析的一種輔助試劑。它通過(guò)提供適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)和條件，幫助RNA樣品在凝膠中有效遷移和分離。功能樣品沉降：增加樣品的密度，使其更容易沉入凝膠孔中。電泳指示：含有染料，如溴酚藍(lán)或二甲苯青，幫助觀察樣品遷移。樣品保護(hù)：在電泳過(guò)程中保護(hù)RNA分子，減少降解。使用方法樣品準(zhǔn)備：將RNA樣品與上樣緩沖液混合，通常按1:1的比例。變性處理：對(duì)于需要變性的電泳，樣品可與甲醛混合并加熱變性。上樣：將混合后的樣品加入凝膠孔中。電泳：在電場(chǎng)作用下進(jìn)行電泳，觀察RNA的片段的遷移。保存建議短期：4℃保存，可保持一個(gè)月。長(zhǎng)期：-20℃保存，可延長(zhǎng)有效期至兩年。注意事項(xiàng)：避免RNase污染：在處理RNA樣品時(shí)，必須使用無(wú)RNase的設(shè)備和耗材，避免RNA降解。操作安全：由于含有甲醛等有害成分，操作時(shí)應(yīng)佩戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)裝備，如手套、口罩和防護(hù)眼鏡。染色和檢測(cè)：電泳結(jié)束后，可以使用溴乙錠（EtBr）或SYBRGold等核酸染料對(duì)凝膠進(jìn)行染色，然后在紫外光下觀察RNA條帶。RNA上樣緩沖液的使用可以確保RNA樣品在電泳過(guò)程中的穩(wěn)定性和均勻遷移，從而獲得準(zhǔn)確的電泳結(jié)果。Pfu DNA Polymerase的擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端，可直接用于平末端克隆。速度可達(dá)4 kb/min，是普通Pfu酶的8倍。上海微生物基因編輯技術(shù)服務(wù)臨床前研究

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TthDNAPolymerase的酶學(xué)動(dòng)力學(xué)特性從酶學(xué)動(dòng)力學(xué)角度來(lái)看，TthDNAPolymerase具有獨(dú)特的酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)參數(shù)，如米氏常數(shù)（Km）和比較大反應(yīng)速度（Vmax）等。這些參數(shù)反映了酶與底物的親和力和催化效率，研究它們有助于深入了解酶的催化機(jī)制和優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。例如通過(guò)測(cè)定Km值，可以確定酶對(duì)底物的比較好濃度范圍，從而在實(shí)驗(yàn)中精確控制底物用量，提高酶的利用效率和反應(yīng)的準(zhǔn)確性，為酶的工業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用提供理論依據(jù)。TthDNAPolymerase的保存穩(wěn)定性TthDNAPolymerase在保存過(guò)程中具有較好的穩(wěn)定性，在適當(dāng)?shù)牡蜏貤l件下，如-20℃或更低溫度，且在含有甘油等保護(hù)劑的緩沖液中，能夠長(zhǎng)時(shí)間保持酶活性。這對(duì)于實(shí)驗(yàn)室的日常使用和試劑的長(zhǎng)期儲(chǔ)存非常重要，減少了因酶活性下降而頻繁更換試劑的成本和工作量，保證了實(shí)驗(yàn)的連續(xù)性和穩(wěn)定性，方便了科研人員的實(shí)驗(yàn)操作和研究工作的順利開(kāi)展。上海畢赤酵母表達(dá)病毒樣顆粒技術(shù)服務(wù)開(kāi)發(fā)