WB（Westernblot），即蛋白印跡或免疫印跡（immunoblotting），是一項(xiàng)在分子生物學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用非常廣的技術(shù)。這一技術(shù)利用抗體與組織或細(xì)胞樣品中特定蛋白的特異性結(jié)合作用，根據(jù)顯色條帶的位置和強(qiáng)弱實(shí)現(xiàn)蛋白鑒定和表達(dá)分析。WB技術(shù)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測(cè)定的高特異性和敏感性。選用合適的內(nèi)參抗體能夠校正蛋白定量和上樣過程中的誤差，通過灰度計(jì)量可以定性或定量分析不同樣品中蛋白表達(dá)情況。做第三方檢測(cè)時(shí)為什么有時(shí)候條帶會(huì)出現(xiàn)拖帶或者彎曲？在使用特定裂解緩沖液時(shí)，或者一些植物或脂肪含量高的樣品中成分較復(fù)雜，會(huì)對(duì)電泳條帶產(chǎn)生干擾；樣品變性不徹底、有降解發(fā)生、修飾、上樣過大等情況會(huì)導(dǎo)致拖帶，凝膠不均勻、電泳裝置滲漏、電壓/電流過大、膠孔不平等原因會(huì)導(dǎo)致條帶彎曲，當(dāng)很小分子量的蛋白電泳到接近凝膠下沿時(shí)也會(huì)出現(xiàn)條帶扭曲。成都瑞普信提供第三方WB基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。免疫熒光抗體第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)
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在做第三方檢測(cè)時(shí)為什么主帶之外有時(shí)會(huì)出現(xiàn)雜帶？導(dǎo)致雜帶出現(xiàn)的可能原因包括：抗體特異性不足，目的蛋白存在不同修飾狀態(tài)或有剪切降解形式，一抗或二抗使用過量，蛋白上樣量過大，曝光時(shí)間過長，膜漂洗不充分，等原因。通過條件優(yōu)化盡量減少雜帶出現(xiàn)，但當(dāng)抗體或樣品特性造成少量雜帶存在時(shí)，只要不影響主目的條帶判別并不影響數(shù)據(jù)圖片的應(yīng)用。為什么有時(shí)膠片會(huì)出現(xiàn)明顯較深的背景？在通過條件優(yōu)化排除諸如封閉不充分、樣品中存在雜質(zhì)、抗體過量、漂洗不充分等實(shí)驗(yàn)原因之外，當(dāng)特異性識(shí)別的目的條帶信號(hào)太弱時(shí)，為了顯示出目的條帶而不得不延長曝光時(shí)間，隨之使得背景變臟，此時(shí)關(guān)鍵點(diǎn)在于整個(gè)反應(yīng)的“性噪比”太低，比較好換用特異性、親和力更佳的一抗。成都瑞普信專業(yè)第三方檢測(cè)公司W(wǎng)B,QPCR,ELISA。
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