通過酵母雙雜篩選實驗,進一步研究AaWRKY9蛋白功能,結(jié)果篩選到了與AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白,并通過Y2H、BiFC、CoIP等進行了驗證確認。JAZs是JA介導(dǎo)的植物相應(yīng)中的負向調(diào)控因子,在毛狀體和老葉中高表達,在芽尖和嫩葉中表達量低。為確認AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促進青蒿素積累過程中的轉(zhuǎn)錄***功能,通過雙熒光素酶報告基因檢測實驗發(fā)現(xiàn),當(dāng)AaWRKY9與AaJAZ9共表達時,其轉(zhuǎn)錄活性被抑制,而使用MeJA處理后,這種抑制作用被抵消,且AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性增強,反向驗證實驗結(jié)果一致。說明JA可以通過降解JAZ9,提高AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性,促進青蒿素生物合成。酵母雜交技術(shù)兼具通量高、結(jié)果直觀、操作簡易,重復(fù)性好的優(yōu)勢。福建什么是酵母文庫做什么
母文庫實驗由歐易生物完成。2021年3月16日,寧波大學(xué)陳劍平院士、孫宗濤研究員為共同通訊作者,在PNAS雜志(IF:9.412)在線發(fā)表了題為“AclassofindependentlyevolvedtranscriptionalrepressorsinplantRNAvirusesfacilitatesviralinfectionandvectorfeeding”的研究論文,深入報道了在不同植物RNA病毒中一種***存在的、通過劫持茉莉酸信號途徑以協(xié)同促進病毒傳播和介體昆蟲攝食的新機制。植物病毒基因組通常*編碼少數(shù)幾個蛋白,它們必需依賴寄主植物才能完成自身的侵染和增殖。因此植物病毒往往通過其編碼的蛋白來劫持或者利用寄主因子來實現(xiàn)自身的復(fù)制,并在植物體內(nèi)傳播,產(chǎn)生系統(tǒng)性***。海南建庫酵母文庫博士期間長期從事酵母單/雙雜交文庫構(gòu)建及篩選的工作。
小歐從2018年即開始關(guān)注酵母雜交與高通量測序相結(jié)合的技術(shù)發(fā)展,如2017年CaoGang老師等發(fā)表的RLL-Y2H技術(shù),實現(xiàn)了文庫篩文庫可能,該技術(shù)通過對酵母雙雜常用載體的改造,并結(jié)合高通量測序,可直接獲得AD-BD互作蛋白對。所用方法相當(dāng)巧妙,感興趣的同學(xué)請點擊《當(dāng)酵母雙雜交遇到高通量測序》。鈕老師團隊之前的研究已經(jīng)鑒定了DAL1作為一種保守的針葉樹年齡生物標(biāo)記基因,在油松從營養(yǎng)生長到生殖生長的時相轉(zhuǎn)變過程中起重要作用。為了進一步理解年齡效應(yīng)如何驅(qū)動針葉樹的發(fā)育,闡明與DAL1相關(guān)的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)很關(guān)鍵。鈕老師團隊利用傳統(tǒng)的Y2H篩選技術(shù)結(jié)合NGS測序技術(shù),優(yōu)化得到了Y2H-seq技術(shù),與傳統(tǒng)的篩選測序相比,大幅度節(jié)省了時間和實驗成本。
進行了酵母雙雜交篩選實驗,結(jié)果顯示 MdMPK3 可以與 MdWRKY17 相互作用(圖 C),并且通過 BiFC、Co-IP 得以證實(圖 D-E)。MdMPK3 的激酶活性水平在炭疽菌***后也***上升(圖 B)。進一步的 BiFC 和 Co-IP 表明,MdMEK4 可以與 MdMPK3 相互作用(圖 F-G)。體外激酶試驗表明,MdWRKY17 能夠被MdMEK4- MdMPK3 級聯(lián)磷酸化(圖 H)。綜上,MdMEK4-MdMPK3 級聯(lián)磷酸化 MdWRKY17。與對照相比,MdWRKY17過表達植株中水楊酸含量降低,而RNAiMdWRKY17植株中水楊酸含量升高(圖A)。合作文章上百篇,平均影響因子高達7.124 歐易生物酵母文庫。
酵母文庫實驗:本研究報道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈現(xiàn)亞功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表達,而 OsNF-YB9 主要在發(fā)育中的胚乳中表達。在擬南芥 lec1-1 中異源表達 OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以彌補 lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失導(dǎo)致種子發(fā)育異常,種子變長、變窄、變薄,堊白率較高。此外,osnf-yb9 中淀粉合成相關(guān)基因的表達紊亂。OsNF-YB9 可以與主要在水稻胚乳中表達的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突變體種子與 osnf-yb9 突變體種子都表現(xiàn)出堊白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和擬南芥中的異位表達導(dǎo)致了種子變小。綜上表明,OsNF-YB9 在水稻種子發(fā)育中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。歐易生物持續(xù)為眾多植物學(xué)方向的研究學(xué)者提供持久可靠的科研助力。吉林生物技術(shù)酵母文庫報價
歐易生物一直助力于各酵母文庫實驗室更好的使用該項技術(shù),探索生命科學(xué)奧秘。福建什么是酵母文庫做什么
本研究利用水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫篩選,繪制了水稻轉(zhuǎn)錄因子和菌根共生相關(guān)基因之間的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。該網(wǎng)絡(luò)受到保守的磷感應(yīng)途徑統(tǒng)一控制,以磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子(PHR)為中心。PHRs 是菌根共生所必需的,通過 P1BS 順式作用元件調(diào)控菌根共生相關(guān)基因表達。高磷條件下,SPX蛋白抑制 OsPHR2 介導(dǎo)的對菌根共生相關(guān)基因表達的調(diào)控,進而抑制菌根共生。過表達 OsPHR2 可以部分拮抗磷介導(dǎo)的對菌根共生的抑制作用。本研究發(fā)現(xiàn),植物直接營養(yǎng)吸收和通過菌根共生的間接營養(yǎng)吸收,都受到相同的磷信號網(wǎng)絡(luò)統(tǒng)一調(diào)控。本研究將有助于高效用磷植株的培育。福建什么是酵母文庫做什么
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司坐落在聯(lián)航路1188號25幢,是一家專業(yè)的檢驗檢測服務(wù)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動,具體經(jīng)營項目以相關(guān)部門批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))一般項目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷售,儀器儀表的銷售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),會務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢。公司。公司目前擁有較多的高技術(shù)人才,以不斷增強企業(yè)重點競爭力,加快企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新,實現(xiàn)穩(wěn)健生產(chǎn)經(jīng)營。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營宗旨,深受客戶好評。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德,樹立了良好的科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢形象,贏得了社會各界的信任和認可。