酵母雙雜交(Y2H):植物轉(zhuǎn)錄因子(Plant transcripter factors, TFs)是調(diào)控植物生長發(fā)育和環(huán)境適應性的關(guān)鍵分子。雖然在一些數(shù)據(jù)庫中,如RiceSRTFDB (Priya and Jain, 2013), Ricettissuetfdb (Chen et al.,PlnTFDB (Pérez-Rodríguez et al., 2009)和PlantTFDB (Jin et al., 2017),可以預測水稻轉(zhuǎn)錄因子功能。但通過具體實驗研究,來直接證實轉(zhuǎn)錄因子對植物的調(diào)控作用仍然是必不可少的。酵母雙雜交(Y2H)和酵母單雜交(Y1H)是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-DNA互作的**常用技術(shù)。為了方便和促進水稻育種研究,陳凡老師與歐易生物達成合作,整合雙方優(yōu)勢資源,歷經(jīng)春秋與冬夏,成功構(gòu)建了基于粳稻(日本晴)基因組的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫。該項成果以“一種高效的篩選系統(tǒng)來鑒定大米轉(zhuǎn)錄因子的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)-DNA相互作用伙伴”為題,發(fā)表于雜志JGG上。酵母結(jié)構(gòu)及功能介紹酵母的應用。河南酵母文庫多少錢
單雜交篩選為了挖掘影響ALA誘導蘋果黃酮醇積累的關(guān)鍵性調(diào)控因子,作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 為誘餌,通過酵母單雜交篩選了ALA處理后的蘋果愈傷組織cDNA文庫。結(jié)果顯示篩選出的蛋白質(zhì)主要參與光合作用調(diào)控、碳糖代謝、氧化/滲透脅迫響應、***信號轉(zhuǎn)導、木質(zhì)素生物合成、果實成熟發(fā)育等過程,以及一些功能未知的蛋白質(zhì)。其中, MdSCL8轉(zhuǎn)錄因子,由于其在草莓中的同源基因已被報導與黃酮的合成有關(guān),引起了研究者的注意。進一步通過Y1H assay驗證確認了MdSCL8可以與MdFLS1啟動子互作(圖2A)。通過雙熒光素酶實驗和GUS檢測,發(fā)現(xiàn)MdSCL8可以負向調(diào)控MdFLS1啟動子活性(圖2B-D)。河北什么是酵母文庫歐易生物酵母平臺,從公司成立伊始,伴隨著公司和客戶一路成長,櫛風沐雨十多年。
酵母文庫篩選:為了系統(tǒng)地揭示調(diào)控叢枝菌根共生的轉(zhuǎn)錄因子,研究者以51個水稻基因的啟動子為誘餌,利用包含1570個水稻全長轉(zhuǎn)錄因子的文庫進行了酵母單雜交篩選。這51個基因主要是已報道的參與或調(diào)節(jié)菌根共生的基因。文庫篩選發(fā)現(xiàn)了一個由266個轉(zhuǎn)錄因子和47個啟動子高度連接的網(wǎng)絡,稱之為"叢枝菌根共生酵母單雜交網(wǎng)絡(YAM)"。平均每個啟動子可以和4個轉(zhuǎn)錄因子互作。266個轉(zhuǎn)錄因子分屬至少11個轉(zhuǎn)錄因子家族。72%(192個)的YAM轉(zhuǎn)錄因子在根中存在表達(FPKM>1)。與非定殖根相比,19個YAM轉(zhuǎn)錄因子在叢枝菌根***定殖的根中表達上調(diào)。
酵母文庫實驗由歐易生物完成。6.902)在線發(fā)表了題為“MKK4-MPK3-WRKY17-mediated salicylic acid degradation increases susceptibility to Glomerella leaf spot in apple”的研究論文,報道了一個蘋果炭疽葉枯病易感相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子 MdWRKY17,并對其作用機制進行了詳細探討。蘋果是世界上頗受歡迎的水果。蘋果炭疽葉枯病(Glomerellaleafspot,GLS)在我國多次爆發(fā),是蘋果相當有毀滅性的***病害之一,嚴重影響蘋果質(zhì)量和產(chǎn)量。但目前在蘋果中尚未鑒定出GLS的抗性基因。酵母文庫構(gòu)建方法酵母篩庫構(gòu)建酵母文庫的意義。
母文庫實驗由歐易生物完成。2021年3月16日,寧波大學陳劍平院士、孫宗濤研究員為共同通訊作者,在PNAS雜志(IF:9.412)在線發(fā)表了題為“AclassofindependentlyevolvedtranscriptionalrepressorsinplantRNAvirusesfacilitatesviralinfectionandvectorfeeding”的研究論文,深入報道了在不同植物RNA病毒中一種***存在的、通過劫持茉莉酸信號途徑以協(xié)同促進病毒傳播和介體昆蟲攝食的新機制。植物病毒基因組通常*編碼少數(shù)幾個蛋白,它們必需依賴寄主植物才能完成自身的侵染和增殖。因此植物病毒往往通過其編碼的蛋白來劫持或者利用寄主因子來實現(xiàn)自身的復制,并在植物體內(nèi)傳播,產(chǎn)生系統(tǒng)性***。酵母三雜交系統(tǒng)原理酵母雙雜交文庫構(gòu)建。青海篩庫酵母文庫
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酵母雙雜交文庫:瘧疾是人類**古老的疾病之一,每年4月25日是世界防治瘧疾日,瘧疾目前仍是公眾健康所面臨的**嚴重威脅之一?;谇噍锼氐穆?lián)合處理法(ACTs)是WHO推薦的比較好處理方案。因發(fā)現(xiàn)具有抗瘧作用的青蒿素,挽救了數(shù)百萬人的生命,屠呦呦教授獲得了2015年諾貝爾生理或醫(yī)學獎,從青蒿中分離出的青蒿素被推薦作為抗瘧疾的優(yōu)先藥物。之前研究表明,茉莉酸(JA)介導促成的青蒿素積累依賴于光,轉(zhuǎn)錄因子HY5也通過參與光信號調(diào)控促進青蒿素合成。然而,光與JA相互作用機制及其對青蒿素生物合成調(diào)控的潛在機理仍未得到解決。河南酵母文庫多少錢
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