甘肅發(fā)展酵母文庫(kù)做什么

酵母單雜交篩選：（4）在篩選到的轉(zhuǎn)錄因子中，***GL1促進(jìn)HIV-2轉(zhuǎn)錄。***GL1在免疫細(xì)胞中***表達(dá)，并與HIV的其他轉(zhuǎn)錄***因子，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用，本研究中顯示HEK293T細(xì)胞中，***GL1過(guò)表達(dá)后，與LTR連接的螢火素酶表達(dá)上升近2倍，說(shuō)明***GL1是一個(gè)轉(zhuǎn)錄***因子。值得一提的是，文章的背景介紹內(nèi)容中，對(duì)應(yīng)用其他技術(shù)（如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等）對(duì)HIV轉(zhuǎn)錄調(diào)控方向的已有成果分析，發(fā)現(xiàn)這些方法為HIV-1的復(fù)制和潛伏期提供了見(jiàn)解，但并沒(méi)有直接評(píng)估轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合和功能。文章中也對(duì)酵母單雜交技術(shù)與其他互作組技術(shù)（如Chip-seq、motif預(yù)測(cè)）進(jìn)行了比較分析，發(fā)現(xiàn)eY1H技術(shù)對(duì)已識(shí)別因子的驗(yàn)證率為30-60%，同等或優(yōu)于其他技術(shù)。smart酵母建庫(kù)和gateway酵母建庫(kù),滿足各類(lèi)客戶的需求。甘肅發(fā)展酵母文庫(kù)做什么

文章中酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物協(xié)助完成。近日，上海交通大學(xué)/復(fù)旦-交大-諾丁漢植物生物技術(shù)研發(fā)中心主任唐克軒課題組在New Phytologist（IF：8.512）發(fā)表了題為“AaWRKY9 contributes to light- and jasmonate-mediated to regulate the biosynthesis of artemisinin in Artemisia annua”的研究論文，揭示了青蒿轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9有助于光和茉莉酸信號(hào)所介導(dǎo)的青蒿素生物合成調(diào)控的新型分子機(jī)制，本研究通過(guò)藍(lán)/紅光誘導(dǎo)青蒿中青蒿素生物合成基因的表達(dá)，使用轉(zhuǎn)錄組分析確定了一個(gè)WRKY轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9，可明顯***青蒿素生物合成相關(guān)基因的表達(dá)。浙江篩庫(kù)酵母文庫(kù)歐易生物是國(guó)內(nèi)較早提供酵母雜交技術(shù)服務(wù)的生物公司，較早掌握Gateway和Smart兩種建庫(kù)方法。

酵母雙雜交（Y2H）：植物轉(zhuǎn)錄因子（Plant transcripter factors， TFs）是調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育和環(huán)境適應(yīng)性的關(guān)鍵分子。雖然在一些數(shù)據(jù)庫(kù)中，如RiceSRTFDB （Priya and Jain， 2013）， Ricettissuetfdb （Chen et al.，PlnTFDB （Pérez-Rodríguez et al.， 2009）和PlantTFDB （Jin et al.， 2017），可以預(yù)測(cè)水稻轉(zhuǎn)錄因子功能。但通過(guò)具體實(shí)驗(yàn)研究，來(lái)直接證實(shí)轉(zhuǎn)錄因子對(duì)植物的調(diào)控作用仍然是必不可少的。酵母雙雜交（Y2H）和酵母單雜交（Y1H）是被用于研究蛋白-蛋白以及蛋白-DNA互作的**常用技術(shù)。為了方便和促進(jìn)水稻育種研究，陳凡老師與歐易生物達(dá)成合作，整合雙方優(yōu)勢(shì)資源，歷經(jīng)春秋與冬夏，成功構(gòu)建了基于粳稻（日本晴）基因組的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)。該項(xiàng)成果以“一種高效的篩選系統(tǒng)來(lái)鑒定大米轉(zhuǎn)錄因子的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)-DNA相互作用伙伴”為題，發(fā)表于雜志JGG上。

酵母雙雜交表明擬南芥AtBT2蛋白可以與AtRGA互作。與對(duì)照相比，擬南芥bt1/2雙突變體幼苗高度降低，而硝酸鹽處理可以進(jìn)一步抑制其生長(zhǎng)，外源施加GA可以回復(fù)其生長(zhǎng)缺陷。在擬南芥中異源表達(dá)MdBT2可以明顯提高植株高度，而PAC處理則會(huì)抑制這種生長(zhǎng)的促進(jìn)作用。在擬南芥中異源表達(dá)MdRGL3a可以明顯抑制植株生長(zhǎng)，而硝酸鹽處理和MdBT2過(guò)表達(dá)則會(huì)緩解這種生長(zhǎng)抑制作用。外源GA處理可以逆轉(zhuǎn)以上對(duì)植株生長(zhǎng)的影響（圖A-D）。以上結(jié)果表明，BT蛋白通過(guò)DELLA蛋白調(diào)控植株生長(zhǎng)，這一機(jī)制在不同的植物中具有保守性。酵母文庫(kù)已知蛋白互作靈活定制建庫(kù)。

進(jìn)行了酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示 MdMPK3 可以與 MdWRKY17 相互作用（圖 C），并且通過(guò) BiFC、Co-IP 得以證實(shí)（圖 D-E）。MdMPK3 的激酶活性水平在炭疽菌***后也***上升（圖 B）。進(jìn)一步的 BiFC 和 Co-IP 表明，MdMEK4 可以與 MdMPK3 相互作用（圖 F-G）。體外激酶試驗(yàn)表明，MdWRKY17 能夠被MdMEK4- MdMPK3 級(jí)聯(lián)磷酸化（圖 H）。綜上，MdMEK4-MdMPK3 級(jí)聯(lián)磷酸化 MdWRKY17。與對(duì)照相比，MdWRKY17過(guò)表達(dá)植株中水楊酸含量降低，而RNAiMdWRKY17植株中水楊酸含量升高（圖A）。Gateway方法酵母雙雜交文庫(kù)構(gòu)建核系統(tǒng)與膜系。湖北建庫(kù)酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)

酵母結(jié)構(gòu)及功能介紹酵母的應(yīng)用 。甘肅發(fā)展酵母文庫(kù)做什么

酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn):本研究報(bào)道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈現(xiàn)亞功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表達(dá)，而 OsNF-YB9 主要在發(fā)育中的胚乳中表達(dá)。在擬南芥 lec1-1 中異源表達(dá) OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以彌補(bǔ) lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失導(dǎo)致種子發(fā)育異常，種子變長(zhǎng)、變窄、變薄，堊白率較高。此外，osnf-yb9 中淀粉合成相關(guān)基因的表達(dá)紊亂。OsNF-YB9 可以與主要在水稻胚乳中表達(dá)的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突變體種子與 osnf-yb9 突變體種子都表現(xiàn)出堊白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和擬南芥中的異位表達(dá)導(dǎo)致了種子變小。綜上表明，OsNF-YB9 在水稻種子發(fā)育中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。甘肅發(fā)展酵母文庫(kù)做什么

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