試劑盒技術(shù)原理：(1).抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。(2).結(jié)合在固相載體表面a的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。(3).酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。(4).受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。(5).此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。(6).加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用。浙江血清試劑哪個(gè)牌子好
試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了普遍的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。下面分析試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法。選擇試劑，選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣，可能原因：血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；浙江血清試劑哪個(gè)牌子好試劑盒吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
間接法可用于檢測未知抗體的試劑盒，試劑盒步驟如下：1.首先用包被緩沖液將已知抗原稀釋到1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；1.首先用包被緩沖液將已知抗原稀釋到1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌；4.（同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml；5.37℃孵育30-60分鐘，洗滌；較后一遍用DDW洗滌。
試劑盒因?yàn)榭乖⒖贵w的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每參與一種試劑孵育后，可通過洗刷除掉剩余的游離反應(yīng)物，然后保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。使用雙抗體夾心法測定標(biāo)本水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次參與，再與HRP符號的抗體結(jié)合，構(gòu)成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，通過完全洗刷后加底物TMB顯色。試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的效果下轉(zhuǎn)化成的黃色。ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多。
試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的過程：1、先把蛋白稀釋一定的倍數(shù)，比如說10倍、20倍稀釋（這樣可以大體確認(rèn)一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板2、再用一定稀釋度的陽性參閱血清和陰性參閱血清進(jìn)行孵育后洗刷，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗刷后，加底物溶液顯色，停止反應(yīng)后分別測定O.D值，挑選O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為適包被濃度。一般總是要挑選那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不挑選小于1.0的抗原濃度。陰性參閱血清O.D值要求<0.1-0.2。試劑盒酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。海南診斷試劑哪個(gè)牌子好
試劑盒靈敏、特異、簡略、敏捷、安穩(wěn)及易于自動(dòng)化操作。浙江血清試劑哪個(gè)牌子好
在試劑盒中通常有三次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶聯(lián)絡(luò)物，加底物。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，散布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振動(dòng)。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只需待血清天然凝聚、縮短后即可取得。試劑盒也可在板孔中參與稀釋液，然后在微型轟動(dòng)器上轟動(dòng)1分鐘以保證混和。通常說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超越一星期測定的需低溫冰存?？捎米髟噭┖袦y定的標(biāo)本十分較多，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其間某種抗體或抗原成份，試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的有些應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。在間接法試劑盒中可使本底加深。浙江血清試劑哪個(gè)牌子好