河南大學(xué)斑馬魚實驗

Novelobjecttest：每條魚別離轉(zhuǎn)入透明實驗池(25×20×15cm，長×寬×高);每個容器包含一個新目標(biāo)(藍色塑料立方體，3×3×1cm，長×寬×高)，以確定其對新穎性的呼應(yīng)(圖3a)。溫?zé)崴?25±1°C,pH7.2-7.6，硬度44.0-61.0mgCaCO3/L)置于測試槽中使水深到達10厘米。經(jīng)過5分鐘的習(xí)慣期后，將新目標(biāo)放置在魚缸的一角，讓魚自在探究8分鐘。6分鐘記載他們的行為軌道。為了便于剖析，實驗池實際上分為兩部分(新目標(biāo)區(qū)和無目標(biāo)區(qū))(圖3a)。咱們剖析了在虛擬切割的水槽兩部分所走過的總距離(cm)和所花費的時刻(s)。 斑馬魚基因保守性主要體現(xiàn)在與人類和其他脊椎動物基因的相似性上，包括與神經(jīng)系統(tǒng)、代謝系統(tǒng)等相關(guān)基因。河南大學(xué)斑馬魚實驗

別的還有科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，斑馬魚的腦部神經(jīng)元較為簡單和可猜測。這些研究成果證明了斑馬魚合適用作形式動物。現(xiàn)在咱們已經(jīng)知道，斑馬魚的基因與人類基因的相似度到達87%，這意味著在其身上做藥物試驗所得到的結(jié)果在大都情況下也適用于人體。此外，雌性斑馬魚可產(chǎn)卵200枚，胚胎在24小時內(nèi)就可發(fā)育成形，這使得生物學(xué)家能夠在同一代魚身上進行不同的試驗，進而研究病理演化過程并找到病因。正是通過在斑馬魚身上進行的試驗，生物學(xué)家發(fā)現(xiàn)，包含人類在內(nèi)的一些脊椎動物之所以產(chǎn)下奇異的雙頭幼仔是因為兩種基因活動紊亂形成的。云南斑馬魚實驗研究價值斑馬魚行為學(xué)剖析體系。

社交對魚進行交際測試所需的測試設(shè)備首要包括一個通明的Plexiglas十字槽(50×50×10cm，長×寬×高)（圖3e）。水槽的每只臂都被一個Plexiglas墻隔開。在水槽中，隨機挑選的一個末端腔室(其他三個腔室是空位)和中心腔室各包含一個相同處理的個體。轉(zhuǎn)移后，對魚進行2分鐘的習(xí)慣，記錄其行為8分鐘。數(shù)據(jù)剖析中，計算出魚在其同伴(交際圈)鄰近區(qū)域的時刻，作為對同種視覺影響的呼應(yīng)。習(xí)慣漆黑或噪音影響：open-fieldtank被用來評價魚對漆黑或噪音影響的驚嚇反應(yīng)。漆黑和噪聲影響實驗別離進行。簡略地說，連續(xù)的漆黑影響(5分鐘周期)通過放置在通明敞開設(shè)備底部的多個主動開/關(guān)白色LEDs陣列來傳遞。此外，用一個塑料立方體(15×9×0.5cm，長×寬×高)將其提升到100cm的高度，用手將其釋放到堅固的平面上，發(fā)生一系列的噪聲影響(圖5a、b)。用了一個俯視圖照相機來捕捉魚的動作。

斑馬魚胚胎的內(nèi)分泌系統(tǒng)高度敏感，使其成為檢測環(huán)境雌jisu的“生物探針”。丹麥技術(shù)大學(xué)團隊開發(fā)了基于斑馬魚胚胎的雌二醇響應(yīng)報告系統(tǒng)，通過將雌jisu受體α（ERα）基因與熒光素酶編碼序列融合，構(gòu)建出可在水體中檢測微量雌jisu的轉(zhuǎn)基因品系。實驗顯示，該系統(tǒng)對17β-雌二醇的檢測限低至0.01ng/L，較傳統(tǒng)ELISA法靈敏度提升100倍。利用該技術(shù)，研究團隊在污水處理廠出水口檢測到納克級雙酚A殘留，揭示了傳統(tǒng)處理工藝的局限性。在多環(huán)芳烴（PAHs）污染評估中，斑馬魚胚胎的芳烴受體（AhR）信號通路展現(xiàn)出獨特優(yōu)勢。法國國家科學(xué)研究中心團隊發(fā)現(xiàn)，PAHs暴露可使斑馬魚胚胎肝臟區(qū)域CYP1A酶活性在6小時內(nèi)上調(diào)20倍，且該響應(yīng)與PAHs的致ancer性呈劑量依賴關(guān)系。通過構(gòu)建AhR信號通路的數(shù)學(xué)模型，可預(yù)測不同PAHs混合物的聯(lián)合毒性，較傳統(tǒng)毒性當(dāng)量因子法準(zhǔn)確率提升35%。該技術(shù)已應(yīng)用于渤海灣近岸海域污染監(jiān)測，成功識別出多個PAHs污染熱點區(qū)域。光遺傳技術(shù)操控斑馬魚神經(jīng)元，研究神經(jīng)信號傳導(dǎo)路徑。

在國際上，斑馬魚模式生物的使用正逐漸拓展和深入到生命體的多種系統(tǒng)（例如，神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等）的發(fā)育、功能和疾?。ɡ纾窠?jīng)退行性疾病、遺傳性心血管疾病、糖尿病等）的研究中，并已應(yīng)用于小分子化合物的大規(guī)模新藥篩選。我國開展斑馬魚相關(guān)的研究無論在規(guī)模還是在重視程度上都遠遠落后于國際形勢發(fā)展的需要。推動和發(fā)展斑馬魚模式生物在我國生命科學(xué)研究中的***使用是本中心的宗旨。在國家科技部重大科學(xué)研究計劃的支持下，我們匯集優(yōu)勢，整合我國現(xiàn)有的斑馬魚主要研究力量，在未來幾年內(nèi)逐步建立全國共享的斑馬魚模式動物研究技術(shù)和資源庫，向國內(nèi)同行提供斑馬魚資源、信息和技術(shù)支撐。本著提高服務(wù)效率和質(zhì)量為原則，我們在上海和北京分別建立國家斑馬魚模式動物南方中心和北方中心。南方中心依托于中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院，北方中心依托于北京大學(xué)和清華大學(xué)。兩個中心本著優(yōu)勢互補的原則，共同開發(fā)研究技術(shù)和資源，以輻射狀向國內(nèi)研究人員提供服務(wù)，積極推進我國斑馬魚相關(guān)科學(xué)研究。斑馬魚胚胎對環(huán)境污染物敏感，是生態(tài)毒理學(xué)研究的重要工具。湛江斑馬魚平臺

化學(xué)誘變劑處理斑馬魚，可建立特定基因突變疾病模型。河南大學(xué)斑馬魚實驗

Openfieldtest（曠場試驗）為了探究運動和自發(fā)活動，我們描繪了魚的行為當(dāng)它們在Plexiglasopen-fieldapparatus（裝置、設(shè)備、儀器）中自在探究時（直徑20厘米；高10厘米）（圖1a）。魚別離轉(zhuǎn)移到魚缸中10分鐘；8分鐘內(nèi)的軌道由頂部視圖攝像機記錄下來進行分析。在試驗過程中，測量了受試者在中心和邊緣區(qū)域花費的時刻、移動的總間隔(cm)和平均速度(cm/s)。2、Noveltanktest（新型水槽測驗）本發(fā)明公開了一種通明的1.5升梯形水槽檢測裝置（15.2×27.9×22.5×7.2cm;高×上底×下底×寬）（圖1c）。魚在早上(9:00)或晚上(21:00)被放在這個水槽里10分鐘。8分鐘記錄他們的行為軌道。為了進行軌道分析，新型水槽實際上被分為三個水平段(上、中、下)。河南大學(xué)斑馬魚實驗