培養(yǎng)基配制:配制用水,培養(yǎng)基的大部分是水,所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標(biāo)準(zhǔn),水的電阻應(yīng)為200萬(wàn)歐姆,一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養(yǎng)基:培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,若pH值超過(guò)7.6或遠(yuǎn)低于6.8,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長(zhǎng)。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過(guò)處理。血清:培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無(wú)菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體,置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類(lèi)、時(shí)間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無(wú)血清培養(yǎng)基。滅菌過(guò)程數(shù)據(jù)可追溯,符合GLP/GMP質(zhì)量管理規(guī)范。 智能報(bào)警系統(tǒng)即時(shí)提示故障,縮短停機(jī)維護(hù)時(shí)間。云南瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器
干粉顆粒微生物培養(yǎng)基儲(chǔ)存條件:通常情況下,干粉培養(yǎng)基和顆粒培養(yǎng)基產(chǎn)品,在室溫干燥避光的儲(chǔ)存環(huán)境中,并注意密封存放,避免產(chǎn)品陽(yáng)光直射,室內(nèi)濕度與溫度太高,如不注意密封情況,顆粒粉末在會(huì)有結(jié)塊和受潮的現(xiàn)象,所以使用后一定要擰緊蓋子,注意防潮。關(guān)于儲(chǔ)存時(shí)長(zhǎng),只要嚴(yán)格按照培養(yǎng)基廠(chǎng)家的標(biāo)簽要求存放,未開(kāi)封的培養(yǎng)基可保存兩至三年。我們平常使用時(shí),干粉沒(méi)必要放在冰箱里,但如果在制備當(dāng)天打開(kāi)培養(yǎng)基后沒(méi)有用完,建議將其存放在冰箱中,減少受潮問(wèn)題但不要放置太多天??傊疀](méi)有開(kāi)封的干粉、顆粒培養(yǎng)基存放在陰涼干燥處即可。云南瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器溶解不完全需延長(zhǎng)加熱時(shí)間或降低投料量。
培養(yǎng)基的類(lèi)型:1、根據(jù)對(duì)培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分是否完全了解來(lái)區(qū)分,可以將培養(yǎng)基分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基。(1)天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基是指利用各種動(dòng)、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學(xué)成分,但一般來(lái)講,營(yíng)養(yǎng)是比較豐富的,微生物生長(zhǎng)旺盛,而且來(lái)源多方面,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠(chǎng)或批號(hào)等因素的影響。(2)合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是一類(lèi)化學(xué)成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成。這類(lèi)培養(yǎng)基化學(xué)成分精確、重復(fù)性強(qiáng),但價(jià)格昂貴,而微生物又生長(zhǎng)緩慢,所以它只適用于做一些科學(xué)研究,例如營(yíng)養(yǎng)、代謝的研究。(3)半合成培養(yǎng)基。
制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基:(1)方法步驟:計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板。(2)倒平板操作的步驟:①將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過(guò)火焰。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約10~20mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固,大約需5~10min。然后,將平板倒過(guò)來(lái)放置,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時(shí),才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):具有快速升溫和迅速冷卻功能!
利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基:包扎,分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。滅菌,按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。擺斜面,滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2。貯存,培養(yǎng)基在30℃下放置,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基是細(xì)胞生長(zhǎng)的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可按照以上步驟操作,在使用前需確保培養(yǎng)基的無(wú)菌性,以免影響細(xì)胞正常繁殖。**內(nèi)置冷卻系統(tǒng)**:部分培養(yǎng)基制備器配備水循環(huán)冷卻或風(fēng)扇冷卻功能。福建培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無(wú)孔隙和裂縫,以防培養(yǎng)基流進(jìn)去!云南瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器
天然培養(yǎng)基的血清種類(lèi):牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)很高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分很少。血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。云南瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器