培養(yǎng)基制備的基本方法:1.培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對。2、培養(yǎng)基的制備記錄,每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)推各稱,配方及其來源.和各種成份的牌號。較終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份。3.培養(yǎng)基成分的稱取。培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂.較好一次完成,不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。5、培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進行pH的初步調(diào)正。物料殘留嚴(yán)重需優(yōu)化清洗程序周期設(shè)定。內(nèi)蒙古進口培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的性能測試:1.外觀控制:制備好的培養(yǎng)基應(yīng)有相應(yīng)的顏色,一般的培養(yǎng)基應(yīng)澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應(yīng)檢查培養(yǎng)基的顏色是否發(fā)生變化,是否蒸發(fā)/脫水。2.污染控制:從每批制備好的培養(yǎng)基中選取部分進行污染測試(無菌試驗),確定無微生物生長方可使用。3.性能測試:(1)測試菌株選擇:測試菌株是具有其表示種的穩(wěn)定特性并能有效證明實驗室特定培養(yǎng)基較佳性能的一套菌株。(3)半定量測試方法(改進的劃線法接種法)。(4)定性測試方法(平板接種觀察法)。用接種環(huán)取測試菌培養(yǎng)物,在測試培養(yǎng)基表面劃平行直線。江蘇實驗室培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無孔隙和裂縫,以防培養(yǎng)基流進去!
配制培養(yǎng)基的原則:調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh)各種微生物對培養(yǎng)基的Eh要求不同。適宜好氧微生物生長的Eh值一般為+0.3~+0.4V,厭氧微生物只能在+0.1V以下生長,因此,培養(yǎng)好氧微生物必須保證氧的供應(yīng),可在培養(yǎng)基中加入氧化劑提高Eh值。調(diào)節(jié)滲透壓多數(shù)微生物能耐受較大范圍滲透壓的變化。培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度過大,會使?jié)B透壓過高,使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長。低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養(yǎng)基時要掌握營養(yǎng)物質(zhì)的濃度。常在培養(yǎng)基中加人適量的Nacl以提高滲透壓。原料來源的選擇力求節(jié)約:配制培養(yǎng)基還應(yīng)遵循力求節(jié)約的原則,盡量選用價格便宜、來源方便的原料。特別是在工業(yè)發(fā)酵中,培養(yǎng)基用量大,更應(yīng)注意利用低成本的原料,降低產(chǎn)品成本。
培養(yǎng)基的實驗室制備:1.pH的測定和調(diào)整:用pH計測定pH,必要時在滅菌前調(diào)節(jié)pH,除特殊說明外,培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25℃時,要求pH的變化不超過0.2pH單位.通常使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L(約1mol/L)的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH。如果滅菌后調(diào)節(jié)pH,溶液需滅菌。注:商品化培養(yǎng)基在高壓滅菌前后pH可能發(fā)生明顯變化,但使用蒸餾水或去離子水時,滅菌前無需調(diào)節(jié)pH。2.分裝:將配置好的培養(yǎng)基分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦?,容器的體積至少為體積的1.2倍。培養(yǎng)基制備器負(fù)載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生!
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:1.培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應(yīng)隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的較終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。2.培養(yǎng)基的過濾澄清液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達(dá)到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。適用于微生物學(xué)、制藥及食品檢測領(lǐng)域培養(yǎng)基制備。 精確pH值調(diào)控功能確保培養(yǎng)基化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定性。吉林全自動培養(yǎng)基制備器
應(yīng)用于疫苗研發(fā)領(lǐng)域時能確保培養(yǎng)基無菌要求。 精確計時功能避免過度滅菌導(dǎo)致的營養(yǎng)流失。內(nèi)蒙古進口培養(yǎng)基制備器
天然培養(yǎng)基中血清主要作用:提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)。提供和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機械損傷。內(nèi)蒙古進口培養(yǎng)基制備器