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培養(yǎng)基制備程序:全自動培養(yǎng)基制備器可以快速的準(zhǔn)備好滅菌,放入滅菌鍋,“水套系統(tǒng)”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導(dǎo)),加入培養(yǎng)基原料,準(zhǔn)備啟動滅菌程序。培養(yǎng)基可以直接在培養(yǎng)基制備器內(nèi)懸浮溶解。強(qiáng)力磁力攪拌培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性得到確保,并避免凝結(jié)。培養(yǎng)基還可以選擇使用水浴模式預(yù)先溶解。沒有經(jīng)過專門培訓(xùn)的人員由于直觀的圖形化界面也能夠簡單的進(jìn)行操作。用戶對于多達(dá)50個滅菌參數(shù)可以自定義設(shè)置,它們可以被儲存起來并隨時調(diào)用。單獨(dú)排水通道設(shè)計有效防止冷凝水殘留污染介質(zhì)。 支持遠(yuǎn)程監(jiān)控功能,便于多實(shí)驗(yàn)室協(xié)同管理。浙江實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基是生物制品領(lǐng)域中常用的物質(zhì),在細(xì)菌和細(xì)胞培養(yǎng)中十分必要,但是現(xiàn)有技術(shù)中有些培養(yǎng)基的某種組份容易分解,造成保存時間短等問題,導(dǎo)致培養(yǎng)基的使用成本十分高。其中,在動物培養(yǎng)基中,谷氨酰胺是一種必要的組份,但是在常溫下,很短的時間內(nèi),約7-10日中培養(yǎng)基中的谷氨酰胺成份就可降解90%以上,這給其商品化帶來很大的困難。這樣的培養(yǎng)基在現(xiàn)有技術(shù)中很多,都具有上述的缺陷,例如,中國CN1087778C公開了一種雜交瘤細(xì)胞的無血清培養(yǎng)基,其中包含有谷氨酰胺成份,但是這種培養(yǎng)基的保存時間十分有限,很難達(dá)到商業(yè)使用的目的。內(nèi)蒙古實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器負(fù)載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生。
制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基:培養(yǎng)基滅菌后,如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基,須趁培養(yǎng)基未凝固時進(jìn)行。(1)制作斜面培養(yǎng)基。在實(shí)驗(yàn)臺上放1支長0.5-1米左右的木條,厚度為1厘米左右,將試管頭部枕在木條上,使管內(nèi)培養(yǎng)基自然傾斜,凝固后即成斜面培養(yǎng)基。(2)制作平板培養(yǎng)基。將剛剛滅過菌的盛有培養(yǎng)基的錐形瓶和培養(yǎng)皿放在實(shí)驗(yàn)臺上,點(diǎn)燃酒精燈,右手托起錐形瓶瓶底,左手拔下棉塞,將瓶口在酒精燈上稍加灼燒,左手打開培養(yǎng)皿蓋,右手迅速將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,每皿約倒入10毫升,以鋪滿皿底為度。鋪放培養(yǎng)基后放置15分鐘左右,待培養(yǎng)基凝固后,再5個培養(yǎng)皿一疊,倒置過來,平放在恒溫箱里,24小時后檢查,如培養(yǎng)基末長雜菌,即可用來培養(yǎng)微生物。
培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng):確認(rèn)工作細(xì)胞庫是否被污染,確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染,確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細(xì)菌、及支原體無菌試驗(yàn)來確認(rèn)并排除。同時要對無菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設(shè)備、過濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證,確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個月進(jìn)行驗(yàn)證,后者應(yīng)在每次除菌前、后進(jìn)行驗(yàn)證工作(至少應(yīng)在除菌后進(jìn)行一次)。另外,應(yīng)將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴(yán)格分開,并有各自獨(dú)自的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,有毒區(qū)對無毒區(qū)應(yīng)保持相對負(fù)壓,防止病毒對培養(yǎng)細(xì)胞(尤其是細(xì)胞庫)的污染。培養(yǎng)基制備器解凍血清時,請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)!
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:1.pH的測定和調(diào)整:用pH計測定pH,必要時在滅菌前調(diào)節(jié)pH,除特殊說明外,培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25℃時,要求pH的變化不超過0.2pH單位.通常使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L(約1mol/L)的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH。如果滅菌后調(diào)節(jié)pH,溶液需滅菌。注:商品化培養(yǎng)基在高壓滅菌前后pH可能發(fā)生明顯變化,但使用蒸餾水或去離子水時,滅菌前無需調(diào)節(jié)pH。2.分裝:將配置好的培養(yǎng)基分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦校萜鞯捏w積至少為體積的1.2倍。**小規(guī)模實(shí)驗(yàn)室**:選擇帶高效加熱/冷卻功能的臺式培養(yǎng)基制備儀。重慶Systec培養(yǎng)基制備器
真空抽濾不暢應(yīng)清潔濾膜及檢查氣密性。浙江實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的購置:從培養(yǎng)基自身的質(zhì)量來看,不同生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品,甚至同一廠家不同批號的產(chǎn)品都會存在差異。依據(jù)ISO/IEC17025《檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》,對培養(yǎng)基的供應(yīng)企業(yè)進(jìn)行評價后選擇合格的供應(yīng)商,這是培養(yǎng)基購買過程中重要的步驟。應(yīng)選擇產(chǎn)品市場信譽(yù)度高、有質(zhì)量保證能力和服務(wù)保證能力的企業(yè);企業(yè)是否通過了質(zhì)量管理體系的認(rèn)證是較為客觀的評價指標(biāo)。要求生產(chǎn)企業(yè)提供:培養(yǎng)基成分名稱及產(chǎn)品編號、批號、使用前的pH、儲藏信息和有效期、性能評價和所用測試菌株、技術(shù)數(shù)據(jù)清單、質(zhì)控證書以及必要的安全/危害數(shù)據(jù)等材料。浙江實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器