緩沖液中有氣泡○上柱前將緩沖液脫氣○在緩沖液入口使用空氣感應(yīng)器溫度影響,如在冷室操作后馬上在室溫操作,或低溫緩沖液直接在室溫使用○將緩沖液在使用前達(dá)到熱平衡2.層析柱干了還可以再使用嗎?○通常不可以,但也取決于具體的純化需求。3.膠平面與柱頭有間隙怎么辦?由于不當(dāng)裝填或者篩網(wǎng)孔徑與填料粒徑不匹配,導(dǎo)致填料漏出○更換篩網(wǎng),重新裝填,層析柱堵塞,導(dǎo)致反壓增大○根據(jù)說明書清洗○更換濾膜○樣品上柱前先澄清柱床裝填太差,裝柱過程中未有效壓縮填料○調(diào)整柱頭高度,測柱效填料被用于條件,如有機(jī)溶劑○檢查緩沖液,選擇合適的緩沖液條件江陰源景智能科技有限公司層析柱,易于維護(hù)和保養(yǎng)。莆田實(shí)驗(yàn)室玻璃層析柱圖片
氣相層析柱定義:將氣體混合物分離成其組分的方法,基于化合物在不同固定相中的分配系數(shù)差異實(shí)現(xiàn)分離。應(yīng)用場景:適用于分離和檢測揮發(fā)性有機(jī)化合物,如酯類、醇類、醛類、酮類、芳香族化合物等。液相層析柱定義:將液體混合物分離成其組分的方法,基于化合物在不同移動相和固定相中的親和性差異實(shí)現(xiàn)分離。應(yīng)用場景:適用于分離和檢測極性化合物,如氨基酸、核苷酸、糖類、酸類、堿類等。離子交換層析柱定義:將離子混合物分離成其組分的方法,基于離子在固定相中的交換能力實(shí)現(xiàn)分離。應(yīng)用場景:適用于分離和檢測帶電離子,如氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸等,特別適用于從血清和尿液中分離蛋白質(zhì)和多肽。莆田實(shí)驗(yàn)室玻璃層析柱圖片江陰源景智能科技的層析柱,能適應(yīng)不同規(guī)模的分離任務(wù)。
層析柱(chromatographycolumn)是一種在層析技術(shù)中發(fā)揮關(guān)鍵作用的裝置,以下是關(guān)于層析柱的一些要點(diǎn):結(jié)構(gòu)組成方面:通常有柱體(常見的如玻璃管、有機(jī)玻璃管、不銹鋼管等材質(zhì))、上下端的密封部件(防止物質(zhì)泄漏)、內(nèi)部有起分離作用的固定相(如凝膠、硅膠、氧化鋁、離子交換樹脂等不同材料,填充在柱內(nèi))、有的還可能配備有分布器(使樣品和流動相均勻分布進(jìn)入柱內(nèi))、濾網(wǎng)(支撐固定相)等。工作原理方面:基于混合物中各組分在固定相和流動相之間分配系數(shù)(或吸附、解吸、親和力、分子大小等其他特性)的差異而實(shí)現(xiàn)分離。當(dāng)流動相(液體或氣體)攜帶樣品通過層析柱時(shí),由于不同成分與固定相的相互作用不同,在柱內(nèi)的遷移速度有差異,從而在柱內(nèi)形成不同的區(qū)帶,隨著流動相不斷流過,各組分逐步在柱的不同位置流出,實(shí)現(xiàn)分離。
上樣后用平衡洗脫液洗去未吸附在親和吸附劑上的雜質(zhì)。平衡緩沖液的流速可以快一些,但如果待分離物質(zhì)與配體結(jié)合較弱,平衡緩沖液的流速還是較慢為宜。如果存在較強(qiáng)的非特異性吸附,可以用適當(dāng)較高離子強(qiáng)度的平衡緩沖液進(jìn)行洗滌,但應(yīng)注意平衡緩沖液不應(yīng)對待分離物質(zhì)與配體的結(jié)合有明顯影響,以免將待分離物質(zhì)同時(shí)洗下。親和層析的另一個(gè)重要的步驟就是要選擇合適的條件使待分離物質(zhì)與配體分開而被洗脫出來。親和層析的洗脫方法可以分為兩種:特異性洗脫和非特異性洗脫。特異性洗脫是指利用洗脫液中的物質(zhì)與待分離物質(zhì)或與配體的親和特性而將待分離物質(zhì)從親和吸附劑上洗脫下來。江陰源景智能科技的層析柱,分離精度高效果好。
當(dāng)待分離物質(zhì)和配體結(jié)合較強(qiáng)時(shí),可以通過選擇適當(dāng)?shù)膒H、離子強(qiáng)度等條件降低待分離物質(zhì)與配體的親和力,具體的條件需要在實(shí)驗(yàn)中摸索??梢赃x擇梯度洗脫方式,這樣可能將親和力不同的物質(zhì)分開。如果希望得到較高濃度的待分離物質(zhì),可以選擇酸性或堿性洗脫液,或較高的離子強(qiáng)度一次快速洗脫,這樣在較小的洗脫體積內(nèi)就能將待分離物質(zhì)洗脫出來。層析柱使用指南,幫您在實(shí)驗(yàn)過程中從容應(yīng)對各種突發(fā)狀況,更好的完成實(shí)驗(yàn)操作。1.層析柱進(jìn)氣泡怎么辦?空氣進(jìn)入,如緩沖液走空,連接進(jìn)入系統(tǒng)過程中○用純水反向沖洗,如果有柱位閥可直接切換流向,沒有的話可將柱子反接○對于大多數(shù)層析柱來說可用乙醇沖洗,以提高排氣效率特殊篩板設(shè)計(jì),防止填料流失!無錫中小試層析柱工廠直銷
源景智能科技的層析柱,以先進(jìn)技術(shù)保障分離效果。莆田實(shí)驗(yàn)室玻璃層析柱圖片
層析柱與液相柱的區(qū)別1、壓力液相色譜柱(尤其是分析性高效液相色譜):壓力較高,一般為10-20Mpa層析柱:一般為常壓,或使用真空泵(0.1Mpa左右)2、填料液相色譜柱:粒徑較小(常規(guī)5-20um)層析柱:粒徑較大3、分離度由第二項(xiàng)決定,粒徑越小,單位長度下理論塔板數(shù)越高液相色譜柱:分離度比層析柱好4、效率液相色譜柱:分離速度快,一般在一小時(shí)內(nèi)層析柱:分離時(shí)間長,一小時(shí)以上。親和層析一般用于純化蛋白質(zhì)和核酸等大分子物質(zhì)的方法的主要依據(jù)是各種大分子物質(zhì)之間理化特性的差異性。下面我們來分析一下親和層析過程中的注意事項(xiàng)。莆田實(shí)驗(yàn)室玻璃層析柱圖片