細(xì)胞培養(yǎng)實驗室之無菌操作區(qū)
無菌操作室：無菌操作區(qū)只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域，比較好能與外界隔離，不能穿行或受其他干擾。理想的無菌操作室應(yīng)劃為三部分：
a)更衣室—供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b)緩沖間—位于更衣間與操作間之間，目的是為了保證操作間的無菌環(huán)境，同時可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。
c)無菌操作間—直用于無菌操作、細(xì)胞培養(yǎng)。其大小要適當(dāng)，且其頂部不宜過高（不超過2.5m）以保證紫外線的有效滅菌效果；墻壁光滑無死角以便清潔和消毒。工作臺安置不應(yīng)靠墻壁，臺面要光滑壓塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。
無菌操作間的空氣消毒：
紫外線燈—產(chǎn)生臭氧，并且室內(nèi)溫度及濕度均較高，不利于工作人員健康?？諝膺^濾的恒溫恒濕裝置—比較好。
無臭氧紫外線消毒器電子消毒滅菌器-在高壓電場作用下，電子管的內(nèi)外電極發(fā)生強烈電子轟擊，使空氣電離而將空氣中的氧轉(zhuǎn)換成臭氧。臭氧是一種強氧化劑，能同細(xì)菌的胞膜及酶蛋白氫硫基進行氧化分解反應(yīng)，從而靠臭氧氣體彌漫性擴散達(dá)到殺菌之目的，消毒時沒有死角。消毒后空間的殘留臭氧只需30～40min即能自行還原成氧氣，空氣不留異味，消毒物體表面不留殘毒。 全自動細(xì)胞計數(shù)儀的標(biāo)準(zhǔn)是什么？重慶特點細(xì)胞計數(shù)儀廠家現(xiàn)貨
如何獲取高質(zhì)量的細(xì)胞懸液，下面就帶您一步步***從組織到細(xì)胞懸液的旅程，讓細(xì)胞懸液制備不再成為困擾您的難題。
樣本準(zhǔn)備
新鮮組織樣本是制備細(xì)胞懸液的首要條件，新鮮組織從***取下后，去除周圍的脂肪、結(jié)締組織或者壞死組織，用預(yù)冷的PBS或者生理鹽水沖洗干凈，快速轉(zhuǎn)移到解離實驗室進行細(xì)胞懸液制備，一般1個黃豆大小的組織量（200 mg）即可滿足一次組織解離。如果收集到新鮮樣本后無法立即進行懸液制備，可暫時用組織保存液4℃保存，盡快完成細(xì)胞懸液制備。 四川微型細(xì)胞計數(shù)儀價格多少全自動細(xì)胞計數(shù)儀的成本。
一般拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？
收到細(xì)胞先不開蓋,用酒精將整個細(xì)胞瓶外壁進行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各兩張），排除細(xì)胞本身污染的情況。
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活死細(xì)胞的鑒別方法
活細(xì)胞的鑒定在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)上具有很重要的意義。細(xì)胞培養(yǎng)過程中要隨時記錄細(xì)胞的生長情況，需要經(jīng)常測定細(xì)胞的存活率；在zhong瘤細(xì)胞的研究中，為了檢驗各種藥物對zhong瘤細(xì)胞的殺傷力，也需要測定zhong瘤細(xì)胞的存活率。在臨床醫(yī)學(xué)中死活細(xì)胞的鑒定也有很大的應(yīng)用，例如為了檢測某一男子的生育能力，測定精子細(xì)胞的存活力是比較常用的辦法。死活細(xì)胞的鑒定方法有很多種，常用的有染色法和儀器分析法。染色法簡便，易于操作，但是通過直接的形態(tài)觀察來鑒別細(xì)胞死活，實驗結(jié)果很容易受操作者的主觀因素的影響，存在一定的誤差，所以，在實際操作中也常采用一些儀器來進行精確的批量檢測。 細(xì)胞計數(shù)儀的使用難度。
染色法鑒定機理
染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法，根據(jù)染色機理的不同，染料或使死細(xì)胞著色，或使活細(xì)胞著色。死活細(xì)胞在生理機能和性質(zhì)上的差異主要包括：
死活細(xì)胞細(xì)胞膜通透性的差異：
活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜，對細(xì)胞起保護和屏障作用，只允許物質(zhì)選擇性的通過；而細(xì)胞死亡之后，細(xì)胞膜受損，通透性增加。常用的以臺盼藍(lán)鑒別細(xì)胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。
臺盼藍(lán)，又稱錐藍(lán)，是一種陰離子型染料，不能透過完整的細(xì)胞膜。所以經(jīng)臺盼藍(lán)染色后只能使死細(xì)胞著色，而活細(xì)胞不被著色 全自動細(xì)胞計數(shù)儀使用范圍。四川微型細(xì)胞計數(shù)儀價格多少
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眾所周知，活細(xì)胞密度(VCD)和活率(viability)是評估哺乳動物細(xì)胞系生長狀態(tài)的重要指標(biāo)。生物制藥研發(fā)人員進行懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，每天所不能避免的工作，就是取樣計數(shù)。使用細(xì)胞計數(shù)板進行人工計數(shù)無疑是金標(biāo)準(zhǔn)方法。
但這個傳統(tǒng)方法其勞動強度十分驚人，樣品量少的時候還能吃得消，樣品量大一些，甚至于要做大規(guī)模的DOE實驗時，估計很多實驗人員想死的心都會有。而且人工計數(shù)有較強的主觀性，對操作人員的經(jīng)驗及操作熟練度有一定要求，導(dǎo)致有時候數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性和可比性會受到質(zhì)疑。
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