經典的細胞計數(shù)原理:臺盼藍
臺盼藍(Trypan Blue)是組織和細胞培養(yǎng)中常用的死細胞鑒定染色方法之一。正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍,細胞不被染色;而死細胞的胞膜不完整,通透性增加,可使臺盼藍滲入將細胞染成藍色。因此,借助臺盼藍染色可以簡單、快速地區(qū)分活細胞和死細胞。
細胞損傷或死亡時,臺盼藍可穿透變性的細胞膜使其變色,活細胞能阻止染料進入細胞內細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1混合混勻(終濃度0.04%) 細胞計數(shù)儀的使用難度。四川常規(guī)細胞計數(shù)儀廠家現(xiàn)貨
在各種細胞計數(shù)和活率分析方法中,臺盼藍染色細胞計數(shù)無疑是細胞活率分析的金標準。目前,通過臺盼藍染色分析細胞活率的方法包括:傳統(tǒng)的光學顯微鏡+血球計數(shù)板法,也有市場上很普遍的插片式半自動細胞計數(shù)儀,以及無需手動混勻和染色的全自動細胞計數(shù)和活率分析儀。
其中,后兩個分析儀器的出現(xiàn),不僅很大程度地解放了人力,同時相比于顯微鏡+血球計數(shù)板法會更省時,更合規(guī),所以被各大制藥企業(yè)所使用。而全自動細胞計數(shù)和活率分析儀更是在工藝開發(fā)和生產質控方面表現(xiàn)出特有的優(yōu)勢,即減少了人為的操作誤差和提高了儀器間數(shù)據(jù)的一致性而廣受歡迎。 遼寧微型細胞計數(shù)儀全自動細胞計數(shù)儀的耗材貴嗎?
原代培養(yǎng)及其操作步驟
從供體內取出組織后,經機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群,使之在體外模擬人體生理環(huán)境,在無菌、適當溫度和一定的營養(yǎng)條件下,生存、生長和繁殖。原代培養(yǎng)細胞常有不同的細胞成分,生長緩慢,但是更能說明所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞培養(yǎng)做各種實驗,如藥物測試、細胞分化及病毒學方面的試驗效果很好。
拓開細胞計數(shù)儀,擁有自動化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢,能夠幫助您在實驗室里高效率,高標準的完成細胞計數(shù)和細胞檢測等工作,是您細胞科研領域的強力伙伴。
細胞培養(yǎng)實驗室之孵育區(qū)以及制備,儲藏,清洗和消毒滅菌區(qū)
孵育區(qū)
本區(qū)對無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴格,但仍需清潔無塵,因此也應設置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進行,后者費用高,一般實驗室多采用孵箱進行工作。
制備區(qū)
在該區(qū)主要進行培養(yǎng)液及有關培養(yǎng)用的液體等的制備。
儲藏區(qū)
主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等,此環(huán)境也需要清潔無塵。
清洗和消毒滅菌區(qū)
清潔和消毒滅菌區(qū)應與其他區(qū)域分開,主要進行所有細胞培養(yǎng)器皿的清洗、準備、消毒及三蒸水制備等工作。 細胞計數(shù)儀應該怎么選擇?
細胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總
貼壁細胞如何進行傳代?
去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4mlPBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。 細胞計數(shù)儀是必備的儀器嗎?湖北智能細胞計數(shù)儀銷售
全自動細胞計數(shù)儀的優(yōu)點。四川常規(guī)細胞計數(shù)儀廠家現(xiàn)貨
細胞接種密度多少合適?
依照細胞株基本數(shù)據(jù)上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長的一個重要原因。按照我們的經驗:一般倍增時間24 h內的細胞,傳代比率1:6-1:12為宜,倍增時間24-48 h的細胞,傳代比率1:3-1:8為宜,倍增時間超過48h的細胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。
如何預防細胞培養(yǎng)中黑點的產生?
掌握細胞傳代的比較好時機,不要細胞長老了再傳代;掌握好消化時間,防止消化過度產生細胞碎片;減少血清等試劑的凍融次數(shù);將培養(yǎng)液的PH調到比較好;嚴格控制水質和器皿的清潔。 四川常規(guī)細胞計數(shù)儀廠家現(xiàn)貨
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