細(xì)胞離心下來(lái)的離心速率應(yīng)為多少?
細(xì)胞傳代或凍存時(shí)欲回收細(xì)胞,其離心速度一般為800-1000 rpm/min,室溫離心5-8分鐘,轉(zhuǎn)速過(guò)高,將造成細(xì)胞破裂死亡。
如何用臺(tái)盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞?
用無(wú)血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200~2000 個(gè)/毫升,在0.1 毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1 毫升的0.4%的臺(tái)盼蘭溶液。輕輕混勻,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞。活細(xì)胞排斥臺(tái)盼蘭,因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞,注意計(jì)數(shù)需在加入臺(tái)盼藍(lán)10min內(nèi)完成。有細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的,可直接用計(jì)數(shù)儀進(jìn)行。 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀應(yīng)該怎么選擇?寧波現(xiàn)代細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
單細(xì)胞測(cè)序?qū)嶒?yàn)的第一步是單細(xì)胞懸液的制備,而懸液制備中細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性直接影響單細(xì)胞測(cè)序的數(shù)據(jù)質(zhì)量,但是關(guān)于細(xì)胞計(jì)數(shù)您真的了解嗎?
目前細(xì)胞計(jì)數(shù)主要使用臺(tái)盼藍(lán)染色法和雙熒光AO/PI染色法。
1)臺(tái)盼藍(lán)染色原理:臺(tái)盼藍(lán)不能透過(guò)活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜,故活細(xì)胞不著色。而死細(xì)胞的細(xì)胞膜透性增高,可使染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使細(xì)胞著色(藍(lán)色)。
2)雙熒光AO/PI染色原理:吖啶橙(AO)可以通過(guò)完整的細(xì)胞膜,嵌入所有細(xì)胞(活細(xì)胞和死細(xì)胞)的細(xì)胞核,呈現(xiàn)綠色熒光;碘化丙啶(PI)只能通過(guò)不完整的細(xì)胞膜,即死細(xì)胞的細(xì)胞膜,嵌入所有死細(xì)胞的細(xì)胞核,呈現(xiàn)紅色熒光。
拓開(kāi)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,擁有自動(dòng)化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢(shì),能夠幫助您在實(shí)驗(yàn)室里高效率,高標(biāo)準(zhǔn)的完成細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞檢測(cè)等工作,是您細(xì)胞科研領(lǐng)域的強(qiáng)力伙伴。 重慶發(fā)展細(xì)胞計(jì)數(shù)儀廠家現(xiàn)貨全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的缺點(diǎn)。
細(xì)胞計(jì)數(shù)有多重要?這個(gè)答案想必不用回答,大家都心里有數(shù)。畢竟我們都曾經(jīng)歷過(guò),花了一整天的時(shí)間制備細(xì)胞、染色、分選,進(jìn)行一個(gè)精密計(jì)劃的實(shí)驗(yàn),結(jié)果卻因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)細(xì)胞量卻不夠而被迫結(jié)束。如今圈子里常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法是顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板,然而隔壁實(shí)驗(yàn)室的小明都在用自動(dòng)的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀了。但一些只相信所見(jiàn)即所得的小伙伴,對(duì)于自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)仍舊不太信任,因此體貼如我就為大家比對(duì)一下自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和血球計(jì)數(shù)板。希望大家能有一個(gè)直觀的印象。
染色法鑒定機(jī)理
染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法,根據(jù)染色機(jī)理的不同,染料或使死細(xì)胞著色,或使活細(xì)胞著色。死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異主要包括:
死活細(xì)胞細(xì)胞膜通透性的差異:
活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜,對(duì)細(xì)胞起保護(hù)和屏障作用,只允許物質(zhì)選擇性的通過(guò);而細(xì)胞死亡之后,細(xì)胞膜受損,通透性增加。常用的以臺(tái)盼藍(lán)鑒別細(xì)胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。
臺(tái)盼藍(lán),又稱錐藍(lán),是一種陰離子型染料,不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜。所以經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)染色后只能使死細(xì)胞著色,而活細(xì)胞不被著色 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的評(píng)價(jià)。
對(duì)比細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和血球計(jì)數(shù)板。
對(duì)比1:準(zhǔn)確度主觀差異性不論采用哪種細(xì)胞計(jì)數(shù)方法,依靠操作人員的判斷都會(huì)導(dǎo)致結(jié)果出錯(cuò)。TANK-CA0008全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器采用了先進(jìn)的算法來(lái)確定比較好焦距和光強(qiáng)度;可去除諸多主觀變量,同時(shí)還可節(jié)省時(shí)間。利用定量方法,根據(jù)細(xì)胞大小、亮度和圓度對(duì)細(xì)胞進(jìn)行設(shè)門(mén),而不是依靠操作人員的判斷,這有助于減少主觀性錯(cuò)誤,提高樣本和用戶間的重復(fù)性
1. 采用血球計(jì)數(shù)板與 TANK-CA0008全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器進(jìn)行計(jì)數(shù)的用戶差異比較。由三位不同的操作人員,采用 TANK-CA0008全自動(dòng) 細(xì)胞 計(jì)數(shù)儀以及血球計(jì)數(shù)板和顯微鏡,對(duì)相同的 A549、COS-7、HeLa 和 U2OS 細(xì)胞樣本進(jìn)行計(jì)數(shù)。血球計(jì)數(shù)板的用戶間差 異明顯高于TANK-CA0008全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù) 儀器。 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的使用評(píng)價(jià)。河北通用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀咨詢問(wèn)價(jià)
全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的成本。寧波現(xiàn)代細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室之凈化工作臺(tái)
凈化工作臺(tái):操作簡(jiǎn)單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。一般細(xì)菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種:a)側(cè)流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。
凈化工作臺(tái)工作原理(大致相同)——通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾,由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱,再經(jīng)高效空氣過(guò)濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區(qū),從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。
側(cè)流式工作臺(tái)—空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過(guò)工作臺(tái)面流向?qū)?cè),也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè),形成氣流屏障保持工作區(qū)無(wú)菌。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為封閉式。
外流式(水平式)工作臺(tái)—凈化后的空氣面向操作者流動(dòng),因而外方氣流不致混入操作,但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作則對(duì)操作者不利。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為開(kāi)放式(已少用)。 寧波現(xiàn)代細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
上海拓開(kāi)生物科技有限公司一直專(zhuān)注于從事生物科技領(lǐng)域、化工科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓?zhuān)k公用品、儀器儀表、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、易制毒化學(xué)品)批發(fā)零售。 【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】,是一家電子元器件的企業(yè),擁有自己**的技術(shù)體系。公司目前擁有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)員工,為員工提供廣闊的發(fā)展平臺(tái)與成長(zhǎng)空間,為客戶提供高質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù),深受員工與客戶好評(píng)。公司以誠(chéng)信為本,業(yè)務(wù)領(lǐng)域涵蓋葡萄糖乳酸分析儀,生化分析儀,智能控制系統(tǒng),細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,我們本著對(duì)客戶負(fù)責(zé),對(duì)員工負(fù)責(zé),更是對(duì)公司發(fā)展負(fù)責(zé)的態(tài)度,爭(zhēng)取做到讓每位客戶滿意。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實(shí)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德,樹(shù)立了良好的葡萄糖乳酸分析儀,生化分析儀,智能控制系統(tǒng),細(xì)胞計(jì)數(shù)儀形象,贏得了社會(huì)各界的信任和認(rèn)可。