蕪湖無血清細胞凍存液廠家批發(fā)價

無血清細胞凍存液：產品介紹：無血清細胞凍存液是一款針對細胞凍存和復蘇所研發(fā)的即用型細胞凍存液。該凍存液采用獨特的凍存配方，包括DMSO在內的凍存保護劑復合物，**降低了細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷。凍存液中添加了葡萄糖，氨基酸等各種細胞營養(yǎng)成分，***提高了細胞的活力和復蘇率。無血清細胞凍存液不含牛血清，無任何動物源組分，可維持干細胞低分化狀態(tài)，并且可減少各類***和支原體污染的風險，確保細胞凍存安全。與傳統(tǒng)細胞凍存液相比，本產品重懸細胞后可直接凍存于-80℃，無需程序降溫。細胞保藏中心，用于細胞株的長期保存。蕪湖無血清細胞凍存液廠家批發(fā)價

無血清細胞凍存液：1.逐滴加入5-7mL的預熱的培養(yǎng)基到15mL的離心管中，加入的同時輕輕混勻。2.室溫（15-25°C）以300xg離心5分鐘。3.吸出培養(yǎng)基，使細胞沉淀完好無損。使用2mL血清移液管輕輕將細胞沉淀重懸于1mL的培養(yǎng)基中。小心保持細胞作為聚集體。4.將0.5mL的細胞混合物轉移到含有培養(yǎng)基的預包被的6孔板的培養(yǎng)孔中（例如，每個冷凍管可以鋪板兩個孔）。注意：鋪板多少孔可能需要根據(jù)凍存的細胞聚集體數(shù)量進行調整。通常在復蘇后，要比在常規(guī)的傳代鋪板更多的細胞聚集體數(shù)量。將培養(yǎng)板放入37°C培養(yǎng)箱。快速前后左右的搖晃培養(yǎng)板數(shù)次，將細胞聚集體分布均勻。24小時內不要移動培養(yǎng)板。徐州正規(guī)無血清細胞凍存液廠家批發(fā)價含血清，細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風險更高。

復蘇方：法1）從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2）待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。3）離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4）清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5）加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。6）鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。

永生化的細胞系往往相當健壯，因此，使用實驗室自制的凍存培養(yǎng)基，效果也不錯。典型的配方是在生長培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清，或只是在血清中加入10%的DMSO。DMSO的作用是取代細胞中的一些水，以防止冰晶形成，刺穿細胞。據(jù)賽默飛世爾科技的較深科學家RhondaNewman介紹，DMSO還能防止細胞在冷凍期間發(fā)生收縮，而后在解凍時又變得腫脹。血清，這種富含營養(yǎng)成分的物質，直接支持細胞。“當細胞處于這種營養(yǎng)豐富的環(huán)境時，它們能夠更好地復蘇。無血清細胞凍存液不含牛血清，無動物源組份。

細胞凍存液的操作步驟：1.配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的凍存細胞培養(yǎng)液;2.取對數(shù)成長期的體細胞，除去舊細胞培養(yǎng)液，用PBS清理。3.除去PBS，添加適量蛋白酶(遮蓋細胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長發(fā)育的體細胞消化吸收出來;4.抽濾1000rpm，5min;5.除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細胞培養(yǎng)液，用塑料吸管輕輕地吹打使體細胞勻稱，記數(shù)，調整凍存液中體細胞的較后相對密度為5牙周106/ml～1牙周107/ml;6.將體細胞分裝進凍存管中，每管1～1.5ml;7.在凍存管上標出體細胞的名字，凍存時間及作業(yè)者;8.凍存：標準的凍存程序流程為減溫速度-1～-2℃/min;當溫度達-25℃下列時，可升至-5℃～-10℃/min;到-100℃時，則可快速滲入液態(tài)氮中。也可將配有體細胞的凍存管放進-20℃電冰箱2h，隨后放進-70℃電冰箱中留宿，取下凍存管，移進液氮容器內。無血清細胞凍存液用途：無血清細胞凍存液用于造血干細胞、間充質干細胞等干細胞的儲存。珠海無血清細胞凍存液廠家

無血清凍存液注意事項：若需長期凍存細胞，請轉移至液氮罐中貯存。蕪湖無血清細胞凍存液廠家批發(fā)價

無血清細胞凍存液，細胞凍存與復蘇后，平均活細胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較，BI無血清凍存液細胞存活率都有較佳的表，BI無血清細胞凍存液也適用于動物血清培養(yǎng)的細胞凍存。復蘇細胞：1.將細胞凍存管由液態(tài)氮中取出，置于37度水浴快速溶解回溫。此時可準備培養(yǎng)基、無菌15ml離心管、培養(yǎng)瓶。2.于生物安全柜內，直接以少量培養(yǎng)基反復沖融，使細胞團塊化凍。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基，再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g，3分鐘離心收集細胞。4.倒去上清液，以新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。5.隔天更換新鮮培養(yǎng)基，并觀察細胞存活狀況。蕪湖無血清細胞凍存液廠家批發(fā)價