將裝有培養(yǎng)液的離心管放入離心機(jī),設(shè)置 1000 - 1500 轉(zhuǎn) / 分鐘,離心 5 - 10 分鐘,待細(xì)胞沉淀后,使用移液器緩慢吸取上清液,轉(zhuǎn)移至新的無(wú)菌離心管,整個(gè)過(guò)程要避免擾動(dòng)沉淀。對(duì)于貼壁細(xì)胞,準(zhǔn)備工作相同。先用無(wú)菌 PBS 緩沖液輕柔地沖洗細(xì)胞 2 - 3 次,每次沖洗時(shí),傾斜培養(yǎng)瓶,讓緩沖液緩慢流經(jīng)細(xì)胞表面,確保雜質(zhì)被洗凈又不損傷細(xì)胞。加入胰蛋白酶消化液后,在顯微鏡下密切觀察,一旦細(xì)胞形態(tài)變圓、開(kāi)始松動(dòng),立刻加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。細(xì)胞培養(yǎng)支原體檢測(cè)取樣,可取細(xì)胞培養(yǎng)液,直接作為檢測(cè)樣本來(lái)源之一。北京細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防貨期
植物支原體引發(fā)的病害嚴(yán)重影響農(nóng)作物的產(chǎn)量和質(zhì)量,如棗瘋病、玉米矮縮病等,這些病害不僅導(dǎo)致農(nóng)作物減產(chǎn),還可能引發(fā)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題,給農(nóng)民帶來(lái)經(jīng)濟(jì)損失。在畜牧業(yè),支原體引發(fā)的肺炎、關(guān)節(jié)炎等疾病,降低了養(yǎng)殖動(dòng)物的生產(chǎn)性能,增加了養(yǎng)殖成本。科研價(jià)值:支原體帶來(lái)的新契機(jī)盡管支原體帶來(lái)諸多挑戰(zhàn),但在科研領(lǐng)域,它也展現(xiàn)出獨(dú)特的價(jià)值。由于支原體基因組小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,科研人員將其作為研究細(xì)胞生命活動(dòng)的理想模型。通過(guò)對(duì)支原體的研究,人們深入了解了基因表達(dá)、蛋白質(zhì)合成等生命過(guò)程的機(jī)制,為生物制藥和基因提供了理論支持。南京細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防試劑關(guān)節(jié)液也可作為支原體檢測(cè)樣本,通過(guò)穿刺抽取,操作需嚴(yán)格遵循無(wú)菌原則。
在微生物的世界里,支原體是一類獨(dú)特且引人關(guān)注的存在。它是目前發(fā)現(xiàn)的小、簡(jiǎn)單的原核生物,沒(méi)有細(xì)胞壁,有細(xì)胞膜包裹,這使得它形態(tài)多變,在顯微鏡下能呈現(xiàn)出球狀、桿狀、絲狀等多種形態(tài)。支原體分布于自然界,人和動(dòng)物的呼吸道、泌尿生殖道等是其常見(jiàn)的棲息之所。別瞧它個(gè)頭微小,卻有著不小的影響力,能引發(fā)多種疾病。在人類健康方面,肺炎支原體是引發(fā)支原體肺炎的元兇。它主要通過(guò)飛沫傳播,入侵人體呼吸道后,會(huì)黏附在呼吸道上皮細(xì)胞表面,釋放有毒物質(zhì),破壞細(xì)胞的正常生理功能,從而導(dǎo)致發(fā)熱、咳嗽、咽痛等癥狀。
在微觀生物的廣袤宇宙中,支原體猶如一顆獨(dú)特的 “小行星”,盡管個(gè)體微小,卻憑借自身特性,在人類健康領(lǐng)域和生物科學(xué)研究中,留下不可忽視的印記。支原體的發(fā)現(xiàn):開(kāi)啟微觀探索新征程1898 年,兩位科研人員從患胸膜肺炎的牛體內(nèi),成功分離出一種沒(méi)有細(xì)胞壁的微生物,并將其命名為 “胸膜肺炎微生物”,這便是支原體的雛形。隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)這類微生物存在于土壤、污水,以及動(dòng)物和人類的呼吸道、泌尿生殖道等環(huán)境中。支原體因缺乏細(xì)胞壁,形態(tài)多變,呈現(xiàn)出絲狀、球狀、桿狀等多種形態(tài),這一獨(dú)特特征,使其在微生物界獨(dú)樹(shù)一幟。定期的細(xì)胞培養(yǎng)支原體檢測(cè)可盡早發(fā)現(xiàn)污染,避免對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成影響。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,支原體污染會(huì)嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,準(zhǔn)確檢測(cè)支原體至關(guān)重要,而正確的取樣方法則是檢測(cè)結(jié)果可靠的前提。實(shí)驗(yàn)前,需充分準(zhǔn)備。將超凈工作臺(tái)提前開(kāi)機(jī),開(kāi)啟紫外線燈照射 30 分鐘以上,確保操作環(huán)境無(wú)菌。準(zhǔn)備好無(wú)菌離心管、移液器、無(wú)菌 PBS 緩沖液、胰蛋白酶消化液、含血清培養(yǎng)基等實(shí)驗(yàn)耗材和試劑。對(duì)于懸浮細(xì)胞,先用 75% 酒精擦拭雙手和培養(yǎng)瓶外壁,在超凈工作臺(tái)內(nèi),用移液器從培養(yǎng)瓶中準(zhǔn)確吸取 5 - 10 毫升細(xì)胞培養(yǎng)液,注意吸頭不要接觸瓶口,防止污染。支原體檢測(cè)從血液取樣時(shí),需嚴(yán)格無(wú)菌操作,抽取適量靜脈血進(jìn)行檢測(cè)分析。南京細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防試劑
做好細(xì)胞培養(yǎng)支原體檢測(cè),提高細(xì)胞培養(yǎng)質(zhì)量,助力科學(xué)研究。北京細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防貨期
血清學(xué)檢測(cè)通過(guò)檢測(cè)血清中支原體特異性抗體來(lái)判斷情況,操作簡(jiǎn)便、快速,但存在一定的假陽(yáng)性和假陰性。分子生物學(xué)檢測(cè)如聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù),具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、檢測(cè)速度快等優(yōu)點(diǎn),能夠快速準(zhǔn)確地檢測(cè)出樣本中的支原體核酸,在臨床診斷和科研中應(yīng)用。針對(duì)支原體的防治,一方面可以使用進(jìn)行。由于支原體沒(méi)有細(xì)胞壁,作用于細(xì)胞壁合成的如青霉素類對(duì)其無(wú)效,而抑制蛋白質(zhì)合成的如大環(huán)內(nèi)酯類(紅霉素、阿奇霉素)、四環(huán)素類和喹諾酮類等則對(duì)支原體有較好的療效。北京細(xì)胞培養(yǎng)支原體預(yù)防貨期