推薦ELISA試劑盒銷售價格

來源: 發(fā)布時間:2025-08-30

酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)是現(xiàn)***物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中不可或缺的基石技術(shù)之一。其**原理是利用抗原-抗體特異性結(jié)合的高親和力與酶催化的高效信號放大作用相結(jié)合。簡單來說,就是將待測物(抗原或抗體)特異性吸附(固定)在固相載體(通常是96孔聚苯乙烯微孔板)表面,然后加入酶標(biāo)記的抗體或抗原進(jìn)行特異性識別結(jié)合。洗去未結(jié)合的物質(zhì)后,加入該酶的相應(yīng)底物。酶催化底物發(fā)生顯色、發(fā)光或熒光反應(yīng),產(chǎn)生的信號強度與待測樣品中目標(biāo)分子的含量在一定范圍內(nèi)呈正相關(guān)(或負(fù)相關(guān),取決于檢測模式)。通過測量吸光度、發(fā)光值或熒光強度,并與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較,即可對待測樣品中的目標(biāo)物進(jìn)行定量或定性分析。這種巧妙的設(shè)計賦予了ELISA極高的靈敏度和特異性,使其能夠檢測極低濃度(皮克甚至飛克級別)的生物分子。多克隆抗體包被的試劑盒檢測范圍更廣。推薦ELISA試劑盒銷售價格

推薦ELISA試劑盒銷售價格,ELISA試劑盒

食品安全關(guān)乎公眾健康。ELISA憑借其快速、靈敏、高通量、相對低成本的優(yōu)勢,成為食品中危害因子(病原微生物、***、農(nóng)獸藥殘留、非法添加物、過敏原)檢測的重要工具?!z測靶標(biāo)與模式:o食源***原菌及其***:沙門氏菌、大腸桿菌O157:H7、李斯特菌、金黃色葡萄球菌腸***等。常用夾心法檢測菌體抗原或***蛋白。o******(Mycotoxins):黃曲霉***B1(AFB1)、赭曲霉***A(OTA)、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON嘔吐***)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、伏馬菌素(FUM)等。多為小分子,采用競爭法ELISA。o農(nóng)藥殘留(PesticideResidues):有機磷、氨基甲酸酯、擬除蟲菊酯類等殺蟲劑;三嗪類、磺酰脲類除草劑等。競爭法檢測。o獸藥殘留(VeterinaryDrugResidues):***(如β-內(nèi)酰胺類、磺胺類、四環(huán)素類、氯霉素)、合成***(如己烯雌酚DES)、β-受體激動劑(如克倫特羅,“瘦肉精”)等。競爭法檢測。o過敏原(Allergens):檢測食品中殘留的花生、牛奶、雞蛋、麩質(zhì)、堅果、芝麻、甲殼類等過敏原蛋白,用于生產(chǎn)交叉污染監(jiān)控和成品檢測。夾心法。o非法添加物:如三聚氰胺(奶制品)、蘇丹紅(辣椒制品)等。競爭法或夾心法(針對蛋白摻假)。重慶ELISA試劑盒夾心ELISA因其高特異性,常用于復(fù)雜樣本的檢測。

推薦ELISA試劑盒銷售價格,ELISA試劑盒

酶在ELISA中扮演信號放大器的角色。**常用的酶是辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)和堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, ALP)。HRP催化過氧化氫(H?O?)氧化底物,常用底物是3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB),氧化后產(chǎn)生可溶性藍(lán)色產(chǎn)物,加入強酸(如硫酸)終止反應(yīng)后變?yōu)辄S色,在450nm波長處有比較大吸收峰。ALP則催化磷酸酯底物水解,常用底物如對硝基苯磷酸酯(pNPP),產(chǎn)物為黃色對硝基苯酚(pNP),在405nm處檢測吸光度。HRP系統(tǒng)通常反應(yīng)更快,靈敏度更高,但易受某些抑制物影響;ALP系統(tǒng)相對穩(wěn)定,線性范圍可能更寬。試劑盒中提供的底物通常是即用型或濃縮液,需按說明書配制。高質(zhì)量的底物應(yīng)能產(chǎn)生信號強、背景低、穩(wěn)定性好的顯色反應(yīng)。

競爭法(CompetitiveELISA)通常用于檢測小分子抗原(半抗原),如***、藥物、***等,這些小分子通常只有一個抗原表位,無法使用夾心法。其原理基于待測抗原(樣品中)與標(biāo)記抗原(通常酶標(biāo))競爭結(jié)合有限的抗體結(jié)合位點。有兩種常見形式:·形式A(包被抗原):1.包被已知抗原(非目標(biāo)小分子,常為與目標(biāo)分子結(jié)構(gòu)相似的蛋白偶聯(lián)物)。2.封閉。3.同時加入:待測樣品(含未知量目標(biāo)小分子)+固定量的酶標(biāo)記特異性抗體。樣品中的游離小分子與包被抗原競爭結(jié)合酶標(biāo)抗體。4.洗滌:洗去未結(jié)合的酶標(biāo)抗體(包括與游離小分子結(jié)合的)。5.加底物顯色。該試劑盒廣泛應(yīng)用于疾病診斷、食品安全和生物研究等領(lǐng)域。

推薦ELISA試劑盒銷售價格,ELISA試劑盒

樣本的質(zhì)量是ELISA成功的基礎(chǔ)。樣本類型多樣,包括血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織裂解液、尿液、唾液、腦脊液等。不同樣本的處理要求不同:·血清/血漿:是臨床檢測**常用的樣本。**后需盡快分離(血漿需抗凝劑,血清需自然凝固)。避免溶血(紅細(xì)胞破裂釋放內(nèi)容物干擾)、脂血(脂質(zhì)干擾光學(xué)檢測)和反復(fù)凍融(破壞蛋白)。通常需離心去除顆粒物。儲存于-20°C或-80°C。·細(xì)胞培養(yǎng)上清:收集時避免細(xì)胞碎片(需離心)。注意培養(yǎng)基中的酚紅可能干擾吸光度讀數(shù)(450nm附近),可能需要更換無酚紅培養(yǎng)基或設(shè)置含培養(yǎng)基的空白對照?!そM織裂解液:需要勻漿或研磨組織,使用含蛋白酶抑制劑的裂解液提取總蛋白。離心取上清。蛋白濃度差異大,常需測定總蛋白濃度(如BCA法)并調(diào)整上樣量或稀釋度?!て渌w液:如尿液、唾液等,成分復(fù)雜,干擾物多,常需特殊處理(如離心、過濾、添加穩(wěn)定劑)和更高倍數(shù)的稀釋。關(guān)鍵原則:盡快處理、低溫保存、避免反復(fù)凍融、充分混勻、按說明書要求稀釋(使用試劑盒提供的稀釋液比較好)、記錄處理過程。不恰當(dāng)?shù)臉颖咎幚硎荅LISA結(jié)果偏差和失敗的**常見原因之一。試劑盒說明書應(yīng)全程保存以供后續(xù)查閱。云南試驗室ELISA試劑盒歡迎選購

?ELISA試劑盒市場將繼續(xù)在創(chuàng)新、成本、質(zhì)量和服務(wù)等多維度展開競爭。推薦ELISA試劑盒銷售價格

·回收率實驗:在已知基質(zhì)(如陰性血清)中加入已知量的標(biāo)準(zhǔn)品(高、中、低濃度),檢測其回收濃度。回收率應(yīng)在80-120%左右?!ぞ€性稀釋實驗:將樣品用零標(biāo)準(zhǔn)品(或標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液)進(jìn)行系列稀釋(如1:2,1:4,1:8),檢測濃度。理想情況下,稀釋后濃度應(yīng)與稀釋倍數(shù)成比例下降(在檢測范圍內(nèi)呈線性)。若不成比例(如稀釋后濃度不降反升或下降過快),提示存在基質(zhì)效應(yīng)。應(yīng)對策略:1.使用匹配的稀釋液:嚴(yán)格按照試劑盒要求,使用其提供的**樣品稀釋液進(jìn)行稀釋。該稀釋液通常含有封閉蛋白和去污劑,能很大程度減少基質(zhì)干擾。2.樣品預(yù)處理:對于某些嚴(yán)重干擾的樣本(如脂血、溶血),可能需要離心、過濾、稀釋或使用專門的預(yù)處理試劑盒(如去除異嗜性抗體的阻斷劑)。3.選擇經(jīng)過基質(zhì)驗證的試劑盒:優(yōu)先選擇標(biāo)明已驗證適用于特定樣本類型(如人血清、大鼠血漿、細(xì)胞上清)的試劑盒。4.設(shè)置基質(zhì)對照:在標(biāo)準(zhǔn)曲線制作時,使用與實際樣品相同的基質(zhì)(如5%BSA/PBS或陰性混合血清)來稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,而非*用緩沖液(零標(biāo)準(zhǔn)品),可以部分校正基質(zhì)效應(yīng)。5.優(yōu)化洗滌:充分徹底的洗滌是減少非特異性結(jié)合的關(guān)鍵。重視并有效管理基質(zhì)效應(yīng),是獲得可靠ELISA數(shù)據(jù)的必要條件。推薦ELISA試劑盒銷售價格