CKK-8原理
CellCountingKit，CCK-8試劑含有WST-8（化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽），是近年新開發(fā)的一種更新的水溶性四唑鹽檢測，原理與WST-1類似：在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原成具有高度水溶性的橙黃色甲臜產物（Formazan）。生成的甲臜物的數量與活細胞的數量成正比，用酶聯(lián)免疫分析儀測定其光吸收值可間接反映活細胞數量，在一定細胞數量范圍內甲臜形成的量與細胞數成正比。
細胞增殖與毒性檢測實驗方法及經驗總結-CCK-8 .浙江cck8 mtt
酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾；◆細胞毒性非常低，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時間反復用酶標儀讀數從而找到比較好測定時間。實驗二：細胞增殖-毒性檢測1、在96孔板中配置100μL的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預培養(yǎng)24小時（37℃，5%CO2）。2、向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測物質。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當的時間（例如：6、12、24或48小時）。4、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要再孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數）。5、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內孵育1-4小時。6、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。湖北cck8結果圖怎么做生成的甲臜物的數量與活細胞的數量成正比.
細胞增殖實驗就是對細胞生長的測定，常用的方法有MTT、CCK8以及流式檢測。閱讀大量文獻發(fā)現，如果想證明一個***或者說是一個作用條件對細胞生長的影響，基本上大家都采用MTT或CCK8結合流式的雙標準來證明作用效果。所以，***先給大家介紹一下MTT和CCK8比色法的實驗操作和注意事項。
MTT實驗操作
1、在96孔板中培養(yǎng)細胞，設置對照組（細胞+無血清培養(yǎng)基）、實驗組和空白組（無血清培養(yǎng)基），可以采用如下圖的排版方式：
2、在對照組和實驗組中，每孔加入細胞懸液100ul,培養(yǎng)24小時；
統(tǒng)一鋪好后，待細胞完全沉淀下來后，在顯微鏡下觀察各實驗組的細胞密度，如果密度不均勻，則固定一組，微調其他組細胞的量再次鋪板（如：發(fā)現NC組細胞較多，降低細胞量再次鋪板），放入細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。4.從鋪板后第二天開始，每孔加入10-20μlCCK-8溶液，如果每孔的培養(yǎng)基為100μl，則加入10μlCCK-8溶液，如果每孔的培養(yǎng)基為200μl，則加入20μlCCK-8溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數）。用加了相應量細胞培養(yǎng)液和CCK-8溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。CCK8系列簡稱終于來了.
細胞增殖實驗就是對細胞生長的測定，常用的方法有MTT、CCK8以及流式檢測。閱讀大量文獻發(fā)現，如果想證明一個***或者說是一個作用條件對細胞生長的影響，基本上大家都采用MTT或CCK8結合流式的雙標準來證明作用效果。所以，***先給大家介紹一下MTT和CCK8比色法的實驗操作和注意事項。MTT實驗操作1、在96孔板中培養(yǎng)細胞，設置對照組（細胞+無血清培養(yǎng)基）、實驗組和空白組（無血清培養(yǎng)基），可以采用如下圖的排版方式：2、在對照組和實驗組中，每孔加入細胞懸液100ul,培養(yǎng)24小時代謝率低了以后，細胞呼吸減弱，NAD+產生減少，測出的Formazan也會減少。上海cck8數據作圖
那它的用途也就大致可以猜到，和細胞增殖、細胞毒性相關的實驗都可以。浙江cck8 mtt
CCK法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢比較檢測方法MTT法XTT法WST-1法CCK法甲臜產物的水溶性差（需加有機溶劑溶解再檢測）好好好產品性狀粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液使用方法配成溶液后使用現配現用即開即用即開即用檢測靈敏度高很高很高高檢測時間較長較短較短**短檢測波長560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm細胞毒性高，細胞形態(tài)完全消失很低，細胞形態(tài)不變很低，細胞形態(tài)不變很低，細胞形態(tài)不變試劑穩(wěn)定性一般較差一般很好批量樣品檢測可以非常適合非常適合非常適合便捷程度一般便捷便捷非常便捷浙江cck8 mtt