CCK8的優(yōu)點：方法方便，不用洗滌細胞，不需要放射性同位素和有機溶劑；CCK-8快速檢測；CCK-8檢測靈敏度高，細胞密度低也可以檢測；CCK-8的重復性優(yōu)于MTT法；CCK-8對細胞的毒性很??；CCK-8細胞活性檢測試劑中是1瓶溶液，不需要現(xiàn)用現(xiàn)配，即開即用。CCK8的缺點：相比于與MTT法，CCK8的價格比較昂貴生成的甲瓚物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。用途：***篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、**藥敏試驗。細胞增殖測定：細胞增殖實驗在很多領(lǐng)域都會用到，比如**相關(guān)、損傷后修復等。上海cck8實驗注意事項
經(jīng)驗總結(jié)及分享：
CCK8的說明書大家一定要認真閱讀，里面很多細節(jié)的問題都有提到。而且說明書里提供的一些關(guān)于各種細胞的種板數(shù)都很有參考價值，因為那是反復驗證過的比較好數(shù)值。但無論如何，做這個試驗一定要摸條件。你就算再懶，這個懶不得，否則你都只是在做無用功。以下言論全部以細胞毒性試驗為前提， 如果你做的是促進細胞生長的***的藥效實驗那就另當別論了。
摸條件包括1、種板數(shù)；2、種板后細胞的貼壁生長時間；3、加藥后的孵育時間；4、cck8試劑加入量；5、cck8試劑加入后細胞孵育時間。看起來很多，其實這就是一個實驗。而且都是種的空白板，也就是不加***，只加細胞和CCK8。 天津cck8步驟用酶標儀測定在450nm處的吸光度。
在做每個東西之前，都要搞清楚這個東西是什么。CCK-8的英文全稱是Cell Counting Kit-8，也就是進行細胞計數(shù)的一個盒子。那它的用途也就大致可以猜到，和細胞增殖相關(guān)的實驗都可以。CCK-8的原理在CCK-8試劑盒中，**主要的化學藥品是WST-8，化學名為2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽。它的**基團和MTT是一樣的，是MTT的升級版本。在電子耦合試劑（也就是細胞是活的，有呼吸，有能量代謝）存在的情況下，可被NAD+氧化還原成為水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物(Formazan)。活細胞越多，產(chǎn)生的Formazan就越多，顏色也會越深（如圖1，來自于Sigma）。
氧化還原試劑對CCK8測定的影響：CCK8是一個氧化還原反應實驗，在整個操作當中，如果有氧化還原試劑都會影響**終的結(jié)果。當有還原性物質(zhì)存在時會影響CCK8的測定，增加OD值。在有氧化性物質(zhì)存在時會***測定反應的發(fā)生，減少OD值。在高中化學我們就知道金屬是氧化還原反應中的重要參與者。各個公司都會告訴你：“終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會***5%、15%、90%的顯色反應，使靈敏度降低。如果終濃度是10mM的話，將會*****?！蔽?*開始看到這句話時很懵，因為不知道在操作中怎樣會遇到這種情況。下面就分享我能想到或者在操作中真實遇到的。cck8試劑盒原理是什么a?
培養(yǎng)基對CCK8測定的影響：不同的培養(yǎng)基中含有氧化還原性物質(zhì)不同，（主要是氨基酸的成分及糖含量），會與CCK8發(fā)生反應，產(chǎn)生實驗誤差，因此所用培養(yǎng)基要一致，不要更換其他培養(yǎng)基。比如DMEM空白吸收為0.93；1640培養(yǎng)基在0.5左右。另外培養(yǎng)基中有酚紅存在的情況下，會增加空白吸收，但不影響測定，扣除空白吸收即可，可見空白孔非常重要，所以每次實驗均要設定空白對照。另外，血清不影響測定，所以我用CCK-8來測定病毒對細胞活性的影響或者某個***對病毒復制的影響時，我都小心翼翼的測很多個時間點，說實話，效果不是很好。所以我比較喜歡中性紅。各有千秋!CCK8之外的選擇除了MTT,還可以是LDH.湖北cck8統(tǒng)計方法小木蟲
***篩選：在測定一個***的毒性和安全有效濃度時，經(jīng)常會用到CCK-8。上海cck8實驗注意事項
細胞增殖實驗就是對細胞生長的測定，常用的方法有MTT、CCK8以及流式檢測。閱讀大量文獻發(fā)現(xiàn)，如果想證明一個***或者說是一個作用條件對細胞生長的影響，基本上大家都采用MTT或CCK8結(jié)合流式的雙標準來證明作用效果。所以，***先給大家介紹一下MTT和CCK8比色法的實驗操作和注意事項。
MTT實驗操作
1、在96孔板中培養(yǎng)細胞，設置對照組（細胞+無血清培養(yǎng)基）、實驗組和空白組（無血清培養(yǎng)基），可以采用如下圖的排版方式：
2、在對照組和實驗組中，每孔加入細胞懸液100ul,培養(yǎng)24小時； 上海cck8實驗注意事項