轉(zhuǎn)膜液
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
我們生產(chǎn)的Western轉(zhuǎn)膜液(Western Transfer Buffer)可以用于Western時(shí)濕法電轉(zhuǎn)膜，是一種快速效率高的特有配方轉(zhuǎn)膜液，效果較好。
1、轉(zhuǎn)印快速——室溫轉(zhuǎn)膜，20-30 分鐘內(nèi)將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜上。
2、轉(zhuǎn)印效率高——產(chǎn)生熱量非常小，減少蛋白損失。
配置靈活——配置1*轉(zhuǎn)膜液時(shí)加入無(wú)水甲醇、無(wú)水乙醇均可，效果沒(méi)有明顯差異，兼容性好。
使用方法：
1* 快速轉(zhuǎn)膜液的配制(1000 ml)：
取100ml 此產(chǎn)品+800 ml 去離子水+100ml甲醇。
電轉(zhuǎn)儀的設(shè)置：
一個(gè)轉(zhuǎn)印槽：電壓：110V, 電流：400mA；
二個(gè)轉(zhuǎn)印槽：電壓：140V，電流：700mA；
100kD 以下蛋白，膠濃度＜10%的，轉(zhuǎn)印時(shí)間20分鐘即可轉(zhuǎn)印完畢。
100kD 以上蛋白，膠濃度≥10%的，轉(zhuǎn)印時(shí)間30分鐘即可轉(zhuǎn)印完畢。 細(xì)胞分裂的前期，明顯的變化是細(xì)胞核中出現(xiàn)染色體。成纖維細(xì)胞增殖試劑盒
抗體稀釋參考一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1：1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL，二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL注意事項(xiàng) 1.為獲得比較好效果,在孵育步驟請(qǐng)使用搖床;  2.將Tween20(終濃度0.05-0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液,以降低非特異信號(hào);  3.不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑,疊氨鈉是HRP的***物;  4.避免手與膜直接接觸,實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)戴手套或使用干凈的鑷子;  5.所有設(shè)備必須清潔且不沾染外來(lái)物質(zhì),金屬器械(如剪刀)不得具有可見(jiàn)的銹跡,銹跡可能導(dǎo)致斑點(diǎn)形成和高背景。武漢mts細(xì)胞增殖染色細(xì)胞增殖的方式有哪些？
Q：在做刺激實(shí)驗(yàn)時(shí)，對(duì)測(cè)定是否有影響？
A：如果有還原性，則會(huì)與CCK-8發(fā)生反應(yīng)，影響吸光度；金屬離子的存在可能會(huì)影響CCK-8的靈敏度。終濃度為1 mM 的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)5% 、15% 、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降低。如果終濃度是10 mM 的話。
Q：如果吸光度值太低，可以采取什么辦法？
A：適當(dāng)增加細(xì)胞數(shù)量或延長(zhǎng)加入CCK-8溶液后的孵育時(shí)間。
Q：如果吸光度值太高，可以采取什么辦法？
A：適當(dāng)減少細(xì)胞數(shù)量（建議正式實(shí)驗(yàn)前優(yōu)化細(xì)胞數(shù)量與熒光值之間的關(guān)系）或縮短加入CCK-8溶液后的孵育時(shí)間。
RIPA細(xì)胞裂解液
RIPA裂解液是較可靠的緩沖液之一，其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS，該緩沖液能夠從細(xì)胞質(zhì)，膜和**白質(zhì)中提取蛋白質(zhì)，并且與許 多應(yīng)用相容，包括蛋白質(zhì)分析，和蛋白質(zhì)純化。RIPA緩沖液不含蛋白酶或磷酸酶，如果需要，可將酶添加到試劑中以防止蛋白質(zhì)水解并維持蛋白質(zhì) 的磷酸化狀態(tài)。一些蛋白激酶和其他酶可能對(duì)RIPA緩沖液的組分敏感，導(dǎo)致其活性降低。 在這種情況下，準(zhǔn)備不含脫氧膽酸鈉和SDS的RIPA緩沖液。
注意事項(xiàng)：
1.抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行。
2.裂解得到的蛋白樣品，含有較高濃度的去垢劑，不建議用Bradford 法測(cè)定蛋白濃度，可以選用BCA蛋白定量試劑盒測(cè)定蛋白濃度。
3.裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物，屬正?，F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白，則可以通過(guò)超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見(jiàn)的轉(zhuǎn)錄因子，例如NFKB、p53等時(shí)，通常不必進(jìn)行超聲處理，就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。 細(xì)胞增殖的技術(shù)難點(diǎn)。
超敏ECL發(fā)光底物（試劑盒）
圖像獲取
1. 將包在塑料紙(膜)中的印跡膜置于膠片暗盒中，蛋白質(zhì)面朝上，除適用于膠片曝光的燈(如紅色安全燈)之外，關(guān)閉所有燈;
注: 膠片必須在曝光期間保持干燥,為獲得比較好效果,采取以下措施:
確保將多余的底物溶液從膜和塑料紙上完全去除;
在整個(gè)膠片處理期間,使用手套;
切莫將印記膜置于已顯影的膠片上,因?yàn)槟z片上的化學(xué)物質(zhì)會(huì)減弱信號(hào)。
2. 將X光膠片置于膜的上面。建議***次曝光60秒。之后可調(diào)整曝光時(shí)間以達(dá)到比較好結(jié)果?；瘜W(xué)發(fā)光反應(yīng)在底物孵育后的前5-30分鐘期間是**強(qiáng)烈的,這一反應(yīng)可以持續(xù)幾個(gè)小時(shí),但強(qiáng)度會(huì)隨時(shí)間下降,如有底物孵育后較長(zhǎng)時(shí)間后曝光,曝光時(shí)間可能需要延長(zhǎng)以獲得較強(qiáng)信號(hào)。如果使用磷光存儲(chǔ)成像設(shè)備(如Bio-Rad的分子成像儀系統(tǒng))或CCD照相機(jī)可能需要較長(zhǎng)的曝光時(shí)間;
3. 使用合適的顯影劑和定影劑對(duì)膠片進(jìn)行顯影。如果信號(hào)太強(qiáng),則縮短曝光時(shí)間或?qū)⒂∮浤みM(jìn)行剝離并降低抗體濃度重新檢測(cè)。
CCK-8檢測(cè)原理是高水溶性的四唑鹽WST-8在電子耦合試劑存在下還原產(chǎn)生水溶性formazan形式的染料。武漢mts細(xì)胞增殖染色CCK-8法的重復(fù)性?xún)?yōu)于MTT 法。成纖維細(xì)胞增殖試劑盒
耗材
1000ul 藍(lán)色袋裝移液頭
通用性移液器吸嘴特點(diǎn)：
1、采用***聚丙烯材質(zhì)
2、吸附液體時(shí)低殘留、低吸附
3、無(wú)DNA酶、RNA酶和熱原
4、吸嘴尾部呈柔軟彈性椎體，配適大多數(shù)品牌移液器
5、創(chuàng)新超長(zhǎng)設(shè)計(jì)，減少移液器帶來(lái)的污染200ul 黃色袋裝移液頭
通用性移液器吸嘴特點(diǎn)：
1、采用***聚丙烯材質(zhì)
2、吸附液體時(shí)低殘留、低吸附
3、無(wú)DNA酶、RNA酶和熱原
4、吸嘴尾部呈柔軟彈性椎體，配適大多數(shù)品牌移液器
5、創(chuàng)新超長(zhǎng)設(shè)計(jì)，減少移液器帶來(lái)的污染10ul 透明袋裝移液頭
通用性移液器吸嘴特點(diǎn)：
1、采用***聚丙烯材質(zhì)
2、吸附液體時(shí)低殘留、低吸附
3、無(wú)DNA酶、RNA酶和熱原
4、吸嘴尾部呈柔軟彈性椎體，配適大多數(shù)品牌移液器
5、創(chuàng)新超長(zhǎng)設(shè)計(jì)，減少移液器帶來(lái)的污染 成纖維細(xì)胞增殖試劑盒
上海儒安生物科技有限公司辦公設(shè)施齊全，辦公環(huán)境優(yōu)越，為員工打造良好的辦公環(huán)境。專(zhuān)業(yè)的團(tuán)隊(duì)大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗(yàn)，熟悉行業(yè)專(zhuān)業(yè)知識(shí)技能，致力于發(fā)展上海儒安生物的品牌。公司堅(jiān)持以客戶為中心、從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù)，軟件開(kāi)發(fā)，電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù))，化工產(chǎn)品及原料(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品、易制毒化學(xué)品)、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷(xiāo)售。市場(chǎng)為導(dǎo)向，重信譽(yù)，保質(zhì)量，想客戶之所想，急用戶之所急，全力以赴滿足客戶的一切需要。誠(chéng)實(shí)、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營(yíng)要求，也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體。