CCK-8細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒是一種基于水溶性四唑鹽WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性快速高靈敏度的檢測(cè)試劑盒。WST-8是一種類似于MTT但靈敏度高于MTT的化合物，在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原為可溶性的橙黃色甲臜(formazan)。甲臜的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深;細(xì)胞的毒性越大，則顏色越淺。同樣的細(xì)胞，溶液顏色的深淺和細(xì)胞的數(shù)目成線性關(guān)系。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品公司？武漢edu細(xì)胞增殖試劑盒
上海儒安生物科技有限公司CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖/毒性的原理CellCountingKit-8（簡(jiǎn)稱CCK-8）試劑可用于簡(jiǎn)便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓***二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物（Formazandye）。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。用途：***篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、**藥敏試驗(yàn)CCK8的優(yōu)點(diǎn)：使用方便，省去了洗滌細(xì)胞，不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑；CCK-8法能快速檢測(cè)；CCK-8法的檢測(cè)靈敏度很高，甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度；CCK-8法的重復(fù)性優(yōu)于MTT法；CCK-8法對(duì)細(xì)胞毒性小；CCK-8細(xì)胞活性檢測(cè)試劑中為1瓶溶液，毋需預(yù)制，即開即用。CCK8的缺點(diǎn)：與MTT法相比，CCK8和XTT的價(jià)格比較貴。CCK8試劑的顏色為淡紅色，與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近，不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。與以往的增殖/毒性測(cè)定試劑相比較：檢測(cè)方法MTT法XTT法WST-1法CCK8法甲臢產(chǎn)物的水溶性差。南京精原細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖有什么方法？
并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉***影響。當(dāng)然***影響比較小的情況下，可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入***后的空白吸收即可。三、CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖/毒性的注意事項(xiàng)當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時(shí)，貼壁細(xì)胞的**小接種量至少為1,000個(gè)/孔(100μl培養(yǎng)基)。檢測(cè)白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對(duì)較低，因此推薦接種量不低于2,500個(gè)/孔(100μl培養(yǎng)基)。酚紅和血清對(duì)CCK8法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾，可以通過(guò)扣除空白孔中本底的吸光度而消去。CCK8可以檢測(cè)大腸桿菌，但不能檢測(cè)酵母細(xì)胞。在細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每次測(cè)定的過(guò)程中需要避免細(xì)菌污染，以免影響結(jié)果。CCK-8在0-5℃下能夠保存至少6個(gè)月，在-20℃下避光可以保存1年。當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)板**外一圈的孔**容易干燥揮發(fā)，由于體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下，**外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測(cè)定孔用。在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時(shí)間，測(cè)定450nm的吸光度即為空白對(duì)照。在做加藥實(shí)驗(yàn)時(shí)，還應(yīng)考慮***的吸收，可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時(shí)間，測(cè)定450nm的吸光度作為空白對(duì)照。金屬對(duì)CCK-8顯色有影響：當(dāng)終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、***銅會(huì)***5%、15%、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降級(jí)。
細(xì)胞增殖周期細(xì)胞各組成部份在不斷發(fā)展變化的基礎(chǔ)上還要不斷增殖，產(chǎn)生新細(xì)胞，以代替衰老、死亡和創(chuàng)傷所損失的細(xì)胞，這是機(jī)體新陳代謝的表現(xiàn)，也是機(jī)體不斷生長(zhǎng)發(fā)育、賴以生存和延續(xù)種族的基礎(chǔ)。細(xì)胞各組成部份在不斷發(fā)展變化的基礎(chǔ)上還要不斷增殖，產(chǎn)生新細(xì)胞，以代替衰老、死亡和創(chuàng)傷所損失的細(xì)胞，這是機(jī)體新陳代謝的表現(xiàn)，也是機(jī)體不斷生長(zhǎng)發(fā)育、賴以生存和延續(xù)種族的基礎(chǔ)。細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖，每次分裂后所產(chǎn)生的新細(xì)胞必須經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)增大，才能再分裂?，F(xiàn)在把細(xì)胞增殖必須經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)到分裂的過(guò)程稱為細(xì)胞周期。換句話說(shuō)，細(xì)胞增殖周期（或細(xì)胞周期）是指細(xì)胞從一次分裂結(jié)束開始生長(zhǎng)，到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過(guò)程。細(xì)胞增殖周期可分為兩個(gè)時(shí)期，即間期和分裂期。細(xì)胞增殖有什么方法。
Q：CCK-8能否用于細(xì)胞染色？
A：CCK-8不能用于細(xì)胞染色，CCK-8檢測(cè)原理是高水溶性的四唑鹽WST-8在電子耦合試劑存在下還原產(chǎn)生水溶性formazan形式的染料，WST-8及formazan是高度水溶性的，不會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色。
Q：沒(méi)有450 nm的濾光片，能否使用其他濾光片？
A：如果您沒(méi)有450 nm濾光片。您也可以使用吸光度在430 nm和490 nm之間的濾光片, 450 nm濾光片具有比較好靈敏度。
Q：哪些物質(zhì)會(huì)干擾CCK-8的測(cè)定？
A：WST-8可能與還原劑反應(yīng)生成WST-8 formazan，如果使用還原劑（例如一些抗氧化劑）會(huì)增加OD值；若存在氧化性物質(zhì)則會(huì)阻擋CCK-8測(cè)定反應(yīng)，減小OD值；此外，培養(yǎng)基中的酚紅不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，酚紅的吸光度可以在計(jì)算時(shí)，通過(guò)扣除空白孔中本底的吸光度而消去。 CCK8的實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)分組及檢測(cè)方法。南京肝竇內(nèi)皮細(xì)胞增殖檢測(cè)
細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一。武漢edu細(xì)胞增殖試劑盒
Q：在做刺激實(shí)驗(yàn)時(shí)，對(duì)測(cè)定是否有影響？
A：如果有還原性，則會(huì)與CCK-8發(fā)生反應(yīng)，影響吸光度；金屬離子的存在可能會(huì)影響CCK-8的靈敏度。終濃度為1 mM 的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)5% 、15% 、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降低。如果終濃度是10 mM 的話。
Q：如果吸光度值太低，可以采取什么辦法？
A：適當(dāng)增加細(xì)胞數(shù)量或延長(zhǎng)加入CCK-8溶液后的孵育時(shí)間。
Q：如果吸光度值太高，可以采取什么辦法？
A：適當(dāng)減少細(xì)胞數(shù)量（建議正式實(shí)驗(yàn)前優(yōu)化細(xì)胞數(shù)量與熒光值之間的關(guān)系）或縮短加入CCK-8溶液后的孵育時(shí)間。 武漢edu細(xì)胞增殖試劑盒
上海儒安生物科技有限公司是一家生產(chǎn)型類企業(yè)，積極探索行業(yè)發(fā)展，努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。上海儒安生物科技是一家有限責(zé)任公司企業(yè)，一直“以人為本，服務(wù)于社會(huì)”的經(jīng)營(yíng)理念;“誠(chéng)守信譽(yù)，持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針。公司業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體，價(jià)格合理，品質(zhì)有保證，深受廣大客戶的歡迎。上海儒安生物科技順應(yīng)時(shí)代發(fā)展和市場(chǎng)需求，通過(guò)**技術(shù)，力圖保證高規(guī)格高質(zhì)量的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體。