轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進(jìn)行成像（左側(cè)四幅圖），A：LipoD293；B：293fectin；C：Xfect和D：Fugene6.帶有6xHis標(biāo)記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術(shù)實(shí)現(xiàn)分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進(jìn)行Coomassie亮藍(lán)染色（右上圖E），道1為L(zhǎng)ipoD293293、道2為標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進(jìn)一步定量（見右下圖F）。產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑（升級(jí)版）和LipofectamineLTX（LTX）試劑將三個(gè)cDNAs共轉(zhuǎn)染進(jìn)293T細(xì)胞。一個(gè)GFP載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測(cè)定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細(xì)胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1微升（上圖）和10微升（下圖）。一般會(huì)同時(shí)設(shè)置對(duì)照，對(duì)RNAi結(jié)果進(jìn)行比較。RNAi的成功取決于正確導(dǎo)入合適量的siRNA，達(dá)到比較大預(yù)期反應(yīng)。上海Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑供應(yīng)商
LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn)、高效的siRNA輸送解決方案。目前尚無其他siRNA轉(zhuǎn)染試劑能夠在***的細(xì)胞系中（包括常見細(xì)胞類型、干細(xì)胞、原代細(xì)胞以及歷來難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型）提供如此簡(jiǎn)便、高效的siRNA輸送效果。高效可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效果相對(duì)于其他的siRNA轉(zhuǎn)染試劑，LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑可以獲得更佳的基因***效果。同在10nM和1nMp53siRNA下，LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率，超過其他RNAi試劑。上海pei轉(zhuǎn)染試劑盒包括**常見的DNA，用于基因編輯的siRNA，能夠更快表達(dá)蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。
羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者，升級(jí)版的多組分混合試劑，兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性，在超過350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證，尤其針對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對(duì)CHO-K1細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒，A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖，B和D是明場(chǎng)顯微圖.與競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品比較，X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對(duì)四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染，X-tremeGENEHP試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑超過350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證還有一個(gè)好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進(jìn)行8折促銷哦快去搶購吧~
基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑，其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物，粘附到細(xì)胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。pH值，鈣離子濃度，DNA濃度，沉淀時(shí)間，細(xì)胞孵育時(shí)間乃至各組分加入順序都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響，因此實(shí)驗(yàn)條件摸索和優(yōu)化時(shí)間較長(zhǎng)，且重復(fù)性不佳?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。此方法操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率，但具有一定的細(xì)胞毒性，可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響，需要去除血清。用于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑，還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?.
簡(jiǎn)介：X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動(dòng)物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢(shì)：1.簡(jiǎn)單易用的多組分混合試劑，無動(dòng)物源性成分，室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率，對(duì)于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高于X-tremeGENEHP，導(dǎo)致存活細(xì)胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))...試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實(shí)現(xiàn)靶向敲低。懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑選購
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圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應(yīng)的敲低現(xiàn)象。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進(jìn)行注射。隨后分離血清并檢測(cè)FVII蛋白的水平（Biophen顯色檢測(cè)）。持續(xù)敲低能力在單次注射后可觀察到更長(zhǎng)的敲低時(shí)間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應(yīng)。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復(fù)合物后分別以1、0.5、及0.25mg/kg的劑量進(jìn)行注射。在第2、5、9、16、23及30日收集血清，并使用顯色法對(duì)血清進(jìn)行分析以確定FVII蛋白的敲低效果。低毒性上海Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑供應(yīng)商
上海儒安生物科技有限公司成立于2016-09-20，同時(shí)啟動(dòng)了以上海儒安生物為主的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體產(chǎn)業(yè)布局。業(yè)務(wù)涵蓋了細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體等諸多領(lǐng)域，尤其細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體中具有強(qiáng)勁優(yōu)勢(shì)，完成了一大批具特色和時(shí)代特征的醫(yī)藥健康項(xiàng)目；同時(shí)在設(shè)計(jì)原創(chuàng)、科技創(chuàng)新、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范等方面推動(dòng)行業(yè)發(fā)展。同時(shí)，企業(yè)針對(duì)用戶，在細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體等幾大領(lǐng)域，提供更多、更豐富的醫(yī)藥健康產(chǎn)品，進(jìn)一步為全國更多單位和企業(yè)提供更具針對(duì)性的醫(yī)藥健康服務(wù)。上海儒安生物科技始終保持在醫(yī)藥健康領(lǐng)域優(yōu)先的前提下，不斷優(yōu)化業(yè)務(wù)結(jié)構(gòu)。在細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體等領(lǐng)域承攬了一大批高精尖項(xiàng)目，積極為更多醫(yī)藥健康企業(yè)提供服務(wù)。