何謂熱滅活
一般是以56℃，30分鐘來處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活化，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化。
有必要做熱滅活嗎?
實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或完全沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會的增多，這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察，像是 "小黑點(diǎn)"，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
購買的時候注意詢問廠家是否是已滅***清。 常期存放請將血清保存在-5℃至-2O℃冰箱中凍存,有效期5年。廣州進(jìn)口血清 廠家
有研究人員通過不同年齡段的牛血清在不同濃度下對SP2/0細(xì)胞株培養(yǎng)效果的比較試驗(yàn)，用較大增殖濃度、倍增時間、克隆率等指標(biāo)來推斷樣品血清的**年齡段，其結(jié)果如下：SP2/0細(xì)胞株為鼠骨髓瘤細(xì)胞。首先，研究人員在無菌條件下，將7個供試血清μm過濾除菌，然后將供試血清按10％、8％、6％、4％、2％的濃度分別加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中使細(xì)胞濃度為1×104／ml。充分混勻后在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔接種，每個試驗(yàn)樣接種8孔。每24h記數(shù)一孔，共記數(shù)7d。研究人員又將供試血清按8％的血清濃度加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中，將SP2／0細(xì)胞稀釋到5個／mL，分別接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔，每個供試血清樣品接種48孔。杭州山羊血清所制備的免疫血清與人紅細(xì)胞內(nèi)醛縮酶無交叉反應(yīng)。
血清定義指纖維蛋白原已被除去的血漿用法肌肉或靜脈注射外文名Serum作用提供和各種生長因子等形態(tài)淡黃色透明液體
血清的成份可能有幾百種之多，對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚，尤其是對其中一些多肽類生長因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識，這給研究工作帶來許多困難；
第二:血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制；
第三:不能排除血清中含有易變物質(zhì)，這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之一。
抗體稀釋參考
一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1：1000-1:5000或0.2-1.0μg/mL，二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL
注意事項(xiàng) 1.使用該產(chǎn)品比使用沉淀比色HRP底物檢測所需的抗體濃度低。為優(yōu)化抗體濃度,請進(jìn)行一次系統(tǒng)的點(diǎn)印跡分析;
2. 工作液在室溫下8小時內(nèi)可以保持穩(wěn)定,但是應(yīng)該避免暴露在陽光下或任何其他強(qiáng)光環(huán)境,然而短期實(shí)驗(yàn)室照明強(qiáng)度不會破壞工作液的穩(wěn)定性;
3. 封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng),導(dǎo)致出現(xiàn)非特異性信號。封閉緩沖液同時也會影響系統(tǒng)的靈敏性,當(dāng)從一種底物轉(zhuǎn)換為另一種底物時,有時會出現(xiàn)信號衰減或背景增加的現(xiàn)象,原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測系統(tǒng);
4. 使用親和素/生物素檢測系統(tǒng)時,避免使用牛奶作為封閉試劑,因?yàn)榕Ｄ讨泻胁欢康膬?nèi)源性生物素,會導(dǎo)致高背景信號;
5. 保證洗滌緩沖液、封閉緩沖液、抗體溶液和底物工作液的使用體積,以確保在整個實(shí)驗(yàn)過程中印跡膜完全被液體覆蓋,避免膜變干。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的信號;
血清能提供促接觸和伸展因子，使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷，對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用.
解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙枞^濾膜。如需購買血清，歡迎咨詢上海儒安。gemini血清進(jìn)口
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血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,這些化學(xué)成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、***、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或***生長活性是達(dá)到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展，但仍存在一些問題。廣州進(jìn)口血清 廠家
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