血清是指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的大淡黃色透明液體,或者纖維蛋白原已經(jīng)被除去的血漿。其主要作用是,提供基本的營養(yǎng)物質(zhì),提供***和各種生長因子,提供結(jié)合蛋白,提供促接觸和生長因子,使細(xì)胞貼壁,免受機(jī)械損傷,對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。血清的成分非常復(fù)雜,雖然現(xiàn)在已經(jīng)明白其中大部分成分,但是還有相當(dāng)多的成分還不清楚。要認(rèn)識血清,首先要明確全血和血漿的概念。全血包括血細(xì)胞和血漿,血漿是全血除了血細(xì)胞外的淡黃色液體,包括水、白蛋白、球蛋白、電解質(zhì)、各種凝血因子等,當(dāng)全血中加入抗凝劑,經(jīng)離心后除去血細(xì)胞即可分離獲得血漿。而血清為全血自然凝固(凝血系統(tǒng)***)形成血凝塊后析出的淡黃色液體,雖然肉眼觀與血漿沒有什么區(qū)別,但二者所含成分不同,主要區(qū)別在于血清不含纖維蛋白原。細(xì)胞是生命活動的基本單位。像生物體那樣,也以經(jīng)過生長、發(fā)育、衰老等這幾個階段。廣州成纖維細(xì)胞增殖檢測
上海儒安生物科技有限公司麗春紅染色液產(chǎn)品簡介:1.麗春紅(PonceauS)染色液可以用于PVDF膜、硝酸纖維素膜(nitrocellulosemembrane)和醋酸纖維素膜(celluloseacetatemembrane)上的蛋白的檢測。麗春紅帶負(fù)電荷,可以與帶正電荷的氨基酸殘基結(jié)合,同時麗春紅也可以與蛋白的非極性區(qū)相結(jié)合,從而形成紅色的條帶。2.麗春紅對蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸餾水,PBS或其它適當(dāng)溶液洗去。3.本試劑盒使用方便,本底低,靈敏度較高,對蛋白的檢測下限是250納克。使用方法:1.將PVDF膜、硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜浸沒在麗春紅染色液中,搖動3-5分鐘或更長時間,直至出現(xiàn)清晰條帶。對結(jié)果作適當(dāng)記錄。2.用蒸餾水,PBS或其它適當(dāng)溶液漂洗2-3次,每次3-5分鐘,去除麗春紅,進(jìn)行后續(xù)的Western檢測。edu細(xì)胞增殖試劑盒細(xì)胞的增殖,增殖的含義是指什么?
Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)是由日本同仁化學(xué)研究所(Dojindo)開發(fā)的檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用自己開發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,在日本,美國,歐洲等國家地區(qū)均持有**,同仁化學(xué)研究所于2006年在中國獲得了WST-8的注冊商標(biāo)。
CCK-8法與普通的MTT法相比,具有特點(diǎn):
★靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好
★操作簡便,省時省力
★水溶性,不需要換液,尤其適合于懸浮細(xì)胞
★無需放射性同位素和有機(jī)溶劑,對細(xì)胞毒性低
★為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用
★適合于高通量篩選
CCK-8用途:篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、藥敏試驗(yàn)
CCK-8試劑盒在國內(nèi)**科研院所、重點(diǎn)大學(xué)、三甲醫(yī)院被廣泛應(yīng)用,國際認(rèn)可度高,使用CCK-8發(fā)表的中外文獻(xiàn)達(dá)600多篇,其中截止08年底SCI影響因子IF>10分的論文有37篇,比較高IF26.5分。
Q:CCK-8能否用于細(xì)胞染色?
A:CCK-8不能用于細(xì)胞染色,CCK-8檢測原理是高水溶性的四唑鹽WST-8在電子耦合試劑存在下還原產(chǎn)生水溶性formazan形式的染料,WST-8及formazan是高度水溶性的,不會進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)對細(xì)胞進(jìn)行染色。
Q:沒有450 nm的濾光片,能否使用其他濾光片?
A:如果您沒有450 nm濾光片。您也可以使用吸光度在430 nm和490 nm之間的濾光片, 450 nm濾光片具有比較好靈敏度。
Q:哪些物質(zhì)會干擾CCK-8的測定?
A:WST-8可能與還原劑反應(yīng)生成WST-8 formazan,如果使用還原劑(例如一些抗氧化劑)會增加OD值;若存在氧化性物質(zhì)則會阻擋CCK-8測定反應(yīng),減小OD值;此外,培養(yǎng)基中的酚紅不會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,酚紅的吸光度可以在計算時,通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。 研究對控制細(xì)胞周期進(jìn)程的主要檢驗(yàn)點(diǎn)相關(guān)的周期蛋白與依賴于周期蛋白的激酶的調(diào)控機(jī)理。
上海儒安生物科技有限公司CCK8檢測細(xì)胞增殖/毒性的原理CellCountingKit-8(簡稱CCK-8)試劑可用于簡便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓***二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物(Formazandye)。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。用途:***篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、**藥敏試驗(yàn)CCK8的優(yōu)點(diǎn):使用方便,省去了洗滌細(xì)胞,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑;CCK-8法能快速檢測;CCK-8法的檢測靈敏度很高,甚至可以測定較低細(xì)胞密度;CCK-8法的重復(fù)性優(yōu)于MTT法;CCK-8法對細(xì)胞毒性?。籆CK-8細(xì)胞活性檢測試劑中為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用。CCK8的缺點(diǎn):與MTT法相比,CCK8和XTT的價格比較貴。CCK8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。與以往的增殖/毒性測定試劑相比較:檢測方法MTT法XTT法WST-1法CCK8法甲臢產(chǎn)物的水溶性差。CCK-8細(xì)胞活性檢測試劑中為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用。天津精原細(xì)胞增殖檢測
CCK8的實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)分組及檢測方法。廣州成纖維細(xì)胞增殖檢測
抗體稀釋參考一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL,二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL注意事項(xiàng) 1.為獲得比較好效果,在孵育步驟請使用搖床;  2.將Tween20(終濃度0.05-0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液,以降低非特異信號;  3.不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑,疊氨鈉是HRP的***物;  4.避免手與膜直接接觸,實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)戴手套或使用干凈的鑷子;  5.所有設(shè)備必須清潔且不沾染外來物質(zhì),金屬器械(如剪刀)不得具有可見的銹跡,銹跡可能導(dǎo)致斑點(diǎn)形成和高背景。廣州成纖維細(xì)胞增殖檢測
上海儒安生物科技有限公司位于真南路4268號2幢J1718室,交通便利,環(huán)境優(yōu)美,是一家生產(chǎn)型企業(yè)。是一家有限責(zé)任公司企業(yè),隨著市場的發(fā)展和生產(chǎn)的需求,與多家企業(yè)合作研究,在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過不斷改進(jìn),追求新型,在強(qiáng)化內(nèi)部管理,完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時,良好的質(zhì)量、合理的價格、完善的服務(wù),在業(yè)界受到寬泛好評。公司始終堅(jiān)持客戶需求優(yōu)先的原則,致力于提供高質(zhì)量的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體。上海儒安生物科技自成立以來,一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會各界的普遍認(rèn)可與大力支持。