解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。但不建議以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜。白蛋白攜帶維生素、脂肪等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵，在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用；廣州進(jìn)口胎牛血清
血清定義指纖維蛋白原已被除去的血漿用法肌肉或靜脈注射外文名Serum作用提供和各種生長(zhǎng)因子等形態(tài)淡黃色透明液體
血清的成份可能有幾百種之多，對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚，尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí)，這給研究工作帶來(lái)許多困難；
第二:血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制；
第三:不能排除血清中含有易變物質(zhì)，這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之一。
重慶進(jìn)口胎牛血清培養(yǎng)目的檢測(cè)鼠疫患者血清抗體譜，為鼠疫的疫苗研究奠定基礎(chǔ)。
抗體稀釋參考
一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1：1000-1:5000或0.2-1.0μg/mL，二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL
注意事項(xiàng)
為獲得比較好效果,在孵育步驟請(qǐng)使用搖床;
2. 將Tween20(終濃度0.05-0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液,以降低非特異信號(hào);
3. 不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑,疊氨鈉是HRP的***物;
4. 避免手與膜直接接觸,實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)戴手套或使用干凈的鑷子;
5. 所有設(shè)備必須清潔且不沾染外來(lái)物質(zhì),金屬器械(如剪刀)不得具有可見(jiàn)的銹跡,銹跡可能導(dǎo)致斑點(diǎn)形成和高背景。
超敏ECL發(fā)光底物（試劑盒）圖像獲取  1.將包在塑料紙(膜)中的印跡膜置于膠片暗盒中，蛋白質(zhì)面朝上，除適用于膠片曝光的燈(如紅色安全燈)之外，關(guān)閉所有燈;  注:膠片必須在曝光期間保持干燥,為獲得比較好效果,采取以下措施:  確保將多余的底物溶液從膜和塑料紙上完全去除;  在整個(gè)膠片處理期間,使用手套;  切莫將印記膜置于已顯影的膠片上,因?yàn)槟z片上的化學(xué)物質(zhì)會(huì)減弱信號(hào)。  2.將X光膠片置于膜的上面。建議***次曝光60秒。之后可調(diào)整曝光時(shí)間以達(dá)到比較好結(jié)果?；瘜W(xué)發(fā)光反應(yīng)在底物孵育后的前5-30分鐘期間是**強(qiáng)烈的,這一反應(yīng)可以持續(xù)幾個(gè)小時(shí),但強(qiáng)度會(huì)隨時(shí)間下降,如有底物孵育后較長(zhǎng)時(shí)間后曝光,曝光時(shí)間可能需要延長(zhǎng)以獲得較強(qiáng)信號(hào)。如果使用磷光存儲(chǔ)成像設(shè)備(如Bio-Rad的分子成像儀系統(tǒng))或CCD照相機(jī)可能需要較長(zhǎng)的曝光時(shí)間;  3.使用合適的顯影劑和定影劑對(duì)膠片進(jìn)行顯影。如果信號(hào)太強(qiáng),則縮短曝光時(shí)間或?qū)⒂∮浤みM(jìn)行剝離并降低抗體濃度重新檢測(cè)。內(nèi)***含量低；（內(nèi)***：≤3EU/ml).
血漿血漿是血液的液體成分，血細(xì)胞懸濁于其中。人體含有2750-3300毫升血漿，約占血液總體積的55%。血漿的絕大部分是水（體積的90%），其中溶解的物質(zhì)主要是血漿蛋白，還包括葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽離子、***以及二氧化碳。血漿的主要功能是運(yùn)載血細(xì)胞，同時(shí)也是運(yùn)輸分泌產(chǎn)物的主要媒介。將新鮮血液離心，使血細(xì)胞沉降，上層淡黃色清液即是血漿。血漿與血清的區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原等凝血因子。中文名血清定義指纖維蛋白原已被除去的血漿用法肌肉或靜脈注射外文名Serum作用提供***和各種生長(zhǎng)因子等形態(tài)淡黃色透明液體所制備的免疫血清與人紅細(xì)胞內(nèi)醛縮酶無(wú)交叉反應(yīng)。重慶bi血清hyclone
能夠維持培養(yǎng)基的pH 值，起酸堿緩沖液作用；廣州進(jìn)口胎牛血清
抗體稀釋參考
一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1：1000-1:5000或0.2-1.0μg/mL，二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL
注意事項(xiàng) 1.使用該產(chǎn)品比使用沉淀比色HRP底物檢測(cè)所需的抗體濃度低。為優(yōu)化抗體濃度,請(qǐng)進(jìn)行一次系統(tǒng)的點(diǎn)印跡分析;
2. 工作液在室溫下8小時(shí)內(nèi)可以保持穩(wěn)定,但是應(yīng)該避免暴露在陽(yáng)光下或任何其他強(qiáng)光環(huán)境,然而短期實(shí)驗(yàn)室照明強(qiáng)度不會(huì)破壞工作液的穩(wěn)定性;
3. 封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng),導(dǎo)致出現(xiàn)非特異性信號(hào)。封閉緩沖液同時(shí)也會(huì)影響系統(tǒng)的靈敏性,當(dāng)從一種底物轉(zhuǎn)換為另一種底物時(shí),有時(shí)會(huì)出現(xiàn)信號(hào)衰減或背景增加的現(xiàn)象,原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測(cè)系統(tǒng);
4. 使用親和素/生物素檢測(cè)系統(tǒng)時(shí),避免使用牛奶作為封閉試劑,因?yàn)榕Ｄ讨泻胁欢康膬?nèi)源性生物素,會(huì)導(dǎo)致高背景信號(hào);
5. 保證洗滌緩沖液、封閉緩沖液、抗體溶液和底物工作液的使用體積,以確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中印跡膜完全被液體覆蓋,避免膜變干。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的信號(hào);
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