GC-MS非靶向代謝組學(xué)能檢測(cè)到哪些類(lèi)別的代謝物?衍生化極大地拓展了GC/MS的檢測(cè)分析范圍。GC/MS能檢測(cè)到有機(jī)酸、氨基酸、單糖、糖醇、胺類(lèi)、脂肪酸、吲哚、單甘油酯、核苷、二糖、生育酚、甾醇和膽汁酸等代謝物。如何提高定性準(zhǔn)確度?GC/MS的定性有雙重標(biāo)準(zhǔn),一是保留指數(shù),二是質(zhì)譜信息的相似度(similarity)。不同于LC/MS的軟電離源,GC/MS使用的EI源屬于硬電離,能量較強(qiáng)且穩(wěn)定,在將代謝物分子電離后,分子離子峰進(jìn)一步碎裂產(chǎn)生豐富的碎片離子。因此,我們很難在GC/MS上看到分子離子峰。GC/MS提供的是代謝物的“指紋圖譜”,將儀器得到的實(shí)際指紋圖譜和質(zhì)譜庫(kù)(如NIST庫(kù))進(jìn)行比對(duì)后,我們將會(huì)得到一個(gè)叫相似度的指標(biāo)。保留指數(shù)和相似度都必須滿(mǎn)足設(shè)定的閾值,軟件才會(huì)給出色譜峰的定性結(jié)果。然后采用標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)譜信息進(jìn)行完全比對(duì)定性,也就是說(shuō)只有經(jīng)過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì),代謝物才是被100%定性。代謝組學(xué)關(guān)注的對(duì)象是分子量在1000以下的小分子化合物。南京LC-MS/MS非靶向脂質(zhì)組學(xué)方法
代謝組學(xué)疾病診斷應(yīng)用: 代謝組學(xué)研究人員已經(jīng)對(duì)此進(jìn)行了研究。新生兒是否缺失酶基因,可以在出生時(shí)就檢測(cè)出來(lái)。可檢測(cè)出包括涉及合成途徑中的基本成分(如氨基酸)的酶。酶缺失的結(jié)果就是相應(yīng)的代謝產(chǎn)物過(guò)少或過(guò)多。尿癥(PKU)是一種常見(jiàn)的嬰兒疾病。這種疾病是由于缺失將苯丙氨酸水解成酪氨酸所必須的苯丙氨酸水解酶基因,導(dǎo)致血液中苯丙氨酸累積造成的。若是不能及時(shí)檢測(cè)出這種天生的代謝缺乏,在嬰兒出生后九個(gè)月內(nèi),就會(huì)引起無(wú)法挽救的大腦損傷。這種疾病通過(guò)簡(jiǎn)單的血樣和尿素化驗(yàn)就可以確診。而血樣和尿素化驗(yàn)以后也將成為代謝指紋研究方法的一部分。像尿癥那樣的疾病,研究人員正試圖從疾病的生物化學(xué)基礎(chǔ)著手,而不是只有檢測(cè)生物標(biāo)記物。他們希望通過(guò)代謝組學(xué),可以找到更好的方法去治這些疾病。南京LC-MS/MS非靶向脂質(zhì)組學(xué)方法代謝組學(xué)技術(shù)可應(yīng)用于疾病早期診斷。
代謝組學(xué)樣本收集植物組織:果實(shí)、種子:1)對(duì)于含水量高、體積較大的果實(shí)(番茄、西瓜、蘋(píng)果等)需要先將樣品分成“均勻”的小塊(≈ 200 mg/樣本)分裝至2 mL離心管中,標(biāo)號(hào)后迅速放入液氮中冷凍處理至少15 min。2)對(duì)于細(xì)小的顆粒種子(擬南芥種子、谷物種子等),可以先將同一組的植株種子混勻后再分裝(≈ 200 mg/樣本)至離心管中,標(biāo)號(hào)后迅速放入液氮中冷凍處理至少15 min。3)對(duì)于要求對(duì)整個(gè)果實(shí)進(jìn)行提取的(整粒葡萄等),需要把果實(shí)裝在50 mL離心管/自封袋中,標(biāo)號(hào)后迅速放入液氮中冷凍處理至少15min,-80 ℃凍存,干冰寄送。
靶向代謝組學(xué)的一般分析流程為:1. 數(shù)據(jù)采集 第1步是得到標(biāo)準(zhǔn)品。如果無(wú)法從市場(chǎng)上買(mǎi)到,就必須定制合成。然后通過(guò)優(yōu)化產(chǎn)物離子碰撞能量以得到的信號(hào),再通過(guò)測(cè)定三重串聯(lián)四極桿測(cè)定代謝物的 MRM 躍遷值。2. 定量 接下來(lái)用定量分析軟件對(duì) MRM 數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,得到報(bào)告。3. 統(tǒng)計(jì)分析和解釋 將定量報(bào)告輸入統(tǒng)計(jì)分析軟件包,用統(tǒng)計(jì)工具,如ANOVA,對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。靶向分析:在基于質(zhì)譜的代謝組學(xué)分析中,要意識(shí)到離子強(qiáng)度和色譜保留時(shí)間都會(huì)隨著時(shí)間的推移而產(chǎn)生漂移,所以在實(shí)驗(yàn)中,要按隨機(jī)順序?qū)颖具M(jìn)行檢測(cè),且數(shù)據(jù)需要在同天同一批次進(jìn)行采集,以減少誤差。代謝組學(xué)是要涉及研究每一個(gè)代謝組分的共性、特性和規(guī)律。
代謝組學(xué)樣本收集注意事項(xiàng):(1)血液離開(kāi)動(dòng)物或人體后,應(yīng)盡快開(kāi)展血清、血漿的分離,并嚴(yán)格按照操作說(shuō)明進(jìn)行。(2)采集到的血清為黃色透明液體、血漿為淡黃色半透明液體,如果發(fā)現(xiàn)樣本中是紅色,說(shuō)明在已經(jīng)發(fā)生了了溶血現(xiàn)象,樣本需重新制備。(3)血清與血漿的主要區(qū)別在于血清中不含纖維蛋白原。血清和血漿中脂質(zhì),氨基酸,核苷酸等代謝譜存在差別。糞便樣本收集:1.人糞便:(1)用無(wú)菌勺挖取新鮮的,排泄中后部的內(nèi)側(cè)糞便(避免尿液及其他壁對(duì)樣本污染);(2)分裝樣本20mg/管。(3)迅速放入液氮中冷凍處理至少15min.(4)-80℃冰箱凍存。寄樣需足量干冰。代謝組學(xué)的代謝產(chǎn)物是基因表達(dá)的產(chǎn)物。杭州脂質(zhì)代謝組學(xué)多服務(wù)
代謝組學(xué)研究對(duì)象大是相對(duì)分子質(zhì)量1000以?xún)?nèi)的小分子物質(zhì)。南京LC-MS/MS非靶向脂質(zhì)組學(xué)方法
隨著居民收入和消費(fèi)支出均良性增長(zhǎng),消費(fèi)信心持續(xù)增強(qiáng),在銷(xiāo)售方面則表現(xiàn)為對(duì)***旅游需求的不斷提升。根據(jù)行業(yè)發(fā)展報(bào)告顯示,在銷(xiāo)售方面,人群對(duì)**酒店、民宿青睞度提升,顯得更重舒適度和體驗(yàn)感。旅行者對(duì)商務(wù)服務(wù)預(yù)訂系統(tǒng)感到失望,因?yàn)檫@些系統(tǒng)的選擇有限、費(fèi)率高、技術(shù)陳舊、界面不方便——而這種沮喪情緒驅(qū)使許多人選擇使用既定工具之外的方式去進(jìn)行預(yù)訂行為。此外,他們對(duì)一個(gè)簡(jiǎn)單、充滿(mǎn)選擇的預(yù)訂體驗(yàn)的期望部分是由他們?cè)陬A(yù)訂休閑旅游時(shí)可以訪問(wèn)的高質(zhì)量、用戶(hù)友好的工具驅(qū)動(dòng)的。經(jīng)調(diào)查,在多組學(xué)服務(wù),質(zhì)譜檢測(cè),蛋白質(zhì)組學(xué),代謝組學(xué)發(fā)展方面,有業(yè)不少人嘗到了甜頭,但更多的用戶(hù)群則是成為被拖累的一方,消耗了許多精力卻沒(méi)有換來(lái)更好收入。對(duì)此,不少業(yè)內(nèi)企業(yè)表示,體驗(yàn)度是出問(wèn)題比較多的地方,因此在雙方訂立條款的時(shí)候權(quán)責(zé)一定要明確,這樣才能確保不出問(wèn)題。從事生物科技、醫(yī)療科技、化工科技和檢測(cè)科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā),技術(shù)轉(zhuǎn)讓?zhuān)夹g(shù)咨詢(xún),技術(shù)服務(wù),軟件開(kāi)發(fā),化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品,監(jiān)控化學(xué)品,煙花爆竹,民用物,易制毒化學(xué)品)、儀器儀表的銷(xiāo)售。。。....作為重資產(chǎn)的項(xiàng)目,很難飛速進(jìn)行復(fù)制擴(kuò)張。按照當(dāng)前的市場(chǎng)環(huán)境,要想贏得市場(chǎng),還應(yīng)從多方面發(fā)力。因?yàn)榫湍壳盃顩r來(lái)說(shuō)由于其規(guī)模受限,從事生物科技、醫(yī)療科技、化工科技和檢測(cè)科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā),技術(shù)轉(zhuǎn)讓?zhuān)夹g(shù)咨詢(xún),技術(shù)服務(wù),軟件開(kāi)發(fā),化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品,監(jiān)控化學(xué)品,煙花爆竹,民用物,易制毒化學(xué)品)、儀器儀表的銷(xiāo)售。。。....的企業(yè)還應(yīng)準(zhǔn)確找到目標(biāo)群體,實(shí)現(xiàn)確認(rèn)精確、推廣精確、渠道精確和價(jià)格精確的營(yíng)銷(xiāo)精確。南京LC-MS/MS非靶向脂質(zhì)組學(xué)方法