湖北LC-MS／MS非靶向代謝組學定性分析

代謝組學樣本收集注意事項：（1）血液離開動物或人體后，應盡快開展血清、血漿的分離，并嚴格按照操作說明進行。（2）采集到的血清為黃色透明液體、血漿為淡黃色半透明液體，如果發(fā)現(xiàn)樣本中是紅色，說明在已經(jīng)發(fā)生了了溶血現(xiàn)象，樣本需重新制備。（3）血清與血漿的主要區(qū)別在于血清中不含纖維蛋白原。血清和血漿中脂質，氨基酸，核苷酸等代謝譜存在差別。糞便樣本收集：1.人糞便：（1）用無菌勺挖取新鮮的，排泄中后部的內側糞便（避免尿液及其他壁對樣本污染）；（2）分裝樣本20mg/管。（3）迅速放入液氮中冷凍處理至少15min.（4）-80℃冰箱凍存。寄樣需足量干冰。代謝組學 （metabolomics）的出現(xiàn)是生命科學研究的必然。湖北LC-MS／MS非靶向代謝組學定性分析

代謝組學細胞樣本收集：懸浮細胞：1）連同培養(yǎng)基轉移到1.5 mL的進口離心管中。2）低速離心5 min（低于3000 rpm），使細胞沉淀于離心管的底部（1*107個細胞為宜）。3）倒掉培養(yǎng)基（盡量倒干凈），用預冷的PBS反復沖洗2 ~ 3次，低速離心5 min，棄上清。4）標記離心管，將離心管的尖的一端插入液氮中，淬滅細胞沉淀1 min，-80 ℃凍存，干冰寄送。注意事項：1. 培養(yǎng)基傾倒時盡量倒干凈，可使用濾紙將殘留培養(yǎng)液吸凈；2. 甲醇/水請使用色譜純及以上規(guī)格；3. 液氮淬滅細胞時，請小心避免離心管破碎導致樣本受損;4. 建議細胞樣本在進行培養(yǎng)時多準備樣本，以備后續(xù)使用。上海LC-MS／MS非靶向脂質組學分析研究代謝組學有哪些特點？

代謝組學概念：代謝組學(metabonomics/metabolomics)是效仿基因組學和蛋白質組學的研究思想，對生物體內所有代謝物進行定量分析，并尋找代謝物與生理病理變化的相對關系的研究方式，是系統(tǒng)生物學的組成部分。其研究對象大都是相對分子質量1000以內的小分子物質。先進分析檢測技術結合模式識別和**系統(tǒng)等計算分析方法是代謝組學研究的基本方法。代謝組學是繼基因組學和蛋白質組學之后新近發(fā)展起來的一門學科，是系統(tǒng)生物學的重要組成部分。

LC-MS非靶向代謝組學：LCMS非靶向是通過液質聯(lián)用（LC–MS）方法檢測生物體受擾動或刺激前后大量代謝產物的動態(tài)變化，從中找出表達差異的代謝物，進而闡明生物體代謝相關過程的代謝組學技術。LCMS非靶向代謝組學適用于分析難揮發(fā)或熱穩(wěn)定性差的代謝產物，具有高通量、高分辨率、高靈敏度的特點。超高壓液相色譜或超高效液相色譜（UPLC）通過采用更小粒徑的色譜填料配合更高的壓力，實現(xiàn)了更好的分離，具體包括更高的分離能力、更快的分離速度以及更好的靈敏度；串聯(lián)質譜儀在MS掃描模式下，可實現(xiàn)高低碰撞能量快速切換，同時采集代謝物的一二級質譜信息，結合代謝組學數(shù)據(jù)處理軟件對質譜信息的解析，在單次分析中可檢測和鑒定幾百至幾千種代謝物。代謝組學主要研究的是產物的小分子代謝物（MW<1000）。

代謝組學樣本收集指南：1.血漿樣本收集：（1）從合適的靜脈采集血液（典型10mL）到標記的肝素鋰血漿收集管中（肝素鋰用作抗凝劑）。（2）立即于4 °C離心（3000g）20min，上清液即為血漿。（3）離心完畢，取出血漿收集管，取上清液（血漿），分等份（0.5mL或0.1mL），轉移到凍存管中（冰上），旋蓋。（4）保存于-80℃冰箱。寄樣需足量干冰。2.血清樣本收集：（1）從合適的靜脈采集血液（典型10mL）到血清收集管中。（2）將血清收集管冰水?。?℃）凝集至少1h（2h以內），記錄凝集時間。（3）將血清收集管放到冷凍離心機中低溫（4℃）離心15min（2500 g）。（4）離心完畢，取出血清收集管，取上清液，分等份（0.5mL或0.1mL），轉移到凍存管中（冰上），旋蓋。（5）保存于-80℃冰箱。寄樣需足量干冰。代謝組學的研究方法與蛋白質組學的方法類似，通常有兩種方法。深圳LC-MS／MS非靶向脂質組學分析方法

代謝組學的研究方法與蛋白質組學的方法類似。湖北LC-MS／MS非靶向代謝組學定性分析

GC-MS非靶向與代謝組學的關系？代謝組學是運用多種技術手段，研究生物體系中小分子代謝物（包括氨基酸、糖和磷酸糖、生物胺和脂質等）的種類、數(shù)量及變化規(guī)律的科學，是系統(tǒng)生物學的重要組成部分。其中GC-MS非靶向代謝組學是對生物體內源性代謝物進行系統(tǒng)全方面的分析平臺。氣相色譜-質譜聯(lián)用(GC-MS)技術因為其較為成熟、分辨率高、靈敏度高、重現(xiàn)性好，擁有大量標準質譜圖數(shù)據(jù)庫的特點，被大量地運用在植物、動物、微生物的研究中。隨著信息科學和分析技術的發(fā)展，運用GC-MS非靶向代謝組學研究疾病機制和發(fā)現(xiàn)藥物靶點的方法日趨成熟，其重要性也日益凸顯。GC-MS非靶向代謝組學也在代謝性疾病等藥物靶點、疾病機制研究和藥物靶點發(fā)現(xiàn)中提供重要參考和啟示。湖北LC-MS／MS非靶向代謝組學定性分析