LabEx多因子檢測技術(shù)--液相懸浮技術(shù)經(jīng)典炎癥十因子、高通量細胞因子初篩液相懸浮芯片:高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯(lián)到不同熒光標記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。進一步加入生物素標記的高親和配對二抗結(jié)合SA-PE進行信號放大,以實現(xiàn)對多種微量細胞因子的有效檢測。利用梯度稀釋的標準品檢測信號構(gòu)建標準曲線,實現(xiàn)大量目標樣本中多因子的同時檢測和準確定量。特點1、既能檢測蛋白,又能檢測核酸2、既能用于臨床,又能用于多學(xué)科科研領(lǐng)域3、真正意義的“高通量”檢測,一次檢測100個指標4、在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平本panel可檢測以下因子:IFN-α,IFN-β,IFN-γ 種屬:Mouse。人體細胞生長因子
產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當(dāng)增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強非特異性著色。磁珠分選實驗英文本panel可檢測以下因子:TGF-β1,TGF-β2,TGF-β3 種屬:Mouse。
抗體芯片技術(shù)服務(wù)包括:1.樣品蛋白質(zhì)抽提:a.實驗對象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑,勻漿后抽提總蛋白。b.實驗對象為細胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細胞,PBS清洗細胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白。c.實驗對象為血清,則直接進入步驟3。2.蛋白質(zhì)定量:按蛋白質(zhì)定量試劑盒操作說明操作,測定樣品濃度。3.細胞因子抗體芯片封閉和抗體孵育a.細胞因子抗體芯片封閉后加入50-500ug蛋白質(zhì)(若標本為血清,通常取100ul血清)與抗體芯片4℃孵育過夜。b.加入標記好的抗體室溫孵育1小時。4.抗體芯片檢測5.提供實驗報告:包括詳細的實驗方法和芯片實驗結(jié)果的各種圖表和數(shù)據(jù)比較。您只需提供保存完好的標本(血清、組織或細胞、細胞上清或其他非常規(guī)液質(zhì)生物樣本),本公司專業(yè)的技術(shù)服務(wù)人員就可替您完成實驗操作與數(shù)據(jù)分析。
問:因子檢測技術(shù)有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實驗適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、 sma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問:如何計算96孔板可做多少樣本?答:標曲16孔,預(yù)實驗8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復(fù)孔可做36樣本;問:多因子實驗的正式實驗,是否可以分批次檢測?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個月內(nèi)用完,否則標準曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑也要在一個月內(nèi)用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑在一個月內(nèi)用完,防止試劑過期,每次送樣+標準曲線的數(shù)量,建議是4的倍數(shù),否則會造成浪費。LabEx數(shù)字病理圖像分析平臺,為您提供病理圖像分析的全套解決方案。
酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)優(yōu)勢:靈敏度高該測定法的靈敏度來自作為報告基團的酶。眾所周知,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。ELISA實現(xiàn)了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對其進行定量。特異性強其特異性來自抗體或抗原的選擇性??乖贵w的結(jié)合實質(zhì)上只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結(jié)合位點之間。由千兩者在化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補關(guān)系,所以抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。本panel可檢測因子:C-Peptide,Ghrelin (total),GLP-1 (total),Insulin,Leptin,PYY (total) 種屬:Mouse。流式細胞分析五項是檢查什么懷孕
本panel可檢測以下因子:MMP-3,MMP-12,MMP-13 種屬:Human。人體細胞生長因子
酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)(Elispot)LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術(shù)平臺,用心服務(wù),現(xiàn)有囊括基因、蛋白、組織、細胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個專業(yè)的實驗室技術(shù)平臺,助推科研進步!隨著酶免疫分析技術(shù)在醫(yī)學(xué)及生物學(xué)領(lǐng)域的較廣的應(yīng)用,使體外檢測各種細胞因子和抗體研究有了新的突破。在研究免疫應(yīng)答機制時,以往人們常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測體液中游離的細胞因子(CK)或抗體,但由于游離的循環(huán)抗體或CK半衰期不同,使之在體液中不斷地被代謝,而不能確切地反應(yīng)體內(nèi)抗體及CK水平。80年代中期等根據(jù)ELISA技術(shù)的基本原理,建立了體外檢測特異性抗體分泌細胞和CK分泌細胞的固相酶聯(lián)免疫斑點(ELISPOT)技術(shù),因其具有較高的特異性和敏感性,目前正被國內(nèi)外較廣的應(yīng)用,對探索自身免疫系統(tǒng)疾病發(fā)病機制具有重要意義。人體細胞生長因子
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