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HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,染色后組織或細胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細胞凋亡與細胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***,對組織細胞的各種成分都可著色,便于***觀察組織構(gòu)造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存。經(jīng)過HE染色,細胞核被蘇木素染成藍紫色,細胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色。可以觀察細胞結(jié)構(gòu)、組織層次等等。首先切片組織是否完整,組織有無損傷;然后看切片有無刀痕;***細胞核是否清晰可見,胞核與包漿要對比鮮明。HE染色需要哪些材料及實驗步驟。廣東比較好的HE染色分析
HE染色注意事項:1、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長,組織酸化而影響細胞核著色。因此,要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,這樣可以使細胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳,可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后,分色這一步是關(guān)鍵,應(yīng)在顯微鏡下控制進行,一般以細胞核染色清楚(晰)而細胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導(dǎo)致染色太淺,應(yīng)重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后,入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),此為脫水不徹底,應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精,更換酒精、二甲苯,以求徹底脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥,以免切片收縮、變形,影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進入二甲苯前,切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時,要用中性樹脂,防止日后褪色,蓋片要選大于組織塊的面積,如漏出一部分不久將會褪色,所用樹脂濃度要適當(dāng),樹脂封固時不能有氣泡。山西推薦的HE染色外包腎臟組織HE染色如何觀察。
HE染色結(jié)果判讀:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時,伊紅著色由淺變深。H-E染色評定標(biāo)準(zhǔn):(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均勻,無皺褶無刀痕;(2)染色核漿分明,紅藍適度,透明潔凈,封裱美觀。
HE染色知識點1:對送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定。尸檢標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的,應(yīng)當(dāng)在送檢單上注明,有特殊要求(如細菌培養(yǎng)、解釋道化學(xué)分析等)應(yīng)當(dāng)事先聯(lián)系,并且在標(biāo)本未固定前進行處理。知識點2:組織取材要求在對送檢組織標(biāo)本進行詳細檢查的基礎(chǔ)上,根據(jù)診斷的需要,確定取材的部位和塊數(shù)。切取的組織應(yīng)當(dāng)按照不同的部位分別給予不同的編號或標(biāo)記,以便鏡檢時核對。另外,盡可能在取材前對有意義的標(biāo)本的表面及剖面鏡下攝影,并編號存檔南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。什么是HE染色,HE染色實驗的目的。
HE染色等常規(guī)染色,組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片。原因:石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好,并且對抗原基本無影響。脂質(zhì)染色(油紅O染**odipy染色,尼羅紅染色)必須做冰凍切片,不能做石蠟切片。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,ATP染色,膽固醇染色。如果標(biāo)本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,將標(biāo)本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定(在固定液內(nèi)邊解凍邊固定)。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序:新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片>組織-80°冷凍后直接冰凍切片。石蠟組織切片的HE染色。河北推薦的HE染色多少錢
脾臟組織HE染色如何觀察。廣東比較好的HE染色分析
HE染色觀察細胞凋亡,凋亡檢測中形態(tài)學(xué)方法是**直觀、可靠的方法之一。對組織和各種細胞進行染色后,在光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,通過觀察細胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細胞涂片或細胞甩片的制備:對于貼壁細胞,可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中,讓培養(yǎng)細胞長于玻片上,然后用藥物誘導(dǎo)細胞凋亡后取出,用4%多聚甲醛固定5min。對于懸浮細胞,用藥物誘導(dǎo)細胞凋亡后,離心1000r/min收集細胞,用PBS洗2次,收集調(diào)整細胞數(shù)為1X105/ml,涂片或用離心甩片,用4%多聚甲醛固定5min;在光學(xué)顯微鏡下,貼壁細胞由原來的梭形或多角形變小、變圓,核呈藍色或藍黑色,胞漿呈淡紅色,核固縮、破碎,形成凋亡小體等。懸浮細胞,整個細胞皺縮,核固縮,破碎,形成凋亡小體,染色質(zhì)顏色加深等。廣東比較好的HE染色分析