云南細(xì)胞免疫組化外包

免疫組化的實(shí)驗(yàn)步驟

免疫組化的實(shí)驗(yàn)步驟通常包括組織固定、切片、抗原修復(fù)、封閉、一抗孵育、二抗孵育、顯色和復(fù)染等。首先，組織樣本需要經(jīng)過固定（如福爾馬林固定）以保持其形態(tài)結(jié)構(gòu)。然后，將固定后的組織包埋在石蠟中并切成薄片?？乖迯?fù)是為了暴露被固定過程掩蓋的抗原表位，常用的方法有熱修復(fù)和酶消化。封閉步驟是為了減少非特異性結(jié)合，通常使用血清或BSA。一抗孵育是關(guān)鍵步驟，一抗與目標(biāo)蛋白特異性結(jié)合。二抗孵育則是通過二抗與一抗結(jié)合，并連接顯色系統(tǒng)。，通過顯色和復(fù)染使目標(biāo)蛋白可視化。 如何做好免疫組化實(shí)驗(yàn)？云南細(xì)胞免疫組化外包

免疫組化（IHC）利用抗體檢測(cè)組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的定位。

英瀚斯生物實(shí)驗(yàn)外包，自有專業(yè)病理實(shí)驗(yàn)室，可高效完成免疫組化檢測(cè)。

抗體-抗原的相互作用通過有色酶底物顯色檢測(cè)或熒光染料熒光檢測(cè)進(jìn)行觀察。雖然IHC在定量方面不如蛋白質(zhì)印跡或ELISA，但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達(dá)譜對(duì)病理學(xué)家以及作為診斷工具都具有重要意義。

IHC實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于穩(wěn)定、優(yōu)化且可重復(fù)的染色方案，而該方案應(yīng)使用高質(zhì)量的特異性試劑。 安徽小鼠免疫組化要多少錢做免疫組化的目的是什么？

免疫組化的結(jié)果分析：

免疫組化實(shí)驗(yàn)通常需要設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照（或替代對(duì)照）（陽(yáng)性對(duì)照是排除方法和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有無(wú)問題；陰性對(duì)照與替代對(duì)照是排除有無(wú)非特異性染色）。一般情況下，陽(yáng)性對(duì)照顏色的特點(diǎn)為：Ag定位，包漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。且染色的強(qiáng)度不同（顏色深淺不一）；陰性對(duì)照的特點(diǎn)為：染色細(xì)胞與組織無(wú)區(qū)別，顏色具有彌散性，分布均勻。

英瀚斯生物可承接各類病理染色，包括免疫組化。

說明：免疫組化實(shí)驗(yàn)可以對(duì)結(jié)果進(jìn)行定量分析，但要實(shí)驗(yàn)得到的必須是高質(zhì)量的染色切片，要求背景染色淺且特異性染色較深，這樣分析的結(jié)果才會(huì)比較準(zhǔn)確。

免疫組化臨床應(yīng)用對(duì)“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細(xì)胞的起源特征不能分類，初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體，在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白，有時(shí)淋巴瘤可以表達(dá)上皮膜抗原，一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白，這同時(shí)也強(qiáng)調(diào)了在cancer診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個(gè)抗體。如果您有實(shí)驗(yàn)外包的需求，可以與我們南京英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系，我們也有做免疫組化的服務(wù)！有沒有做免疫組化比較好的公司？

什么是免疫組化？免疫組化的原理是什么？

1、定義：用標(biāo)記的特異性抗體對(duì)組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中某些化學(xué)成分的分布和含量進(jìn)行組織和細(xì)胞原位定性、定位或定量研究，這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry）技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)（immunocytochemistry）技術(shù)。

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2、原理：根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理，組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合，再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng)，前者再用標(biāo)記辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如鏈霉親和素等）結(jié)合，通過呈色反應(yīng)或熒光來(lái)顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分，在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物，從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。 免疫組化失敗的原因？福建病理免疫組化多少錢

免疫組化如何得到好的效果？云南細(xì)胞免疫組化外包

免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色？ 

（1）縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來(lái)控制。這是重要的一條。

（2）一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。

（3）內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細(xì)胞多的組織），需要通過延長(zhǎng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來(lái)降低背景染色； 

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（4）非特異性組分與抗體結(jié)合，這需要通過延長(zhǎng)二抗來(lái)源的動(dòng)物免疫血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來(lái)加強(qiáng)封閉效果； 

（5）縮短DAB孵育時(shí)間或降低DAB濃度/過氧化氫濃度等； 

（6）適當(dāng)增加PBS沖洗次數(shù)和浸洗時(shí)間，在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要； 

（7）防止標(biāo)本染色過程中出現(xiàn)干片，這容易增強(qiáng)非特異性著色。 云南細(xì)胞免疫組化外包