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取上述200μL細胞液加入小室，下室（培養(yǎng)板）加入900L含有10% FBS的培養(yǎng)基。不同規(guī)格的小室和培養(yǎng)板所加的體積不同，具體參考Millicell?產(chǎn)品說明書。37°C孵育24至72小時，依據(jù)**細胞類型而定。孵育結束，小心取出細胞小室，吸掉小室上層培養(yǎng)液，PBS清洗一遍，70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min，0.5%結晶紫（2%乙醇或PBS溶解）染色20min，然后進行第8步或者第9步。PBS清洗兩次以去除多余的染料，立即用棉簽擦去濾膜上層的細胞，自然靜置風干。顯微鏡下觀察濾膜下層的細胞，隨機選取不同的視野計數(shù)并算平均值。結晶紫溶解濾膜下層細胞，然后用33%醋酸脫色，將結晶紫完全洗脫下來，洗脫液可在酶標儀上570nm讀取OD值。這種方法可以避免視野下細胞穿透不均勻帶來的誤差。益啟***的批發(fā)價是多少呢？松江區(qū)干細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)銷售

每隔2天用電阻儀測量細胞跨膜電阻值，直到達到平臺，提示細胞已經(jīng)形成致密單層；或者通過檢測熒光染料熒光黃的通過率，以判斷細胞剛好完全匯合。電阻儀測量因不傷害細胞，可以繼續(xù)培養(yǎng)而比熒光黃法更為普遍地被采用。細胞單層匯合后，用DPBS清洗一次細胞，加入含有不同濃度藥物（一般10-200μM）的緩沖液。如果要測藥物從上至下的運輸效果，則上層小室中加藥物，下層培養(yǎng)板孔里只加緩沖液；反之則相反。將培養(yǎng)板在37℃條件下培養(yǎng)（60rpm震蕩或者不震蕩）1-2h，到達時間之后，分別從細胞小室和培養(yǎng)孔里取出一定 體積緩沖液（一般50μL ）轉移至新的轉運分析板進行LC/MC分析。對于放射性標記藥物，分別取出20μL緩沖液加入100μL閃爍液，通過多孔閃爍讀板儀讀值。普陀區(qū)細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)商家益啟生物公司帶您了解干細胞培養(yǎng)詳情。

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