并實現(xiàn)了在非常高通量的應用中使用報告基因檢測。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,現(xiàn)在已經(jīng)實現(xiàn)了“加樣-讀數(shù)”的ATP檢測方法。ATP是細胞健康的重要指標,這使得CellTiter-Glo?能有效測定細胞活力,尤其是在高通量應用中。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生,尤其是用于研究ATP酶(如激酶)的Kinase-Glo?(2004年)和ADP-Glo?(2009年)酶檢測系統(tǒng)。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,還可以檢測底物(luciferin)濃度的變化。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產(chǎn)生反應的保護基團偶聯(lián),能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數(shù)”檢測,如半胱天冬酶(caspase)和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統(tǒng)隨著對螢火蟲螢光素酶化學反應的進一步了解以及Promega生物學家和化學家團隊的建立,一種改進的luciferin面世,能更好地用于典型的報告基因檢測應用。這種新的底物——fluoroluciferin,是新型底物開發(fā)的一個早期實例。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗,研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計出一種新型螢光素酶報告基因,即NanoLuc?螢光素酶。做D-熒光素鉀鹽測試哪個公司好?上海螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽生物公司
可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進行半衰期為一小時的“輝光型”信號在大量檢測板之間提供一致的信號與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑(Renillareniformis)分離的36kDa蛋白。與螢火蟲熒光素酶相比,海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,產(chǎn)生480nm的藍光。與螢火蟲螢光素酶類似,海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒(#AAT-12535)提供了一種快速,靈敏的方法,可以使用專有的發(fā)光配方在基于細胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,與海腎螢光素酶相互作用后,該試劑產(chǎn)生具有強光的產(chǎn)物。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點:該測定法與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達或基因表達每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分各類螢光素酶底物,輔因子和物理特性:近幾十年來,腺苷三磷酸(ATP)生物發(fā)光技術(shù)得到了很大的發(fā)展,已經(jīng)在細胞增殖、細胞毒性和生物量計數(shù)等方面廣泛應用。連云港螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽哪家好D-熒光素鉀鹽運輸條件是4℃冰袋運輸。
普遍應用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,尤其是體內(nèi)活ti成像技術(shù)。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光。當熒光素過量時,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。螢光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中更有代表性的是一種學名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶,螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世。在生物化學和分子生物學的早期,這一現(xiàn)象被認為是發(fā)展生物分析的有力平臺。1991年,Promega發(fā)布了di一代螢光素酶分析產(chǎn)品,并啟動了基于螢光素酶的進一步創(chuàng)新計劃,通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術(shù)Promega螢光素酶技術(shù)發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月,Promega初次提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報告基因技術(shù)的應用可能性。當時的人們認為,螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點,可能會對分子生物學家的研究產(chǎn)生重要的影響。幾個月后,di一代螢火蟲螢光素酶報告基因載體和檢測試劑在Promega誕生,使這項新技術(shù)正式并更范圍廣地為全球研究人員服務。
其中更有代表性的是一種學名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶。在相應化學反應中,熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有熒光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M一步加速反應(與肌肉收縮的情況相似)。[1]熒光生成反應通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物。D-熒光素鉀鹽如何選擇合作公司?
但是上一次底物的殘留曲線可以知道,可以控制對下一次觀察結(jié)果的影響。儲存與運輸一般放在-20℃的冰箱即可,半年以上不使用放在-80℃的冰箱,溶解配制后放在4℃冰箱,短期運輸放在4℃環(huán)境。建議現(xiàn)用現(xiàn)配,D熒光素鉀鹽在液體中容易降解。應用領(lǐng)域腫大的瘤,干細胞,藥物開發(fā),基因治的好,轉(zhuǎn)基因小鼠,免疫學等等。英文名字firefly.中文名稱熒光素酶,重組熒光素貨號AAT-12500規(guī)格¥1430/1mL背景資料:熒光素酶是來自北美螢火蟲(Photinuspyralis)中熒光素酶基因的克隆和重組表達,它為實驗研究或者用生物熒光試劑制備試劑盒檢測ATP或者熒光素底物提供了可信度和可靠性。這種重組酶可以克服由天然資源純化獲得熒光素酶時受季節(jié)和地方區(qū)域變化的影響。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究。產(chǎn)品形式提供的熒光素酶*重組熒光素*產(chǎn)品為溶液形式。作者:思存鏈接:zhuanlan./p/來源:知乎著作權(quán)歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán),非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處。D-熒光素鉀鹽使用的是什么技術(shù)?連云港螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽哪家好
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故根據(jù)熒光反應的情況可以檢測樣品中的微生物含量。APT熒光檢測儀***用于食品、飲用水、餐飲器具等的微生物快速檢測。1970年,科學家***次測定了螢火蟲熒光素酶的結(jié)構(gòu);1985年,科學家***克隆了一種螢火蟲熒光素酶基因,并在大腸桿菌中表達,從而得到了具有活性的熒光素酶;1986年,科學家們測定了該種螢火蟲熒光素酶的基因序列。隨后,各種螢火蟲熒光素酶基因相繼克隆成功,熒光素酶的研究和應用不斷發(fā)展。目前,熒光素酶發(fā)光系統(tǒng)的分析技術(shù)已經(jīng)廣泛應用到醫(yī)學、生命科學、環(huán)境科學、微生物學等許多領(lǐng)域。以醫(yī)學領(lǐng)域為例,**們將熒光素酶基因嵌入到*細胞中,再注入熒光素,使*細胞發(fā)光,通過探測熒光,就能監(jiān)測*細胞的擴散和轉(zhuǎn)移。同理,用這種方法能對致病基因、***免疫機制等進行研究,對某些疾病進行診斷,監(jiān)測疫苗、藥物和治療方法的效力。上海螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽生物公司
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