南通熒光素酶D-熒光素鉀鹽活題成像原理

來源: 發(fā)布時間:2022-06-16

    2)按10μL/g體重的濃度向每支小鼠注射相應(yīng)量的15mg/mL熒光素溶液;3)腹腔注射10-15min后進(jìn)行成像分析。(對每只動物模型做熒光素動力學(xué)研究以確定峰值信號獲取時間)Firefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素分子式:C11H8N2O3S2分子量:g/mol外觀:白色至淺黃色粉末溶解:,形成近乎無色至淺黃色的清夜保存:-15°C避光應(yīng)用:1)活細(xì)胞、組織或生物體內(nèi)luc標(biāo)記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達(dá)的成像分析;2)***用于報告基因分析,免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽)。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液,可溶于甲醇和DMSO;后者易溶于水或緩沖液中,使用方便,溶劑d0926aa8-0148-40da-80fa-f65性,特別適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實(shí)質(zhì)性的差別。相關(guān)列表魯米諾/3-氨基苯二甲酰肼/發(fā)光氨異魯米諾/4-氨基鄰苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二。D-熒光素鉀鹽檢測是個人合作嗎?南通熒光素酶D-熒光素鉀鹽活題成像原理

    酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)。中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級:BS物性數(shù)據(jù)編輯播報1.性狀:未確定2.密度(g/cm3,25/4℃):.相對蒸汽密度(g/cm3,空氣=1):未確定4.熔點(diǎn)(oC):3205.沸點(diǎn)(oC,常壓):未確定6.沸點(diǎn)(oC,8kPa):未確定7.折射率:未確定8.閃點(diǎn)(oC):未確定9.比旋光度(o):未確定10.自燃點(diǎn)或引燃溫度(oC):未確定11.蒸氣壓(kPa,25oC):未確定12.飽和蒸氣壓(kPa,60oC):未確定13.燃燒熱(KJ/mol):未確定14.臨界溫度(oC):未確定15.臨界壓力(KPa):未確定16.油水(辛醇/水)分配系數(shù)的對數(shù)值:未確定17.上限(%,V/V):未確定18.下限(%,V/V):未確定19.溶解性:溶于水及乙醇,帶有強(qiáng)的綠色熒光,水溶性好。南通熒光素酶D-熒光素鉀鹽活題成像原理做D-熒光素鉀鹽測試找哪家公司?

    因此只有在活細(xì)胞內(nèi)才會產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,并且發(fā)光光強(qiáng)度與標(biāo)記細(xì)胞的數(shù)目線性相關(guān)。結(jié)構(gòu)與性能熒光素在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),生成氧化熒光素(oxyluciferin),并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)的,約一分鐘就可以擴(kuò)散到小鼠全身。熒光素的半衰期約三個小時,只有活細(xì)胞才能夠持續(xù)表達(dá)熒光素酶。(1)熒光素不會影響動物的正常生理功能。(2)熒光素是280道爾頓的小分子,水溶性和脂溶性都非常好,很容易穿透細(xì)胞膜和血腦屏障。(3)熒光素在體內(nèi)擴(kuò)散速度快,可通過腹腔注射或尾部靜脈注射進(jìn)入動物體內(nèi)。腹腔注射擴(kuò)散較慢,持續(xù)發(fā)光長。熒光素腹腔注射老鼠后約1min后表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞開始發(fā)光,10min后強(qiáng)度達(dá)到穩(wěn)定的更高點(diǎn),在更高點(diǎn)持續(xù)約20~30min后開始衰減,約3h后熒光素排除,發(fā)光全部消失,更佳檢測時間是在注射后15~35min之間;若進(jìn)行熒光素靜脈注射,擴(kuò)散快,但發(fā)光持續(xù)時間很短。科研人員根據(jù)大量的實(shí)驗(yàn)總結(jié)出熒光素的合適的用量是150mg/kg,即體重20克的小鼠需要3毫克的熒光素。(4)觀察時間的間隔沒有更短限制,只要觀察的條件控制一致就可以。雖然底物在動物體內(nèi)有一定的代謝過程。

    或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細(xì)胞培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進(jìn)行圖像分析。2.***成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻。2)用μm濾膜過濾除菌。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射。4)注射入體內(nèi)10-15min(待光信號達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺期)后進(jìn)行成像分析。注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線,從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項(xiàng)1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin)只只是不同公司在命名上的差異,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid。2)注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動力學(xué)曲線,確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3)如果要進(jìn)行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染,如操作時戴手套并使用ATP-free的實(shí)驗(yàn)耗材,在進(jìn)行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水。做D-熒光素鉀鹽測試價格是多少。

    這是一種小分子(19kDa)單體酶,具有獨(dú)特的底物,其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍。這種新型的報告基因有著***的應(yīng)用前景,為進(jìn)一步的技術(shù)開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。[1]2015NanoBRET?技術(shù)NanoLuc?的小體積和非常明亮的光輸出是作為蛋白質(zhì)標(biāo)簽的理想特征。這些特征還很適合作為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)的供體。一項(xiàng)針對各種能量受體熒光基團(tuán)的深入研究發(fā)現(xiàn),紅色光譜中的可選擇性有助于消除與BRET測定相關(guān)的一些挑戰(zhàn)。可將這些熒光基團(tuán)添加到蛋白質(zhì)配基等分子中以測量靶蛋白的結(jié)合,或與HaloTag?配基耦聯(lián)以進(jìn)行活細(xì)胞中蛋白質(zhì):蛋白質(zhì)相互作用的檢測。[1]2016NanoBiT?技術(shù)隨著NanoLuc?的誕生,Promega的科學(xué)家努力將該報告基因改造為多亞基系統(tǒng),即“NanoLuc?BinaryTechnology”或NanoBiT?。該系統(tǒng)由兩部分組成:11個氨基酸的小標(biāo)簽和一個更大,更精細(xì)的NanoLuc?亞基,LgBiT。這兩部分結(jié)構(gòu)互補(bǔ)結(jié)合,重組為一個明亮的螢光素酶。這些亞基的親和力可以和SmBiT肽一樣低,從而可以進(jìn)行蛋白質(zhì)相互作用的測定;也可以和HiBiT一樣高,從而允許自我組裝。[1]2017HiBiT?技術(shù)基于NanoBiT?系統(tǒng)的研究。D-熒光素鉀鹽的合作平臺有哪些?上海熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存

D-熒光素鉀鹽測試怎么樣?南通熒光素酶D-熒光素鉀鹽活題成像原理

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