熒光素酶活性

    這是一種小分子（19kDa）單體酶，具有獨特的底物，其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍。這種新型的報告基因有著***的應用前景，為進一步的技術(shù)開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。[1]2015NanoBRET?技術(shù)NanoLuc?的小體積和非常明亮的光輸出是作為蛋白質(zhì)標簽的理想特征。這些特征還很適合作為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移（BRET）的供體。一項針對各種能量受體熒光基團的深入研究發(fā)現(xiàn)，紅色光譜中的可選擇性有助于消除與BRET測定相關(guān)的一些挑戰(zhàn)?？蓪⑦@些熒光基團添加到蛋白質(zhì)配基等分子中以測量靶蛋白的結(jié)合，或與HaloTag?配基耦聯(lián)以進行活細胞中蛋白質(zhì)：蛋白質(zhì)相互作用的檢測。[1]2016NanoBiT?技術(shù)隨著NanoLuc?的誕生，Promega的科學家努力將該報告基因改造為多亞基系統(tǒng)，即“NanoLuc?BinaryTechnology”或NanoBiT?。該系統(tǒng)由兩部分組成：11個氨基酸的小標簽和一個更大，更精細的NanoLuc?亞基，LgBiT。這兩部分結(jié)構(gòu)互補結(jié)合，重組為一個明亮的螢光素酶。這些亞基的親和力可以和SmBiT肽一樣低，從而可以進行蛋白質(zhì)相互作用的測定；也可以和HiBiT一樣高，從而允許自我組裝。[1]2017HiBiT?技術(shù)基于NanoBiT?系統(tǒng)的研究。D-熒光素鉀鹽的合作平臺有哪些？熒光素酶活性

    熒光素鈉[1]，橙紅色粉末，無氣味，有吸濕性；易溶于水，溶液呈黃紅色，并帶極強的黃綠色熒光，酸化后消失，中和或堿化后又出現(xiàn)，微溶于乙醇；比較大吸收波長(水)。基本信息藥品名稱熒光素鈉拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIUM來源(分子式)與標準本品為9-(鄰羧基苯基)-6-羥基-3H-噸-3-酮二鈉鹽。按干燥品計算，含C20H10Na2O5不得少于。類別診斷用藥。劑量滴眼2%溶液貯藏密封保存。制劑熒光素鈉注射液2化學性質(zhì)編輯中文名稱：熒光素鈉中文別名：熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名稱：FluoresceindisodiumsaltCAS號：518-47-8[2]熒光素鈉分子式：C20H10Na2O5分子量：等級：BSMDL號：MFCD00167039Beilstein號：3833041EC號：208-253-0熒光素鈉[1]3性狀描述編輯本品為橙紅色粉末；無臭，幾乎無味；有引濕性。本品在水中易溶，在乙醇中略溶。橙紅色粉末，無氣味，有吸濕性；易溶于水，溶液呈黃紅色，并帶極強的黃綠色熒光，酸化后消失，中和或堿化后又出現(xiàn)，微溶于乙醇；比較大吸收波長(水)。4檢查資料編輯氯化物取本品，分取溶液10ml，依法檢查（附錄ⅧA），與標準氯化鈉溶液制成的對照液比較，不得更濃（）。硫酸鹽取上述氯化物項下剩余的溶液25ml，依法檢查。上海游離酸D-熒光素鉀鹽供應商D-熒光素鉀鹽長期保存是有效期一年。

    螢光素酶（英文名稱：Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱，其中**有代表性的是一種學名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶，螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世。在生物化學和分子生物學的早期，這一現(xiàn)象被認為是發(fā)展生物分析的有力平臺。1991年，Promega發(fā)布了***代螢光素酶分析產(chǎn)品，并啟動了基于螢光素酶的進一步創(chuàng)新計劃，通過持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術(shù)。Promega螢光素酶技術(shù)發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月，Promega***提出螢火蟲螢光素酶(Luc)作為一種新興報告基因技術(shù)的應用可能性。當時的人們認為，螢火蟲螢光素酶具備的生物發(fā)光特性、極高的靈敏度和快速簡單的檢測流程等特點，可能會對分子生物學家的研究產(chǎn)生重要的影響。幾個月后，***代螢火蟲螢光素酶報告基因載體和檢測試劑在Promega誕生，使這項新技術(shù)正式并更***地為全球研究人員服務(wù)。隨后30年里，Promega不斷在螢光素酶實驗工具領(lǐng)域推陳出新，保持技術(shù)***的地位。這里提到的螢光素酶即熒光素酶。[1]1991螢光素酶檢測系統(tǒng)。

    具體實驗流程：注：該操作流程通常用來檢測轉(zhuǎn)染了螢火蟲熒光素酶基因的真核細胞中熒光素酶表達的活性，不適用于對細菌熒光素酶進行檢測。1．實驗***天，消化并接種細胞（根據(jù)具體實驗選擇合適的細胞）于35mm細胞培養(yǎng)皿，置于5％CO2、飽和濕度的37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)過夜。2．等細胞密度達到70％時用Luciferase報告基因質(zhì)粒、LacZ的表達質(zhì)粒及其它質(zhì)粒（根據(jù)具體實驗確定）共轉(zhuǎn)染細胞（根據(jù)具體實驗選擇轉(zhuǎn)染方法，如磷酸鈣沉淀法、PEI、lipofectamine2000等均可）。3．轉(zhuǎn)染24－36h后，吸取培養(yǎng)液，用預冷的PBS（無鈣和鎂離子）洗滌細胞。注：熒光酶的酶促反應會被痕量的鈣所抑制，故用磷酸鈣轉(zhuǎn)染的細胞在收集細胞前應充分洗滌除去含鈣介質(zhì)。4．在每個培養(yǎng)皿中加入350μl預冷的harvestbuffer,于4℃或冰上放置10min裂解細胞。5．在細胞裂解期間，準備足量的ml微量離心管，將ATPbuffer與luciferinbuffer以1：，每管100μl。6．依次取等體積的細胞裂解液（100μl）至步驟5中的離心管中，迅速混勻，在發(fā)光儀（Luminometer）上讀取吸光值。注：發(fā)光反應會迅速衰減，將細胞裂解液加入反應液后5s內(nèi)必須讀取吸光值。7．確保以相同操作手法讀取全部樣品吸光值后。做D-熒光素鉀鹽測試哪個公司好？

    是新型底物開發(fā)的一個早期實例。[1]2012NanoLuc?螢光素酶基于定向進化和新型底物開發(fā)方面的經(jīng)驗，研究人員從蝦的螢光素酶改造設(shè)計出一種新型螢光素酶報告基因，即NanoLuc?螢光素酶。這是一種小分子（19kDa）單體酶，具有獨特的底物，其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍。這種新型的報告基因有著范圍廣的應用前景，為進一步的技術(shù)開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。[1]2015NanoBRET?技術(shù)NanoLuc?的小體積和非常明亮的光輸出是作為蛋白質(zhì)標簽的理想特征。這些特征還很適合作為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移（BRET）的供體。一項針對各種能量受體熒光基團的深入研究發(fā)現(xiàn)，紅色光譜中的可選擇性有助于消除與BRET測定相關(guān)的一些挑戰(zhàn)?？蓪⑦@些熒光基團添加到蛋白質(zhì)配基等分子中以測量靶蛋白的結(jié)合，或與HaloTag?配基耦聯(lián)以進行活細胞中蛋白質(zhì)：蛋白質(zhì)相互作用的檢測。[1]2016NanoBiT?技術(shù)隨著NanoLuc?的誕生，Promega的科學家努力將該報告基因改造為多亞基系統(tǒng)，即“NanoLuc?BinaryTechnology”或NanoBiT?。該系統(tǒng)由兩部分組成：11個氨基酸的小標簽和一個更大，更精細的NanoLuc?亞基，LgBiT。這兩部分結(jié)構(gòu)互補結(jié)合。做D-熒光素鉀鹽測試真的靠譜嗎？專業(yè)做D-熒光素鉀鹽活題成像

D-熒光素鉀鹽母液保存條件是-20℃避光。熒光素酶活性

    2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇**酸三(環(huán)已胺)鹽PEP病毒保存液肝素鋰乙二胺四乙酸二鉀/EDTA二鉀血清分離膠/血液分離膠肝素抗凝劑乙二胺四乙酸三鉀/EDTA三鉀血液促凝劑高效促凝粉高效硅化劑水溶性硅化劑草酸鉀鈣離子螫合抗凝劑弱效抗凝劑吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4結(jié)合物吖啶酯-T3結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-N-乙胺基馬來酰亞胺吖啶磺酰胺鹽-T4結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-T3結(jié)合物生物素-T4結(jié)合物化學發(fā)光分析試劑及標記物生物素-T3結(jié)合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PEG-GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素-NHS酯5(6)-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素D熒光素鈉鹽D-Luciferin,SodiumSaltD-熒光素鉀鹽D-Luciferin,PotassiumSaltD-熒光素螢火蟲，游離酸D-LuciferinFirefly,freeacid螢火蟲熒光素酶fireflyluciferase海腎熒光素酶Renillaluciferase天然腔腸熒光素Coelenterazineh腔腸素hCoelenterazinef腔腸素fCoelenterazineh/腔腸素h腔腸熒光素運輸和保存冰袋運輸；-20℃干燥避光保存；有效期一年。使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鈉鹽，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×)，混勻。立即使用。熒光素酶活性

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