外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥(niǎo)苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?,F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9))、熱休克蛋白家族((HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細(xì)胞來(lái)源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源)以及乳凝集素(不成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞)。南京做外泌體提取找哪個(gè)公司做?廣州靠譜的外泌體研究
翌科生物團(tuán)隊(duì)專注于外泌體研究,公司擁有成熟的外泌體研發(fā)經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)服務(wù)平臺(tái),具備全套的外泌體提取、鑒定、分析試劑與服務(wù)。外泌體(exosome)是一群由細(xì)胞分泌的直徑在40-150 nm左右、密度范圍為1.09-1.18 g/ml的具有雙層磷脂膜結(jié)構(gòu)的囊泡樣物質(zhì),包含蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA及其它信號(hào)分子(圖1)。目前的研究發(fā)現(xiàn),各個(gè)細(xì)胞類型(如腫瘤細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、巨核細(xì)胞等)均有分泌外泌體的能力,并且外泌體也被發(fā)現(xiàn)存在于人體的各種體液(如血液、唾液、尿液、乳汁等)。體液中的外泌體及其內(nèi)含物被認(rèn)為可作為包括zhong瘤在內(nèi)的多種疾病的生物標(biāo)志物,廣泛應(yīng)用于疾病診斷,具有巨大的科研價(jià)值和臨床應(yīng)用前景。全國(guó)比較好的外泌體鑒定外泌體在分泌細(xì)胞和受體細(xì)胞間的穿梭介導(dǎo)了細(xì)胞間的生物分子傳遞。
外泌體是所有細(xì)胞產(chǎn)生的胞外小泡,攜帶核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和代謝物。它們是健康和疾病中細(xì)胞間近距離通訊的介質(zhì),影響細(xì)胞生物學(xué)的各個(gè)方面。外泌體的生物發(fā)生細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)陷,將一些細(xì)胞外成分和細(xì)胞膜蛋白包裹在一起,形成早期內(nèi)涵體(ESEs),這些ESEs可以與其他細(xì)胞器發(fā)生物質(zhì)交換,或者不同ESEs之間融合形成晚期內(nèi)涵體(LSEs),進(jìn)一步形成細(xì)胞內(nèi)多膜體(MVBs),其中會(huì)包含許多腔內(nèi)囊泡(ILVs),這些ILVs將來(lái)就可能會(huì)被釋放成為外泌體。
外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是外泌體提取比較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心,這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時(shí),量少。四是免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性,不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。五是PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度比較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法比較新數(shù)據(jù),表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體南京哪家做外泌體研究的公司靠譜?
外泌體參與了機(jī)體不同的生理和病理過(guò)程,并對(duì)細(xì)胞活動(dòng)發(fā)揮重要的調(diào)控作用,如免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、**侵襲等。且外泌體具有細(xì)胞類型特異性,即不同細(xì)胞分泌的外泌體的組成成分和功能不同,這使得外泌體具有成為多種疾病早期診斷標(biāo)志物的潛力。此外,外泌體在作為基因和藥物運(yùn)載、**和**生物學(xué)等方面也已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。外泌體存在于人類或動(dòng)物的各種體液中,如細(xì)胞培養(yǎng)上清、血液、尿液等,我們可以選擇不同的樣本來(lái)源進(jìn)行相關(guān)的外泌體研究。不同的實(shí)驗(yàn)樣本采集時(shí)需要注意的地方不一樣,如細(xì)胞培養(yǎng)上清在收集樣本前需換成無(wú)外泌體血清或者無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng),以降低背景值的干擾。翌科生物做外泌體檢測(cè)服務(wù)嗎?研究所做外泌體靠譜
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外泌體的臨床應(yīng)用:1.在疾病診斷中的應(yīng)用潛能:外泌體存在于所有的生物體液中,并由所有細(xì)胞分泌,這使得外泌體在液體活檢中具有吸引力,可用于縱向取樣跟蹤疾病進(jìn)展。外泌體的生物發(fā)生可以捕獲復(fù)雜的細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)分子,可用于***的、多參數(shù)的診斷檢測(cè)。外泌體的表面蛋白也有助于其免疫捕獲和富集。外泌體診斷應(yīng)用的重點(diǎn)疾病包括心血管病、影響***系統(tǒng)的疾病和**。這項(xiàng)努力正在迅速擴(kuò)展到肝臟、腎臟和肺部的其他疾病。2.在疾病***中的應(yīng)用潛能:外泌體向病變細(xì)胞運(yùn)送功能物質(zhì)的特性有利于它們作為***載體。與脂質(zhì)體相比,外泌體的免疫***率低。此外外泌體已被證實(shí)且具有良好的耐受性,無(wú)明顯副作用廣州靠譜的外泌體研究
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