泰州FAM熒光定量PCR儀有哪些

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-08-24

FAM并不是一種特定的熒光定量PCR儀品牌或型號,而是一種在熒光定量PCR中常用的熒光染料。FAM(Fluoresceinamidite)即羧基熒光素,具有高量子產(chǎn)率,在被特定波長的光激發(fā)后會發(fā)出強(qiáng)烈的綠色熒光,其激發(fā)波長通常在495nm左右,發(fā)射波長在520nm左右。由于其熒光特性穩(wěn)定且靈敏,被廣泛應(yīng)用于熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中,作為報(bào)告分子來對目標(biāo)DNA或RNA進(jìn)行定量檢測。很多熒光定量PCR儀都可以使用FAM染料進(jìn)行檢測,例如賽默飛世爾的QuantStudio系列、ABIStepOnePlus等。這些儀器通常配備有能激發(fā)FAM染料發(fā)光的光源以及能檢測其發(fā)射熒光的光學(xué)系統(tǒng)。以QuantStudio?1Plus實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀為例,它配備4種常用的激發(fā)和發(fā)射濾光片,包括FAM、VIC、ROX和Cy5,其激發(fā)光源為白光LED,激發(fā)范圍為455至530nm,可滿足FAM染料的激發(fā)需求。先進(jìn)的數(shù)據(jù)處理算法能去除噪聲、校正漂移,精確分析熒光信號變化,提高檢測靈敏度。泰州FAM熒光定量PCR儀有哪些

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基因表達(dá)分析:可以精確測定不同組織、不同發(fā)育階段以及不同生理狀態(tài)下基因的表達(dá)水平,幫助研究人員了解基因在生物體內(nèi)的功能和調(diào)控機(jī)制。例如,研究胚胎發(fā)育過程中某些關(guān)鍵基因的表達(dá)變化,揭示胚胎發(fā)育的分子機(jī)制?;蚍中停簩魏塑账岫鄳B(tài)性(SNP)等基因變異進(jìn)行分型,用于遺傳疾病的診斷、藥物遺傳學(xué)研究以及生物進(jìn)化分析等。例如,通過檢測個(gè)體在特定基因位點(diǎn)上的 SNP 類型,預(yù)測其對某些藥物的反應(yīng),實(shí)現(xiàn)個(gè)體化用藥。微生物研究:用于對環(huán)境中的微生物進(jìn)行定量分析,了解微生物群落結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化。例如,研究土壤、水體等環(huán)境中微生物的種類和數(shù)量,以及在不同環(huán)境條件下微生物群落的演替規(guī)律,為環(huán)境保護(hù)和生態(tài)研究提供依據(jù)。南通Cy5熒光定量PCR儀廠家直銷擁有高靈敏度的光學(xué)檢測系統(tǒng),能夠精確檢測 TET 等熒光染料發(fā)出的微弱熒光信號,保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

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熒光定量 PCR 儀是一種通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針,對 PCR 產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實(shí)時(shí)監(jiān)測反應(yīng)過程的儀器。工作原理:在 PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè) PCR 進(jìn)程。隨著 PCR 擴(kuò)增的進(jìn)行,每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),熒光信號就會相應(yīng)增加。通過檢測熒光信號的變化,就可以判斷 DNA 的擴(kuò)增情況,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對初始模板的定量分析。常用的熒光化學(xué)物質(zhì)有 TaqMan 熒光探針和 SYBR 熒光染料等。TaqMan 探針法中,探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;PCR 擴(kuò)增時(shí),Taq 酶的 5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號。SYBR Green Ⅰ 法中,SYBR 熒光染料特異性地?fù)饺?DNA 雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的 SYBR 染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加完全同步。

熒光定量 PCR 儀的檢測結(jié)果會受到多種因素的影響,包括儀器設(shè)備、試劑質(zhì)量、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面,以下是具體介紹:樣本處理因素樣本采集:樣本采集的部位、時(shí)間和方法不當(dāng)都可能影響檢測結(jié)果。例如,采集的樣本量不足、未采集到病變部位的細(xì)胞,或者樣本被污染,都可能導(dǎo)致檢測到的目標(biāo)核酸含量不準(zhǔn)確,出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果。核酸提?。汉怂崽崛〉馁|(zhì)量和效率直接關(guān)系到后續(xù)檢測。提取過程中若核酸被降解,會使模板量減少,導(dǎo)致定量結(jié)果偏低。此外,提取的核酸中若含有蛋白質(zhì)、多糖等雜質(zhì),也會抑制 PCR 反應(yīng),影響擴(kuò)增效果和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。核酸濃度和純度:核酸濃度過低會使檢測難度增加;

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核酸測序:在一些測序技術(shù)中,如熒光標(biāo)記的引物測序法,VIC 熒光染料可標(biāo)記在引物或測序反應(yīng)的終止子上。在測序過程中,不同堿基對應(yīng)的熒光標(biāo)記會發(fā)出特定波長的熒光信號,通過檢測這些信號來確定 DNA 序列。VIC 熒光染料的使用有助于提高測序的準(zhǔn)確性和分辨率,尤其在多重測序或高通量測序平臺中,與其他熒光染料配合使用,可實(shí)現(xiàn)對多個(gè)樣本或多個(gè)基因區(qū)域的同時(shí)測序。分子信標(biāo)技術(shù):分子信標(biāo)是一種用于檢測核酸的發(fā)夾狀熒光探針,VIC 熒光染料可標(biāo)記在分子信標(biāo)的莖環(huán)結(jié)構(gòu)上。當(dāng)分子信標(biāo)與目標(biāo)核酸互補(bǔ)結(jié)合時(shí),其莖環(huán)結(jié)構(gòu)打開,熒光染料與淬滅基團(tuán)分離,從而發(fā)出熒光信號。利用 VIC 熒光染料的這種特性,可用于實(shí)時(shí)監(jiān)測核酸的雜交過程、基因表達(dá)分析以及核酸分子的體外轉(zhuǎn)錄和翻譯等研究。與核酸結(jié)合特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好的染料,可減少非特異性信號干擾。泰州Texas Red熒光定量PCR儀廠家供應(yīng)

TET 的激發(fā)波長和發(fā)射波長使其能夠在特定的熒光通道中被準(zhǔn)確檢測到,通常其激發(fā)波長在 520 - 550nm 左右;泰州FAM熒光定量PCR儀有哪些

選擇適合自己的熒光定量 PCR 儀,需要綜合考慮多個(gè)因素,實(shí)驗(yàn)類型:如果是進(jìn)行常規(guī)的基因表達(dá)分析、病原體定量檢測,普通的單通道或多通道熒光定量 PCR 儀即可滿足需求。例如,賽默飛世爾的 QuantStudio 3,適用于基礎(chǔ)的基因表達(dá)和病原體檢測實(shí)驗(yàn)。若是涉及到復(fù)雜的多重 PCR 實(shí)驗(yàn)、SNP 基因分型,則需要選擇具有更多熒光通道、更高分辨率的儀器,如羅氏的 LightCycler 480,可同時(shí)檢測多個(gè)熒光信號,適用于多重分析。通量要求:根據(jù)實(shí)驗(yàn)樣本數(shù)量來選擇。對于樣本量較少的實(shí)驗(yàn),如小型實(shí)驗(yàn)室的科研項(xiàng)目或臨床診斷的少量樣本檢測,96 孔板的熒光定量 PCR 儀就足夠,如伯樂的 CFX96。而對于高通量的檢測需求,如大規(guī)模的基因篩查、藥物研發(fā)中的大量樣本篩選,可能需要選擇 384 孔板的儀器,如 ABI 7900HT,能提高實(shí)驗(yàn)效率,減少實(shí)驗(yàn)成本。泰州FAM熒光定量PCR儀有哪些