熒光定量 PCR 儀是一種通過熒光染料或熒光標記的特異性探針,對 PCR 產(chǎn)物進行標記跟蹤,實時監(jiān)測反應(yīng)過程的儀器。工作原理:在 PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個 PCR 進程。隨著 PCR 擴增的進行,每經(jīng)過一個循環(huán),熒光信號就會相應(yīng)增加。通過檢測熒光信號的變化,就可以判斷 DNA 的擴增情況,進而實現(xiàn)對初始模板的定量分析。常用的熒光化學(xué)物質(zhì)有 TaqMan 熒光探針和 SYBR 熒光染料等。TaqMan 探針法中,探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR 擴增時,Taq 酶的 5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號。SYBR Green Ⅰ 法中,SYBR 熒光染料特異性地摻入 DNA 雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的 SYBR 染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加完全同步。對于一些難以培養(yǎng)或培養(yǎng)周期較長的細菌,熒光定量 PCR 儀可以快速檢測其特定的核酸序列,實現(xiàn)早期診斷。鎮(zhèn)江VIC熒光定量PCR儀型號
熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高特異性和精確定量等特點,被廣泛應(yīng)用于多個行業(yè),以下是一些主要的應(yīng)用行業(yè):農(nóng)業(yè)育種行業(yè)作物基因檢測:用于檢測作物中的轉(zhuǎn)基因成分,確保轉(zhuǎn)基因作物的安全性和合規(guī)性。同時,可對作物的優(yōu)良基因進行篩選和鑒定,如抗病蟲害基因、抗逆基因、質(zhì)量品質(zhì)基因等,加速作物品種改良和選育進程。種子純度鑒定:通過分析種子的 DNA 指紋圖譜,準確鑒定種子的純度和真實性,防止假冒偽劣種子流入市場,保障農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的質(zhì)量和效益。植物病害監(jiān)測:快速檢測植物病原體,如病毒、細菌、等,及時發(fā)現(xiàn)植物病害的發(fā)生和流行趨勢,為制定有效的病害防治措施提供依據(jù),減少農(nóng)作物損失。蘇州Cy5熒光定量PCR儀一般多少錢通過檢測藥物處理后相關(guān)基因表達水平的變化,了解藥物的作用機制,為藥物的篩選和優(yōu)化提供依據(jù)。
熒光定量 PCR 儀的檢測結(jié)果會受到多種因素的影響,包括儀器設(shè)備、試劑質(zhì)量、樣本處理以及實驗操作等方面,以下是具體介紹:引物和探針:引物和探針的特異性、純度及濃度對檢測結(jié)果影響明顯。若引物特異性不好,可能會與非目標序列結(jié)合,產(chǎn)生非特異性擴增,干擾目標基因的定量。探針的質(zhì)量和標記效率也會影響熒光信號的強度和穩(wěn)定性,進而影響檢測的準確性。酶的活性:Taq 酶等聚合酶的活性和穩(wěn)定性是保證 PCR 反應(yīng)順利進行的關(guān)鍵。酶活性過低會導(dǎo)致擴增效率低下,產(chǎn)量不足;而酶的穩(wěn)定性差可能在反應(yīng)過程中失活,使擴增反應(yīng)中斷,影響結(jié)果的重復(fù)性和準確性。反應(yīng)緩沖液:反應(yīng)緩沖液的成分和 pH 值等條件對 PCR 反應(yīng)有重要影響。不合適的緩沖液條件可能影響酶的活性、引物與模板的結(jié)合以及 DNA 的穩(wěn)定性,從而導(dǎo)致擴增效果不佳,檢測結(jié)果不準確。
FAM并不是一種特定的熒光定量PCR儀品牌或型號,而是一種在熒光定量PCR中常用的熒光染料。FAM(Fluoresceinamidite)即羧基熒光素,具有高量子產(chǎn)率,在被特定波長的光激發(fā)后會發(fā)出強烈的綠色熒光,其激發(fā)波長通常在495nm左右,發(fā)射波長在520nm左右。由于其熒光特性穩(wěn)定且靈敏,被廣泛應(yīng)用于熒光定量PCR實驗中,作為報告分子來對目標DNA或RNA進行定量檢測。很多熒光定量PCR儀都可以使用FAM染料進行檢測,例如賽默飛世爾的QuantStudio系列、ABIStepOnePlus等。這些儀器通常配備有能激發(fā)FAM染料發(fā)光的光源以及能檢測其發(fā)射熒光的光學(xué)系統(tǒng)。以QuantStudio?1Plus實時熒光定量PCR儀為例,它配備4種常用的激發(fā)和發(fā)射濾光片,包括FAM、VIC、ROX和Cy5,其激發(fā)光源為白光LED,激發(fā)范圍為455至530nm,可滿足FAM染料的激發(fā)需求。在一些熒光定量 PCR 儀的相關(guān)介紹中會提及對 TET 染料的支持。
杭州柏恒熒光定量Q9600Pro在醫(yī)療機構(gòu)中廣泛應(yīng)用于病原體的檢測、遺傳篩查、傳染病和診斷等領(lǐng)域,發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。其高靈敏度、高準確性和高通量的特點為醫(yī)療人員提供了可靠的檢測工具,幫助他們快速、精細地進行各種臨床檢測和診斷工作。在病原體檢測方面,杭州柏恒Q9600Pro可用于檢測各類細菌、病毒、等病原體的核酸,對于快速診斷性疾病具有重要意義。醫(yī)療機構(gòu)可以利用該儀器進行檢測流感病毒、肺炎支原體、結(jié)核分枝桿菌等病原體,在疾病早期進行準確診斷和及時,有效控制傳染病的傳播。在遺傳篩查方面,杭州柏恒Q9600Pro可用于檢測遺傳性疾病的相關(guān)基因變異,幫助醫(yī)療機構(gòu)進行遺傳咨詢和風(fēng)險評估。通過PCR技術(shù),可以快速準確地篩查出遺傳病患者,為患者提供個性化的方案和遺傳咨詢服務(wù),提高疾病的預(yù)防和水平。在傳染病和診斷方面,杭州柏恒Q9600Pro的高靈敏度和高準確性使其成為臨床診斷的重要輔助工具。醫(yī)療機構(gòu)可以利用該儀器進行各種傳染病的快速檢測,如、毒等,及時進行診斷和。對于診斷,Q9600Pro可用于檢測相關(guān)基因的突變和表達水平,幫助醫(yī)療人員制定個性化的方案,提高患者的生存率和效果。若核酸發(fā)生降解,會導(dǎo)致擴增片段不完整,影響定量準確性,降低檢測靈敏度。泰州EVA-Green熒光定量PCR儀有哪些
TET 熒光定量 PCR 儀配備了高靈敏度的光學(xué)檢測系統(tǒng),包括高性能的激發(fā)光源和高靈敏度的熒光探測器。鎮(zhèn)江VIC熒光定量PCR儀型號
基因表達分析:可以精確測定不同組織、不同發(fā)育階段以及不同生理狀態(tài)下基因的表達水平,幫助研究人員了解基因在生物體內(nèi)的功能和調(diào)控機制。例如,研究胚胎發(fā)育過程中某些關(guān)鍵基因的表達變化,揭示胚胎發(fā)育的分子機制?;蚍中停簩魏塑账岫鄳B(tài)性(SNP)等基因變異進行分型,用于遺傳疾病的診斷、藥物遺傳學(xué)研究以及生物進化分析等。例如,通過檢測個體在特定基因位點上的 SNP 類型,預(yù)測其對某些藥物的反應(yīng),實現(xiàn)個體化用藥。微生物研究:用于對環(huán)境中的微生物進行定量分析,了解微生物群落結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化。例如,研究土壤、水體等環(huán)境中微生物的種類和數(shù)量,以及在不同環(huán)境條件下微生物群落的演替規(guī)律,為環(huán)境保護和生態(tài)研究提供依據(jù)。鎮(zhèn)江VIC熒光定量PCR儀型號