江蘇VIC熒光定量PCR儀廠家直銷

來源: 發(fā)布時間:2025-08-15

熒光定量PCR儀的檢測結(jié)果會受到多種因素的影響,包括儀器設(shè)備、試劑質(zhì)量、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面,以下是具體介紹:儀器設(shè)備因素?zé)嵫h(huán)系統(tǒng):熱循環(huán)的準(zhǔn)確性和均勻性至關(guān)重要。如果熱循環(huán)過程中溫度控制不準(zhǔn)確,如實(shí)際溫度與設(shè)定溫度存在偏差,會導(dǎo)致PCR反應(yīng)效率不穩(wěn)定,影響擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)量和質(zhì)量,進(jìn)而使檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。不均勻的溫度分布會使不同反應(yīng)孔之間的擴(kuò)增效果產(chǎn)生差異,增加實(shí)驗(yàn)誤差。熒光檢測系統(tǒng):熒光檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性直接影響結(jié)果。儀器的光學(xué)部件性能不佳,如激發(fā)光源強(qiáng)度不足、熒光信號收集效率低,可能導(dǎo)致弱熒光信號無法被準(zhǔn)確檢測到,影響對低拷貝數(shù)模板的定量分析。此外,熒光檢測通道之間的串?dāng)_也會干擾信號的準(zhǔn)確測量,造成結(jié)果偏差。TET 熒光定量 PCR 儀配備了高靈敏度的光學(xué)檢測系統(tǒng),包括高性能的激發(fā)光源和高靈敏度的熒光探測器。江蘇VIC熒光定量PCR儀廠家直銷

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以下是判斷熒光定量 PCR 儀光路系統(tǒng)是否需要校準(zhǔn)的方法:熔解曲線異常峰形改變:熔解曲線的峰形變得不規(guī)則、寬化或出現(xiàn)多個峰,而樣品和實(shí)驗(yàn)條件均無變化時,可能是光路系統(tǒng)對熒光信號的檢測精度下降,導(dǎo)致熔解曲線的分析結(jié)果不準(zhǔn)確,此時需要考慮對光路系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)。Tm 值偏移:熔解曲線的 Tm 值(解鏈溫度)與預(yù)期值相比出現(xiàn)明顯偏移,且排除了引物設(shè)計(jì)、反應(yīng)條件等因素的影響,可能是光路系統(tǒng)的熒光檢測存在誤差,影響了對 DNA 雙鏈解鏈過程的準(zhǔn)確監(jiān)測,需要對光路進(jìn)行檢查和校準(zhǔn)。揚(yáng)州熒光熒光定量PCR儀品牌TET熒光定量PCR儀能與多種 PCR 反應(yīng)體系和緩沖液兼容,不影響 PCR 擴(kuò)增效率和特異性。

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熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高特異性和精確定量等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于多個行業(yè),以下是一些主要的應(yīng)用行業(yè):生命科學(xué)研究行業(yè)基因表達(dá)分析:是研究基因表達(dá)調(diào)控的重要工具,可精確測定不同組織、不同發(fā)育階段以及不同生理病理?xiàng)l件下基因的表達(dá)水平,有助于深入了解基因的功能和生物過程的分子機(jī)制?;蚬δ苎芯浚和ㄟ^對基因敲除、過表達(dá)或 RNA 干擾等模型中相關(guān)基因表達(dá)量的定量分析,驗(yàn)證基因的功能,揭示基因之間的相互作用關(guān)系。分子進(jìn)化研究:分析不同物種或同一物種不同個體之間基因

熒光染料法原理:一些熒光染料(如 SYBR Green I)能特異性地結(jié)合到雙鏈 DNA 上。在 PCR 反應(yīng)體系中,隨著 DNA 擴(kuò)增產(chǎn)物的不斷增加,與雙鏈 DNA 結(jié)合的熒光染料也越來越多,熒光信號強(qiáng)度與 PCR 產(chǎn)物的數(shù)量呈正相關(guān)。通過檢測熒光信號的強(qiáng)度變化,就可以實(shí)時監(jiān)測 PCR 反應(yīng)的進(jìn)程。過程:在 PCR 反應(yīng)的每一個循環(huán)中,當(dāng)溫度降低到退火溫度時,引物與模板結(jié)合,DNA 聚合酶開始延伸引物,合成新的 DNA 鏈。此時,熒光染料會結(jié)合到新合成的雙鏈 DNA 上,儀器會在特定的時間點(diǎn)檢測熒光信號的強(qiáng)度。隨著循環(huán)次數(shù)的增加,熒光信號逐漸增強(qiáng),當(dāng)信號強(qiáng)度達(dá)到設(shè)定的閾值時,對應(yīng)的循環(huán)數(shù)被稱為閾值循環(huán)數(shù)(Ct 值)。定量依據(jù):在一定的范圍內(nèi),起始模板量與 Ct 值呈對數(shù)關(guān)系。即起始模板量越多,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)越少,Ct 值越?。环粗?,起始模板量越少,Ct 值越大。通過已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,再根據(jù)待測樣本的 Ct 值,就可以在標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出其對應(yīng)的起始模板量。激發(fā)光源能夠穩(wěn)定且有效地激發(fā) TET 熒光染料,使其發(fā)出足夠強(qiáng)的熒光信號。

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你可能想說的是 “實(shí)時熒光定量 PCR 儀”。實(shí)時熒光定量 PCR 儀是一種用于對核酸進(jìn)行定量分析的儀器,在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。工作原理實(shí)時熒光定量 PCR 儀基于 PCR 技術(shù),在 PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個 PCR 進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析。例如,常用的 SYBR Green I 染料,在游離狀態(tài)下熒光微弱,與雙鏈 DNA 結(jié)合后熒光明顯增強(qiáng),隨著 PCR 產(chǎn)物的合成,熒光信號不斷增加,儀器可實(shí)時檢測到這種變化。反應(yīng)體系配置:配置反應(yīng)體系時,需確保各試劑充分混合均勻,避免局部濃度不均影響反應(yīng)進(jìn)行。南京JOE熒光定量PCR儀有哪些

通過檢測藥物處理后相關(guān)基因表達(dá)水平的變化,了解藥物的作用機(jī)制,為藥物的篩選和優(yōu)化提供依據(jù)。江蘇VIC熒光定量PCR儀廠家直銷

實(shí)時熒光定量 PCR 儀在多個領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用,以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域:作物遺傳育種:在作物遺傳改良中,可用于篩選優(yōu)良基因、鑒定雜種優(yōu)勢以及檢測轉(zhuǎn)基因作物中外源基因的整合和表達(dá)情況。例如,通過檢測與作物抗逆性、產(chǎn)量等相關(guān)基因的表達(dá)水平,篩選出具有優(yōu)良性狀的品種,加快育種進(jìn)程。植物病害檢測:快速檢測植物病原體,如病毒、、細(xì)菌等,及時發(fā)現(xiàn)植物病害,采取相應(yīng)的防治措施,保障農(nóng)作物的產(chǎn)量和質(zhì)量。例如,檢測果樹中的病毒情況,為果樹的病蟲害防治提供依據(jù)。江蘇VIC熒光定量PCR儀廠家直銷