對病毒的全基因組進(jìn)行測序時,生物信息學(xué)起到了不可或缺的作用生存環(huán)境和狀態(tài)決定了對病毒的全基因組進(jìn)行測序的下機(jī)數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點(diǎn),優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫,搭載了的生物信息學(xué)分析流程,可處理復(fù)雜背景下的目標(biāo)物種序列。探普生物基于該特點(diǎn),優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫,專門搭載了生物信息學(xué)分析流程,可處理復(fù)雜背景下的目標(biāo)物種序列。生物信息學(xué)流程主要包括對非目標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行去除以及對目標(biāo)序列進(jìn)行篩選,高質(zhì)量高完整度的序列拼接以及后續(xù)的高級分析,如SNP分析,進(jìn)化分析,耐藥位點(diǎn)分析等。在探普的流程下,可以獲得完整性很高的基因組序列。從事病原流行病學(xué)監(jiān)測和研究的工作者需要將病毒全基因組測序結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù)。深度測序分析診斷
病毒全基因組測序注意事項(xiàng):病毒全基因組測序,測序覆蓋度,基因組被測序得到的堿基覆蓋的比例;測序覆蓋度是反映測序隨機(jī)性的指標(biāo)之一;測序序深度與覆蓋度之間的關(guān)系可以過Lander-WatermanModel(1988)來確定。當(dāng)深度達(dá)到5X時,則可覆蓋基因組的約99.4%以上。通過生物信息手段,分析不同個體基因組間的結(jié)構(gòu)差異,同時完成SNP及基因組結(jié)構(gòu)注釋。DNA突變可誘發(fā)病癥。吸煙過程中所釋放的>60種致病化學(xué)物質(zhì)可與DNA結(jié)合并對DNA鏈上的鳥嘌呤和腺嘌呤進(jìn)行化學(xué)修飾從而產(chǎn)生大的加合物,該加合物改變了DNA雙螺旋的結(jié)構(gòu),如果不被核苷酸剪切修復(fù)或其他的途徑進(jìn)行糾正,那么DNA在復(fù)制時就會按照non-Watson-Crick方式進(jìn)行復(fù)制并阻止RNA聚合酶進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。DNA病毒基因測序分析服務(wù)病毒全基因組測序具有的特點(diǎn):獨(dú)有的一定定量技術(shù),實(shí)現(xiàn)病原定量分析.
病毒的基因重組特點(diǎn)是什么?滅活病毒間也會發(fā)生重組:例如用紫外線滅活的兩株同種病毒,一同培養(yǎng)??墒箿缁畹牟《緩?fù)活產(chǎn)生出侵染性病毒體,此稱為多重復(fù)活(Multiplicityreactivation),這是因?yàn)閮煞N病毒核酸上受損害的基因部位不同,由于重組相互彌補(bǔ)而得到復(fù)活。因此現(xiàn)今不用紫外線滅活病毒制造疫苗,以防復(fù)活。死活病毒間發(fā)生重組:例如將能在雞胚中生長良好的甲型流感病毒(A0或A1亞型)疫苗株經(jīng)紫外線滅活后,再加亞洲甲型(A2亞型)活流感病毒一同培養(yǎng),產(chǎn)生出具有前者特點(diǎn)的A2亞型流感病毒,可供制作疫苗,此稱為交叉復(fù)活。
為了便于新發(fā)或罕見病毒性傳染病的篩查檢測,利用多重置換擴(kuò)增技術(shù),以負(fù)鏈RNA病毒—發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒和正鏈RNA病毒—登革病毒為模擬樣本探索臨床樣本中RNA病毒基因組非特異性擴(kuò)增方法。研究中通過梯度稀釋的RNA病毒模擬樣本中可能存在的不同豐度的病原體,樣本核酸依次加工成單鏈cDNA,雙鏈cDNA,T4DNA連接酶處理后的雙鏈cDNA以及添加外源輔助RNA后合成并連接的雙鏈cDNA形式,然后進(jìn)行Phi29DNA聚合酶等溫?cái)U(kuò)增,使用熒光定量PCR方法比較各種方法對RNA病毒核酸擴(kuò)增的影響。對病毒全基因組進(jìn)行測序,是利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因組序列。
在哪些應(yīng)用場景需要對病毒的全基因組進(jìn)行測序?在探普生物長時間運(yùn)行過程中,我們接觸到的對病毒的全基因組進(jìn)行測序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場景。先,從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時省力省經(jīng)費(fèi),同時能達(dá)到研究目的。此外,有的單位需要對傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對病毒的全基因組進(jìn)行測序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達(dá)到研究或者監(jiān)測疫病的目的。探普生物接觸到的病毒全基因組測序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場景。長沙全基因組測序公司
病毒全基因測序技術(shù)對疾病的致病原進(jìn)行全基因組測序研究,能發(fā)現(xiàn)其中的變異與遺傳情況。深度測序分析診斷
深度測序與個性化醫(yī)學(xué)的范式相比,P4醫(yī)學(xué)更強(qiáng)調(diào)早期預(yù)測和預(yù)防,強(qiáng)調(diào)對患者了解的系統(tǒng)性和參與性。準(zhǔn)確醫(yī)學(xué)的概念則是在基因測序普及的基礎(chǔ)上,將整個個體的各種信息如生理信息(通過可穿戴設(shè)備可以即時監(jiān)控和收集到)和腸道菌群變化、各種組學(xué)信息(深度測序測定)整合,進(jìn)行準(zhǔn)確的疾病分型、調(diào)整和預(yù)防。隨著老年化時代的到來及臨床資源的限制,基于這三種范式的健康管理和準(zhǔn)確診療將成為生物醫(yī)學(xué)研究與應(yīng)用的基本范式,走向大眾生活,正如當(dāng)年的計(jì)算機(jī)發(fā)展歷程一樣,會從原來的大型機(jī)器演變成可移動的小型工具。醫(yī)學(xué)與健康的將來也會隨著深度測序的普及和生物信息學(xué)數(shù)據(jù)處理能力的大幅度提高,而進(jìn)入個性化的大眾管理時代。深度測序分析診斷