RNA/DNA病毒測序?qū)Σ《净蚪M進(jìn)行測序是快速了解病毒突變、毒力變化、病毒型別的有效方法??梢愿鶕?jù)病毒基因組大小和類型,采用PCR、RT-PCR或shotgun測序法,對(duì)病毒的部分或全長基因組測序,結(jié)果準(zhǔn)確可靠。服務(wù)標(biāo)準(zhǔn):測出的序列準(zhǔn)確性在99%以上;病毒全基因組測序測出序列在總基因組大小95%以上;數(shù)小于5個(gè);Shotgun測序的覆蓋度在6以上;PCR和RT-PCR測序達(dá)到2。服務(wù)說明:1、提供病毒DNA或RNA作為樣品。2、PCR測序的DNA樣品總量大于5μg,濃度大于20ng/μl。DNA無降解。3、Shotgun測序法的DNA樣品總量大于20μg,濃度大于100ng/μl。DNA無降解。4、用RT-PCR和PCR測序法在提供參考序列時(shí)需同時(shí)提交樣品部分序列與參考序列的比對(duì)文件,確保同源性在95%以上。
探普生物對(duì)于樣本準(zhǔn)備獨(dú)特的處理方法指南為后續(xù)的分析結(jié)果打下了牢固的基礎(chǔ)。武漢全基因組測序分析方法
能實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序的技術(shù)手段:早期在高通量測序技術(shù)普及之前,對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序是通過非特異性擴(kuò)增+克隆結(jié)合sanger測序來完成的。當(dāng)物種有了參考的序列之后,可以通過特異性擴(kuò)增+sanger測序獲得全基因組序列。Sanger測序準(zhǔn)確度高,讀長很長,但與此同時(shí),擴(kuò)增和克隆工作費(fèi)時(shí)費(fèi)力,由于流程繁瑣,加上快速變異導(dǎo)致引物無法通用,該方法對(duì)于大量基因組的測序工作而言,可操作性不強(qiáng),這對(duì)于研究者一直是一個(gè)困擾。高通量測序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測序和分析,減少了工作量,增加了成功率。探普生物進(jìn)行了大量有針對(duì)性的研發(fā)和測試,開發(fā)了全套的實(shí)驗(yàn)和分析流程用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序,該流程自運(yùn)行以來廣受研究者們好評(píng)。
北京病毒高通量測序分析方法探普生物病毒測序具備回復(fù)消息及時(shí)的優(yōu)點(diǎn)。
病毒基因組測序包括完成圖測序、掃描圖測序和重測序三個(gè)層面,通過二代/三代測序平臺(tái),獲得病毒的基因組的序列信息,并在結(jié)構(gòu)基因組學(xué)、比較基因組學(xué)層面通過差異分析、同源基因分析、共線性分析、物種進(jìn)化分析等手段探究病毒的毒力系統(tǒng)、基因組的進(jìn)化與演變歷程等。對(duì)疑似傳染標(biāo)本采集提取后直接進(jìn)行高通量測序,通過病原微生物數(shù)據(jù)庫比對(duì)和智能化算法分析,獲得疑似致病微生物種屬信息,并提供全方面深入的報(bào)告,為疑難危重傳染提供快速準(zhǔn)確診斷依據(jù),促進(jìn)藥物的合理應(yīng)用。
人類的病毒性傳染很普遍,病毒可以通過呼吸道、消化道、皮膚等多種途徑進(jìn)行傳播,常常會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的公共健康問題,對(duì)人類的健康造成威脅。傳統(tǒng)的病毒檢測方法主要依賴于細(xì)胞培養(yǎng)法、抗原抗體結(jié)合法等,這些方法耗時(shí)久,靈敏度低,往往不能夠滿足臨床檢測需求。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,PCR方法用于病毒檢測的案例越來越多,但該方法的特異性限制了其同時(shí)檢測其它病毒的能力。因此,需要通過新的技術(shù)來實(shí)現(xiàn)。隨著二代測序技術(shù)成本的降低與普及,二代測序在臨床病原體檢測方面的優(yōu)勢也越加突顯。該技術(shù)基于二代測序平臺(tái),可以直接從樣本中獲得病原體的核酸序列信息,再通過生物信息學(xué)的方法對(duì)得到的序列進(jìn)行分析,可以快速地對(duì)樣本中可能存在的全部病原體進(jìn)行鑒定,縮短了臨床檢測的周期。高通量測序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測序和分析.
需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序的應(yīng)用場景:在探普生物長時(shí)間運(yùn)行過程中,我們接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場景。先,從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會(huì)用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個(gè)關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi),同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外,有的單位需要對(duì)傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達(dá)到研究或者監(jiān)測疫病的目的。
探普生物病毒測序具備樣本準(zhǔn)備簡單的優(yōu)點(diǎn)。北京病毒高通量測序分析方法
對(duì)病毒全基因組進(jìn)行測序,是利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因組序列.武漢全基因組測序分析方法
高通量測序在病毒準(zhǔn)種研究中如何應(yīng)用 在采用高通量測序技術(shù)研究準(zhǔn)種耐藥性方面,人類免疫缺陷病毒(HIV)較為突出。人類免疫缺陷病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶有非常大的錯(cuò)配傾向,造成幾乎每復(fù)制1輪出現(xiàn)1個(gè)堿基對(duì)替換突變。被侵染的個(gè)體中存在非常巨大的病毒群,每天有1010個(gè)病毒粒子產(chǎn)生和死亡,在侵染后這種行為導(dǎo)致病毒快速形成一個(gè)多樣性的群,即準(zhǔn)種。高通量測序是研究大群體中序列突變體特征的先進(jìn)方法,它的一種應(yīng)用是對(duì)個(gè)體抗病毒治療失敗時(shí)產(chǎn)生的數(shù)量很少的耐藥突變的定量研究。武漢全基因組測序分析方法