傳統(tǒng)的血清學(xué)與分子生物學(xué)方法如ELISA與PCR,由于病原微生物的特異性差異,有時(shí)只能用于病原微生物特定種甚至特定種特定株系分離物的檢測(cè);而電鏡與生物學(xué)接種鑒定方法又難以將病原微生物鑒定至物種水平。相比之下,高通量測(cè)序技術(shù)可以提供一條新的病原微生物鑒定途徑。病原微生物檢測(cè)的不可知性使得高通量測(cè)序成為研究這類病原微生物的有用工具。目前,該技術(shù)在人類與動(dòng)植物病原微生物的鑒定中已經(jīng)有較多的應(yīng)用。高通量測(cè)序在臨床virology領(lǐng)域的應(yīng)用病毒作為一種古老的物種存在于自然界,幾乎能夠在任何物種寄生,與人類健康息息相關(guān)。雖然大部分病毒沒有出現(xiàn)明顯的臨床癥狀,少數(shù)病毒能夠引起人類多種疾病,表現(xiàn)出包括發(fā)熱、腹瀉、出血、出疹、呼吸道癥狀、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀等。
常用的病毒檢測(cè)方法:植物直接測(cè)定法、指示植物測(cè)定法、血清學(xué)方法。河北未知病原微生物檢測(cè)哪家好
微生物檢測(cè)中含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物。如果在一個(gè)菌落中所有細(xì)胞均來(lái)自于一個(gè)親代細(xì)胞,那么這個(gè)菌落稱為純培養(yǎng)(pureculture)。在進(jìn)行菌種鑒定時(shí),所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。得到純培養(yǎng)的過(guò)程稱為分離純化,方法有許多種。先把微生物懸液通過(guò)一系列稀釋,取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40-50℃左右的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合,然后把這混合液傾注到無(wú)菌的培養(yǎng)皿中,待凝固之后,把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)。單一細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次增殖后形成一個(gè)菌落,取單個(gè)菌落制成懸液,重復(fù)上述步驟數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)物。
隨機(jī)PCR未知病原微生物鑒定微生物檢測(cè)注意事項(xiàng):必須嚴(yán)格把關(guān)是很有必要的。
對(duì)于無(wú)菌藥品生產(chǎn)來(lái)說(shuō),生產(chǎn)區(qū)域的微生物種類非常有限,更具無(wú)菌藥品的具體生產(chǎn)內(nèi)容和過(guò)程,潔凈區(qū)內(nèi)會(huì)有芽孢桿菌占絕大多數(shù)酵母菌、霉菌和葡萄球菌少量存在,放射根瘤菌、苛養(yǎng)顆粒鏈菌等少數(shù)微生物種類。在無(wú)菌藥品生產(chǎn)過(guò)程中,應(yīng)初步建立微生物數(shù)據(jù)庫(kù),建立潔凈區(qū)微生物數(shù)據(jù)庫(kù)是追溯潔凈區(qū)微生物污染來(lái)源的有效方法,有效指導(dǎo)并控制無(wú)菌藥品生產(chǎn)中的污染問題。同時(shí),為防止微生物污染,通過(guò)微生物數(shù)據(jù)庫(kù)并結(jié)合一些常規(guī)方管理法,比如對(duì)污染源及其途徑進(jìn)行了解,并進(jìn)行微生物限度檢查,控制藥品質(zhì)量。注意在潔凈區(qū)的人員數(shù)量應(yīng)控制好,并要求人員具有自我約束的意識(shí)等,從而有效控制潔凈區(qū)微生物。在生產(chǎn)中應(yīng)用微生物鑒定技術(shù)和檢測(cè)設(shè)備向微型化以及多功能化方向發(fā)展,更具有較快的檢測(cè)速度以及更為準(zhǔn)的鑒定結(jié)果。
微生物檢測(cè)基礎(chǔ)知識(shí):微生物檢測(cè)涉及多行業(yè)和領(lǐng)域,在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中有著重要的地位。將微生物接到適于它生長(zhǎng)繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過(guò)程叫做接種。劃線接種這是常用的接種方法。即在固體培養(yǎng)基表面作來(lái)回直線形的移動(dòng),就可達(dá)到接種的作用。常用的接種工具有接種環(huán),接種針等。在斜面接種和平板劃線中就常用此法。三點(diǎn)接種是在研究霉菌形態(tài)時(shí)常用此法。此法即把少量的微生物接種在平板表面上,成等邊三角形的三點(diǎn),讓它各自形成菌落后,來(lái)觀察、研究它們的形態(tài)。除三點(diǎn)外,也有一點(diǎn)或多點(diǎn)進(jìn)行接種的。
生化方法檢測(cè)病原微生物,是測(cè)定微生物特異性酶。
微生物檢測(cè)方法中常用的是平板菌落計(jì)數(shù)法,是根據(jù)每個(gè)活的細(xì)菌能長(zhǎng)出一個(gè)菌落的原理設(shè)計(jì)的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然后將定量的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng),根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù),可算出活菌數(shù)。此法靈敏度高,是一種檢測(cè)污染活菌數(shù)的方法,也是目前國(guó)際上許多國(guó)家所采用的方法。使用該法應(yīng)注意:①一般選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),過(guò)多或過(guò)少均不準(zhǔn)確;②為了防止菌落蔓延,影響計(jì)數(shù),可在培養(yǎng)基中加入0.001%的2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。普遍應(yīng)用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細(xì)菌檢驗(yàn),是很常用的微生物檢測(cè)方法。微生物鑒定的傳統(tǒng)的鑒定方法普遍使用。廣州未知病原微生物鑒定技術(shù)
未知病原微生物中有很多微生物通過(guò)傳統(tǒng)技術(shù)是無(wú)法鑒別的。河北未知病原微生物檢測(cè)哪家好
微生物檢測(cè)崗位的主要職責(zé):1.負(fù)責(zé)產(chǎn)品無(wú)菌檢查、微生物限度檢查、細(xì)菌內(nèi)檢查、支原體及外源病毒的分析方法開發(fā)、驗(yàn)證;2.對(duì)產(chǎn)品及環(huán)境實(shí)施無(wú)菌檢查、微生物限度檢查、細(xì)菌內(nèi)檢查;3.對(duì)原輔料、內(nèi)包材、工藝用水等實(shí)施微生物限度、細(xì)菌內(nèi)檢查;4.對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室的試劑、耗材、儀器等實(shí)施日常管理;5.對(duì)實(shí)驗(yàn)室菌種管理、進(jìn)行培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)試驗(yàn)、無(wú)菌試驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn);6.進(jìn)行潔凈區(qū)日常環(huán)境監(jiān)控及無(wú)菌區(qū)人員更衣確認(rèn);7.對(duì)關(guān)鍵檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行定期的趨勢(shì)分析;8.完成上級(jí)安排的其他事宜。
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