動(dòng)物模型名稱:皮膚淺II°及深I(lǐng)I°燙傷大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:160-200g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法:熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠,根據(jù)體重腹部備皮,然后固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯,將紗布條浸入熱水中,待水溫恒定于99℃時(shí),取出紗布,立即平鋪于待燙部位,于紗布接觸大鼠皮膚后開始計(jì)時(shí)。致傷3s為淺II°燙傷,致傷10s為深I(lǐng)I°燙傷。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):a.皮膚大體觀察:致傷3s大鼠局部皮膚發(fā)紅、輕微水腫。愈合后毛發(fā)生長(zhǎng)良好,有少量紅褐**素沉著,皮膚輕微攣縮,表皮光滑;致傷10s大鼠局部皮膚發(fā)白、水腫。愈合后毛發(fā)生長(zhǎng)良好,皮膚瘢痕形成,表面粗糙不平。上海東寰提供動(dòng)物模型構(gòu)建過程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。揚(yáng)州疾病動(dòng)物模型建模
誘發(fā)性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細(xì)胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長(zhǎng)和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化學(xué)性、物理性及生物性致*物,而化學(xué)性致*物(chemicalcarcinogens)**常見,已確知的多達(dá)一千余種,用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性**的種類亦很多,如苯并薩,申基膽菌、聯(lián)苯胺、亞硝胺類、黃曲霉***類。各種致癢物的致*強(qiáng)度、致*譜等特性相差較大,同一種致*物經(jīng)不同途徑給藥所致**部位或類型可有很大差異。有些化學(xué)性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此,實(shí)驗(yàn)工作中應(yīng)根據(jù)需要選用適當(dāng)致*物和致*途徑,并確定其他影響因素或?qū)嶒?yàn)條件?;驹?利用外源性致*物引起細(xì)胞遺傳特性改變,從而出現(xiàn)異常生長(zhǎng)和高增殖活性細(xì)胞形成**。外源性致*物主要有化學(xué)性、物理性(如放射性物質(zhì))及生物性(如誘發(fā)動(dòng)物**的病毒),其中以化學(xué)性致*物**為常用揚(yáng)州疾病動(dòng)物模型建模動(dòng)物疾病模型的另一個(gè)富有成效的用途。
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過順鉑注射后卵巢重量相比對(duì)照組,都有不同程度縮減,其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p<),4mg、6mg組無明顯差異。表5④動(dòng)情周期觀察(陰道涂片):3mg組動(dòng)物死亡時(shí)間早,無完整的動(dòng)情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動(dòng)情周期4-5天。分為四個(gè)階段,動(dòng)情前期:撇圓形有核上皮細(xì)胞占絕大多數(shù),白細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖a)。動(dòng)情期:角化上皮細(xì)胞占多大多數(shù),由散在增至集白細(xì)胞和有核上皮細(xì)胞很少(圖b)。動(dòng)情后期:片狀角化上皮細(xì)胞,有核上皮細(xì)胞和白細(xì)胞3種都有,無太大差異(圖c)。動(dòng)情間期:白細(xì)胞占絕大多數(shù),有核上皮細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖d)。表6⑤病理結(jié)果:如圖7所示
為了減少擴(kuò)增突變的引入,推薦使用高保真PCRMix進(jìn)行擴(kuò)增,推薦使用預(yù)線性化的質(zhì)粒作為模板,以減少環(huán)狀質(zhì)粒模板殘留對(duì)克隆陽性率的影響。注意:以環(huán)狀質(zhì)粒為模板時(shí),PCR產(chǎn)物需要使用DpnI等甲基化敏感型限制性內(nèi)切酶對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行處理,或?qū)Ξa(chǎn)物進(jìn)行膠回收純化。2.插入片段制備引物設(shè)計(jì)原則:通常使用PCR擴(kuò)增的方法來獲得目的片段,PCR引物的5端必須包含與其相鄰片段(插入片段或載體)末端同源的15~25nt(推薦18nt)序列,以保證擴(kuò)增產(chǎn)物的5端和3端分別與相鄰片段形成重疊序列。目的片段PCR引物包括:載體與插入片段連接處引物、插入片段與片段連接處引物。插入片段正向擴(kuò)增引物:5—上游載體末端正向同源序列+酶切位點(diǎn)(可選)+基因特異性正向擴(kuò)增序列—3’插入片段反向擴(kuò)增引物:3‘—基因特異性反向擴(kuò)增序列+酶切位點(diǎn)(可選)+下游載體末端反向同源序列—5’載體與插入片段、插入片段與片段連接處引物、載體反向擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)制作終序列圖譜引物設(shè)計(jì)工具1.在線設(shè)計(jì)更加專業(yè),這款軟件用來繪制圖譜,編輯序列,設(shè)計(jì)引物,重組克隆都非常方便3.無縫克隆1、體系配制;a.適載體用量(ng)=×載體堿基對(duì)數(shù),即pmol(單片段、多片段適用);b.適片段用量。開展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步結(jié)果與生物學(xué)信息資料等相關(guān)知識(shí)間的差距!
實(shí)驗(yàn)第21天起將小鼠置于霧化激發(fā)器內(nèi),給予2%OVA生理鹽水霧化激發(fā),1次/d,每次30min,連續(xù)7天,將小鼠呼吸急促,搔鼻抓癢、嗆咳煩躁、點(diǎn)頭運(yùn)動(dòng)等作為小鼠模型成功的標(biāo)準(zhǔn)。正常對(duì)照組以生理鹽水代替OVA腹腔注射和霧化激發(fā),操作同上所述。6.2模型鑒定及后續(xù)檢測(cè):6.2.1小鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)TH2型細(xì)胞因子蛋白水平檢測(cè)待造模完成后,抽取BALF后用ELISA方法檢測(cè)其中TSLP、IL-33和MUC5AC的表達(dá)情況。附支氣管肺泡灌洗液抽取方法:小鼠取血后,開胸,分離縱膈,注射器抽取3ml生理鹽水從氣管插管推入肺中,每次反復(fù)灌洗3次后抽出灌洗液,肺泡灌洗液以4℃3000r/min離心15min,取上清。結(jié)果顯示:模型小鼠與對(duì)照組小鼠相比,炎性因子及趨化因子水平均有性升高。上海東寰為您提供完善的大鼠動(dòng)物疾病模型。哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模價(jià)格
早期階段科學(xué)假說與疾病潛在藥物治療效果評(píng)價(jià)始于小鼠疾病模型構(gòu)建及其實(shí)驗(yàn)室研究。揚(yáng)州疾病動(dòng)物模型建模
pirb在軸突生長(zhǎng)錐表達(dá),位于富含肌動(dòng)蛋白的前緣和synapsin免疫陽性的囊泡中,在神經(jīng)元突起的表達(dá)呈點(diǎn)狀分布。文獻(xiàn)表明,pirb表達(dá)隨年齡增加,特別是在老齡認(rèn)知損傷的小鼠海馬中,pirb能夠抑制軸突再生和突觸可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚體對(duì)海馬長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)的破壞作用需要pirb的參與,在ad轉(zhuǎn)基因模型中,pirb不僅參與成年小鼠記憶缺失,而且介導(dǎo)幼年小鼠視皮層突觸可塑性的丟失。這些研究提示我們,pirb參與突觸可塑性,抑制pirb可能對(duì)ad起到效應(yīng)。揚(yáng)州疾病動(dòng)物模型建模