在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 則是提升PCR特異性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)技術(shù)和熒光染料,為效率、準(zhǔn)確的基因擴(kuò)增提供了強(qiáng)大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Hot-Start Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs、增強(qiáng)劑以及熒光染料。其優(yōu)點(diǎn)在于熱啟動(dòng)技術(shù)的應(yīng)用。通過(guò)在常溫下抑制Taq酶活性,該預(yù)混液有效避免了非特異性擴(kuò)增和引物二聚體的形成,從而提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。這種特性尤其適用于復(fù)雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴(kuò)增,以及對(duì)特異性要求較高的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。熒光染料的加入是該預(yù)混液的另一大亮點(diǎn)。這種染料在PCR過(guò)程中能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)DNA的擴(kuò)增情況,通過(guò)熒光信號(hào)的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。這種“即用型”預(yù)混液不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,還減少了人為操作帶來(lái)的污染風(fēng)險(xiǎn),尤其適合高通量的基因檢測(cè)和定量分析。此外,該預(yù)混液的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。Endo H 相對(duì)比較嬌貴,需要在特定的條件下保存才能保持其活性,一般需要在 - 20℃或更低溫度下保存。畢赤酵母表達(dá)重組腸激酶
One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus):高效、特異且防污染的RNA定量檢測(cè)解決方案One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus) 是一種為RNA模板設(shè)計(jì)的一步法實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)試劑盒,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料和UDG防污染系統(tǒng),能夠在同一反應(yīng)管中完成逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng),操作簡(jiǎn)便且高效。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性:采用優(yōu)化的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合SYBR Green I染料,能夠高效檢測(cè)低豐度RNA模板,同時(shí)減少非特異性擴(kuò)增。UDG防污染系統(tǒng):含有dUTP和UDG酶,可在反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止氣溶膠污染。操作簡(jiǎn)便:逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng)在同一管中完成,減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)。兼容性強(qiáng):適用于多種qPCR儀器,支持快速反應(yīng)程序。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。病毒檢測(cè):適用于RNA病毒的快速檢測(cè),如流感病毒、病毒等。高通量樣本分析:適合多樣本的單基因檢測(cè)。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus) 以其高效、特異和防污染的特點(diǎn),成為分子生物學(xué)研究和臨床檢測(cè)中的重要工具,尤其適用于需要快速、準(zhǔn)確檢測(cè)RNA樣本的場(chǎng)景。Recombinant Human SFRP1/SARP2 Protein,His Tag由于Pfu DNA Polymerase 對(duì)引物的質(zhì)量要求較高,使用純度高的引物可以減少由于引物錯(cuò)誤導(dǎo)致的非目標(biāo)突變。
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 則是提升PCR特異性和效率的關(guān)鍵試劑。這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)技術(shù)和優(yōu)化的反應(yīng)體系,為準(zhǔn)確的基因擴(kuò)增提供了強(qiáng)大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含了Hot-Start Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs以及增強(qiáng)劑。其優(yōu)點(diǎn)在于熱啟動(dòng)技術(shù)的應(yīng)用。通過(guò)在常溫下抑制Taq酶活性,該預(yù)混液有效避免了非特異性擴(kuò)增和引物二聚體的形成,從而提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。這種特性尤其適用于復(fù)雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴(kuò)增,以及對(duì)特異性要求較高的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。此外,該預(yù)混液不含染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更大的靈活性。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測(cè)方法,例如凝膠電泳分析、DNA測(cè)序或克隆。這種無(wú)染料設(shè)計(jì)也使得預(yù)混液適用于多種下游應(yīng)用,而不會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生干擾。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。這種效率、便捷的特性使其成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的理想選擇。
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過(guò)程中能夠快速延伸引物,同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來(lái),科學(xué)家們通過(guò)對(duì)Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開(kāi)發(fā)出多種突變體,以滿(mǎn)足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開(kāi)發(fā)新型的多重PCR檢測(cè)技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡(jiǎn)化了DNA擴(kuò)增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測(cè)和個(gè)性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)的無(wú)染料配方為實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)提供了更大的靈活性從而獲得更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 是一種來(lái)源于嗜冷海洋細(xì)菌的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。該酶能夠特異性地催化水解含有尿嘧啶的DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,并在DNA中產(chǎn)生無(wú)堿基位點(diǎn)(AP位點(diǎn)),從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點(diǎn)與傳統(tǒng)UDG酶相比,熱敏UDG酶在室溫下即可高效發(fā)揮作用,且對(duì)溫度極為敏感,可在50℃下10分鐘內(nèi)完全失活。這種特性使其在PCR和RT-PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場(chǎng)景。此外,該酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對(duì)RNA或不含尿嘧啶的DNA無(wú)作用。其高純度和低殘留特性使其在高投入量下也不會(huì)對(duì)檢測(cè)體系產(chǎn)生抑制。應(yīng)用場(chǎng)景去除PCR產(chǎn)物污染:通過(guò)降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反應(yīng)中,熱敏UDG酶可在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在使用過(guò)程中,建議將酶液存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后立即放回-20℃保存。此外,熱敏UDG酶在RT-qPCR反應(yīng)中表現(xiàn)出良好的兼容性,即使在高投入量下也不會(huì)對(duì)反應(yīng)產(chǎn)生抑制。Phusion DNA Polymerase廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)研究中,尤其是在需要高保真度和快速擴(kuò)增的場(chǎng)景中。Recombinant Human SFRP1/SARP2 Protein,His Tag
Ultra-Long DNA Polymerase能夠擴(kuò)增包含多個(gè)外顯子的長(zhǎng)基因片段,有助于揭示疾病的分子機(jī)制。畢赤酵母表達(dá)重組腸激酶
在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)已成為基因表達(dá)分析、病毒檢測(cè)和基因定量的重要工具。其中,One Step RT-qPCR SYBR Green Kit憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),成為眾多科研工作者的優(yōu)先試劑盒。簡(jiǎn)化操作流程,降低污染風(fēng)險(xiǎn)One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用一步法反應(yīng)體系,將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在同一反應(yīng)管中完成。這種設(shè)計(jì)不僅簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作步驟,減少了人為誤差,還有效降低了因反復(fù)開(kāi)蓋導(dǎo)致的樣品污染風(fēng)險(xiǎn)。例如,傳統(tǒng)的兩步法需要分別進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng),操作復(fù)雜且污染風(fēng)險(xiǎn)較高,而一步法試劑盒則避免了這些問(wèn)題。高靈敏度與高特異性該試劑盒使用高效的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖體系,能夠顯著提高反應(yīng)的靈敏度和特異性。其檢測(cè)靈敏度可達(dá)極低濃度的RNA樣本,例如在某些實(shí)驗(yàn)中,即使RNA濃度低至0.1 pg,也能實(shí)現(xiàn)精細(xì)檢測(cè)。此外,試劑盒中添加了抑制非特異性擴(kuò)增的組分,確保熔解曲線(xiàn)呈現(xiàn)單峰,進(jìn)一步提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。畢赤酵母表達(dá)重組腸激酶