Recombinant Human MUC18/CD146 Protein

BstDNAPolymerase,LargeFragment（嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶大片段）是一種常用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的酶，特別是在等溫DNA擴(kuò)增技術(shù)中。以下是一些關(guān)于BstDNAPolymerase,LargeFragment的關(guān)鍵信息：1.**來(lái)源**：這種酶來(lái)源于嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillusstearothermophilus），是一種熱穩(wěn)定的DNA聚合酶。2.**活性**：BstDNAPolymerase,LargeFragment具有5'到3'的DNA聚合酶活性，并且具有鏈置換活性，這使得它能夠用于等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)，如環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）。3.**熱穩(wěn)定性**：由于其嗜熱特性，BstDNAPolymerase,LargeFragment能夠在較高的溫度下保持活性，通常在60-65°C。4.**應(yīng)用**：-**等溫?cái)U(kuò)增**：用于LAMP和其他等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，這些技術(shù)不需要傳統(tǒng)的熱循環(huán)儀。-**全基因組擴(kuò)增**：用于快速擴(kuò)增少量DNA樣本，以進(jìn)行進(jìn)一步的分析。-**突變檢測(cè)**：在某些情況下，用于檢測(cè)特定基因的突變。5.**優(yōu)點(diǎn)**：-**高保真度**：與某些其他DNA聚合酶相比，BstDNAPolymerase,LargeFragment具有較高的保真度。-**快速擴(kuò)增**：等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)可以在短時(shí)間內(nèi)快速產(chǎn)生大量DNA。Multiplex Probe qPCR Mix 已預(yù)混了低濃度ROX參比染料，適用于需要低濃度ROX校正的熒光定量PCR儀 。Recombinant Human MUC18/CD146 Protein,His Tag

T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因編輯中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在突變體檢測(cè)和基因編輯效率評(píng)估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具體應(yīng)用步驟和特點(diǎn)：1.**基因編輯效率評(píng)估**：-T7EI用于評(píng)估CRISPR-Cas9在給定的導(dǎo)向RNA靶位點(diǎn)上對(duì)細(xì)胞群體進(jìn)行基因編輯的效率。-通過(guò)PCR擴(kuò)增圍繞CRISPR導(dǎo)向RNA靶位點(diǎn)的基因組DNA，如果CRISPR-Cas9介導(dǎo)的非同源末端連接（NHEJ）修復(fù)事件引入了突變，變性和退火將形成突變型和野生型PCR擴(kuò)增子的異源雙鏈DNA。2.**突變體檢測(cè)**：-如果CRISPR/Cas9編輯成功在DNA上引入突變，則可與野生型DNA片段退火產(chǎn)生異質(zhì)雙鏈DNA。T7EI可以識(shí)別該DNA上的不完全配對(duì)的DNA位點(diǎn)然后進(jìn)行雙鏈切割，通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳即可顯示酶切后的條帶，從而半定量判定基因編輯效果。-T7EI能識(shí)別長(zhǎng)度大于或等于2bp的插入、缺失或突變導(dǎo)致的錯(cuò)配DNA，不能識(shí)別1bp的插入、缺失或突變。3.**實(shí)驗(yàn)步驟**：-收集細(xì)胞并提取基因組DNA，然后使用PCR擴(kuò)增期望編輯的基因組區(qū)域。擴(kuò)增子的長(zhǎng)度建議為0.5-1kb。-對(duì)擴(kuò)增的DNA進(jìn)行變性和退火復(fù)性，以產(chǎn)生異質(zhì)雙鏈DNA。-使用T7EI酶處理退火后的DNA產(chǎn)物，在37℃孵育15分鐘。

磁珠法病毒RNA/DNA抽提試劑盒是一種高效、便捷的工具，適用于從各種生物樣本中提取病毒核酸。以下是一些相關(guān)產(chǎn)品的信息和特點(diǎn)：1.**德諾優(yōu)品病毒DNA/RNA提取試劑盒**：-采用自主磁珠純化技術(shù)，適合從血漿、血清等樣本中分離純化病毒的DNA或RNA。-操作簡(jiǎn)單，整個(gè)過(guò)程可在12-25分鐘內(nèi)完成，提取的核酸可直接用于下游應(yīng)用，如PCR和NGS等。-提取的核酸純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，適合低拷貝數(shù)的病毒檢測(cè)。2.**MolPure®磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**：-適用于從全血、血清、腦脊液等樣本中提取病毒核酸。-無(wú)需使用有毒的酚氯仿，安全快捷，提取過(guò)程可在40分鐘內(nèi)完成。-提取的產(chǎn)物可直接用于PCR、qPCR等實(shí)驗(yàn)。3.**FineMag快速磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**：-適合從全血、唾液、拭子等樣本中純化高質(zhì)量病毒核酸，提取過(guò)程只需13分鐘。-無(wú)需使用有毒的化學(xué)試劑，操作安全便捷。4.**MagMAX病毒RNA/DNA提取試劑盒**：-適用于從全血、血清、口腔液等樣本中提取病毒核酸。-該試劑盒支持高通量提取，適合自動(dòng)化操作，提取效率高，適合直接用于PCR和RT-PCR。

在PCR實(shí)驗(yàn)中，為了避免引物與已知序列的交叉反應(yīng)，從而確保實(shí)驗(yàn)的特異性，以下是一些關(guān)鍵的引物設(shè)計(jì)原則和策略：1.**選擇高保守性區(qū)域**：引物比較好設(shè)計(jì)在模板cDNA的保守區(qū)內(nèi)，這樣可以確保引物與目標(biāo)序列的特異性結(jié)合。通過(guò)比較不同物種的同一基因序列，可以確定基因的保守區(qū)。2.**避免引物與非目標(biāo)序列的同源性**：設(shè)計(jì)引物時(shí)，應(yīng)避免與基因組中的重復(fù)序列、假基因或高同源性區(qū)域設(shè)計(jì)引物。可以通過(guò)BLAST等工具對(duì)引物進(jìn)行同源性分析，確保引物只與目標(biāo)序列結(jié)合。3.**引物長(zhǎng)度和GC含量**：引物長(zhǎng)度一般在15-30堿基之間，常用的是18-27bp。GC含量一般為40%-60%，以45-55%為宜。過(guò)高或過(guò)低的GC含量都不利于引發(fā)反應(yīng)，上下游引物的GC含量和Tm值應(yīng)保持接近。4.**避免引物的3'端錯(cuò)配**：引物3'端的堿基應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，特別是倒數(shù)第二個(gè)堿基，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。引物3'端比較好不要選擇A，比較好選擇T，因?yàn)楫?dāng)末位鏈為T(mén)時(shí)，錯(cuò)配的引發(fā)效率降低。5.**避免引物自身及引物之間的互補(bǔ)序列**：引物自身不應(yīng)存在互補(bǔ)序列，否則引物自身會(huì)折疊成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，影響引物與模板的復(fù)性結(jié)合。前后引物之間也不應(yīng)具有互補(bǔ)性，尤其應(yīng)避免3'端的互補(bǔ)重疊以防止引物二聚體的形成。在基因編輯中，Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或編輯工具的克隆，減少克隆過(guò)程中的非目標(biāo)突變。

嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶I（BstDNAPolymeraseI）和它的大片段（LargeFragment）是兩種在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的酶。它們的主要區(qū)別在于結(jié)構(gòu)和活性：1.**結(jié)構(gòu)**：-完整的BstDNAPolymeraseI包含一個(gè)5'→3'的核酸外切酶活性區(qū)域，而大片段是通過(guò)基因工程改造或蛋白酶處理去掉了這個(gè)外切酶活性區(qū)域的酶。因此，大片段沒(méi)有5'→3'的核酸外切酶活性，但保留了5'→3'的DNA聚合酶活性。2.**活性**：-BstDNAPolymeraseI具有5'→3'的核酸外切酶活性，這意味著它在合成DNA的同時(shí)可以“校對(duì)”錯(cuò)誤，切除不匹配的核苷酸。而大片段由于缺少外切酶活性區(qū)域，不具有這種校對(duì)能力。-大片段具有更強(qiáng)的鏈置換能力，這使得它非常適合于等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)，如環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）和滾環(huán)擴(kuò)增（RCA）。3.**應(yīng)用**：-BstDNAPolymeraseI由于具有校對(duì)功能，可能更適合于需要高保真度的DNA合成反應(yīng)。-BstDNAPolymerase,LargeFragment由于其鏈置換能力，更適合于等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，這些技術(shù)不需要熱循環(huán)儀，可以在恒定溫度下進(jìn)行DNA擴(kuò)增。4.**熱穩(wěn)定性**：-BstDNAPolymerase,LargeFragment通常在65°C左右的溫度下進(jìn)行反應(yīng)，而B(niǎo)stDNAPolymeraseI可能具有更寬的反應(yīng)溫度范圍。泛素激起酶E1（Ubiquitin-activating enzyme E1）在A(yíng)TP的存在下激發(fā)泛素分子，形成E1-泛素硫酯中間體。Recombinant Mouse TMEM106B Protein,hFc Tag

UBE2L3作為泛素化途徑中的關(guān)鍵酶，其在蛋白質(zhì)降解、信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞周期控制等重要內(nèi)容有著作用。Recombinant Human MUC18/CD146 Protein,His Tag

磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒是一種利用磁性納米顆粒固相核酸富集技術(shù)來(lái)純化質(zhì)粒DNA的產(chǎn)品。它通常包括高性能納米磁珠和獨(dú)特的緩沖體系組合，通過(guò)裂解菌體后釋放的DNA，能夠有效地結(jié)合于磁珠表面，漂洗除雜后獲得高質(zhì)量的目的質(zhì)粒。以下是磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒的一些主要特點(diǎn)和應(yīng)用：1.**快速簡(jiǎn)便**：操作步驟簡(jiǎn)單，無(wú)需多次離心，整個(gè)抽提過(guò)程通常只需20-25分鐘。2.**高得率和純度**：可以從1-5ml新鮮大腸桿菌菌液中分離純化2-20μg高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA。純化得到的DNA質(zhì)量高，完整性好，OD260/280比值一般為1.8~1.9之間，OD260/230比值大于2.0。3.**適用性廣**：適用于1-5mL小體積高通量菌液質(zhì)粒抽提，且抽提所得的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、測(cè)序、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等各種下游分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。4.**自動(dòng)化兼容**：可整合移液法自動(dòng)化儀器和磁棒法自動(dòng)化儀器進(jìn)行高通量提取實(shí)驗(yàn)。5.**安全性高**：操作過(guò)程中不涉及酚/氯仿等有毒試劑，更加環(huán)保和安全。6.**成本效益**：相比傳統(tǒng)的離心柱法，磁珠法可以減少離心次數(shù)，獲得完整性更好的質(zhì)粒，且操作更為簡(jiǎn)便快捷。7.**操作靈活**：磁珠的使用量可靈活調(diào)節(jié)，適合不同體積和濃度的樣品處理。Recombinant Human MUC18/CD146 Protein,His Tag