第二,數(shù)據(jù)庫的建立。盡管當前空間轉錄組的數(shù)據(jù)在快速地增長,但尚未有對應的數(shù)據(jù)庫來對這些數(shù)據(jù)進行匯總集成。第三,研究物種及組織的多樣化。在當前時代,除 LCM 之外,研究的***主要集中于人類和小鼠的大腦,而其他***(例如肝臟)的空間轉錄組學研究相對滯后。對除人類和小鼠以外的其他生物以及除大腦以外的其他***的技術現(xiàn)代化,將為開發(fā)有用的空間轉錄組學地圖集提供廣闊的前景。第四,集成度高、交互性強、易擴展、文檔信息完善的開源工作流程的開發(fā)。該類工具的開發(fā)將簡化不同類型空間轉錄組學數(shù)據(jù)的整合和分析??臻g轉錄組是一種用于從空間層面上解析RNA-seq數(shù)據(jù)的技術,從而解析單個組織切片中的所有mRNA。品質空間轉錄組使用
和單細胞轉錄組一樣,空間轉錄組也可以進行細胞間通訊分析,區(qū)別在于空間位置信息可以同時用于識別潛在的細胞間相互作用。通常通過了解配體受體(LR)對并測試 LR 對是否更有可能在鄰近細胞或 spot 中表達來完成。還有很多其他類型的分析可用于空間轉錄組學數(shù)據(jù),包括基因模式的識別,空間區(qū)域的轉錄組定義, 基因間的相互作用推斷,轉錄本的亞細胞定位以及基于H&E圖像的基因表達估算等。1. 歐易生物具有上百例空間轉錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過質量的服務,助力各位科研工作者取得新的突破。甘肅空間轉錄組是什么如何通過“HE染色”判斷空間轉錄組項目樣本是否為“好的樣本”呢?
許多當前時代空間轉錄組技術的基礎都是在自七十年代以來的幾十年間建立的。例如,于1976 年首先使用紫外線激光來切割組織。當前流行的技術,例如空間轉錄組學(ST)和 10X Visium 依靠這種微陣列技術,區(qū)別就在于是從放置在微陣列載玻片上的組織上而不是從溶液中來捕獲轉錄本信息。當前時代的空間轉錄組技術大致分為五類方向:激光顯微切割(LCM),單分子熒光原位雜交(smFISH),靶向原位測序(ISS),原位陣列捕獲和 其他非成像技術。
空間轉錄組的一般流程2。這使得在后續(xù)步驟中覆蓋細胞組織圖像和基因表達數(shù)據(jù)成為可能。用我們的滲透試劑對組織進行滲透,這意味著在細胞膜上形成小孔。RNA分子可以通過這些通道離開細胞,并與芯片上相鄰的捕獲探針結合。因此,基因表達信息被捕獲在芯片上。需要通過以下步驟將捕獲的RNA分子中存儲的信息轉換為數(shù)據(jù)。cDNA合成是為了創(chuàng)造穩(wěn)定的雙鏈DNA分子。這是必要的,因為cdna - rna -雜交體的降解速度很快。此外,這是構建可測序文庫之前的必要步驟。所有之前收集的信息都被匯集起來,可以在線訪問。這意味著在實踐中,您可以查看組織切片的圖像并選擇組織中的不同區(qū)域。然后你可以確定哪些基因在這些區(qū)域中以什么數(shù)量表達。因此,你可以在一個單一的實驗中進行新分析。作者通過對三個人類腦皮層組織的空間轉錄組測序,可評估不同腦皮層區(qū)域中基因表達特征和細胞類型定位情況。
如果只是通過空間轉錄組或者單細胞轉錄組,研究人員在兩個樣本中均可以發(fā)現(xiàn)淋巴細胞相關基因或者淋巴細胞群,無法解釋兩個樣本預后之間的差異。但是通過空間轉錄組,就能很清晰看到兩個樣本之間的差異。作者借助空間轉錄組測序技術探究人類心臟在發(fā)育過程中的基因表達特征和細胞圖譜變化,發(fā)現(xiàn)對于每個發(fā)育階段的不同解剖區(qū)域,都有獨特的基因表達特征。結合單細胞轉錄組測序技術,作者進一步確定和豐富了胚胎心臟基因表達的空間注釋信息。 scRNA-seq 技術的進步啟發(fā)了利用高分辨率轉錄組定量分析與空間轉錄組學數(shù)據(jù)的互補性質的新方法。江蘇空間轉錄組有什么用
空間轉錄組避免了組織中細胞位置信息的丟失。品質空間轉錄組使用
空間轉錄組的方法和技術有哪些?廣義上講,現(xiàn)有的生成空間分辨轉錄組學的方法可分為四類:用于空間重建的計算策略和組學實驗的組合,使用激光捕獲顯微切割(LCM)結合高通量進行直接測量,使用熒光物質的基于圖像的原位轉錄組學 ,以及基于寡核苷酸的空間條形碼再加上高通量。每種方法都有其優(yōu)點和缺點??臻g重構的計算策略:這種計算方法可以充分利用內在基因表達模式或共表達的趨勢,從單個細胞的大量轉錄組數(shù)據(jù)中重構細胞間的環(huán)境。然而,這些推論方法在某些情況下*呈現(xiàn)空間趨勢或特定組織的總體布局?;贚CM的方法:基于LCM的轉錄組學或基因組學成功地獲得了單個細胞的空間轉錄組,盡管其通量很低,但是在可以標記成千上萬個單個細胞位置的多路復用條形碼策略可行之前,將少量細胞的數(shù)據(jù)粗略地整合到構成***的巨大背景中,可能具有一定價值。基于圖像的原位轉錄組學:基于圖像的原位轉錄組學在很大程度上增加了可檢測區(qū)域,但也存在一些問題,例如幾種smFISH方法很難從包括信號干擾、轉錄本積累等復雜背景中提取單個細胞??臻g條形碼加高通量:費用較高且無法在單個細胞中獲得轉錄組。品質空間轉錄組使用
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