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盡管用于化妝品評(píng)價(jià)的創(chuàng)新模型和技術(shù)在不斷發(fā)展,但無論是斑馬魚模型、體外細(xì)胞模型還是皮膚器官芯片等均不能完全模擬體內(nèi)皮膚的真實(shí)結(jié)構(gòu)與功能,這使得離體皮膚評(píng)價(jià)模型逐漸進(jìn)入人們的視野。離體皮膚也被稱為皮膚外植體,它是由人體來源的皮膚組織經(jīng)體外培養(yǎng)而獲得的模型[26]。離體皮膚通過適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)方式,可在體外維持一定的組織活力,目前,已被廣泛應(yīng)用于化妝品功效測(cè)評(píng)、傷口愈合、皮膚相關(guān)疾病的研究中。離體皮膚是接近健康和患病皮膚生理機(jī)能的模型,包含完整的皮膚細(xì)胞類群如角質(zhì)形成細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、黑素細(xì)胞、朗格漢斯細(xì)胞;含有膠原蛋白、彈性蛋白、糖胺聚糖等細(xì)胞外基質(zhì);包含皮膚附屬物如汗腺等叨。本文將在下面章節(jié)重點(diǎn)概述離體皮膚模型及其在化妝品功效評(píng)價(jià)中的應(yīng)用。通過皮膚刺激測(cè)試、色斑淡化測(cè)試、濕敷測(cè)試等方法,可以評(píng)估美白化妝品的功效和安全性。護(hù)膚品功效宣稱檢驗(yàn)
測(cè)試結(jié)果的科學(xué)解讀是化妝品人體淡斑美白功效測(cè)試的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。環(huán)特人體功效實(shí)驗(yàn)室通過嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臄?shù)據(jù)分析,將測(cè)試數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為直觀且具有說服力的結(jié)論。通過對(duì)比試驗(yàn)側(cè)與陰性對(duì)照側(cè)的皮膚黑色素含量、ITA 值及膚色視覺評(píng)分差值,以統(tǒng)計(jì)學(xué)方法(P<0.001)驗(yàn)證產(chǎn)品的明顯性差異。例如,若在 D28 回訪時(shí),試驗(yàn)側(cè)皮膚黑色素含量較陰性對(duì)照明顯下降,且 ITA 值明顯上升,則可科學(xué)判定產(chǎn)品具有淡斑美白、提亮的功效。這種基于數(shù)據(jù)的結(jié)論不僅為企業(yè)提供產(chǎn)品優(yōu)化方向,也為消費(fèi)者選購提供了可信賴的參考依據(jù),推動(dòng)美白化妝品市場(chǎng)朝著更理性、科學(xué)的方向發(fā)展?;瘖y品功效安全測(cè)試的費(fèi)用實(shí)驗(yàn)組斑馬魚接觸美白化妝品,而對(duì)照組則不接觸。
目前,化妝品原料過敏性檢測(cè)主要依賴動(dòng)物實(shí)驗(yàn)替代方法、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和人體斑貼試驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)替代方法:如局部淋巴結(jié)試驗(yàn)(LLNA),通過檢測(cè)小鼠耳部淋巴結(jié)中增殖的淋巴細(xì)胞數(shù)量評(píng)估致敏性,靈敏度達(dá)80%以上,且減少動(dòng)物痛苦。細(xì)胞實(shí)驗(yàn):基于角質(zhì)形成細(xì)胞或樹突狀細(xì)胞的體外模型,如KeratinoSens?和h-CLAT試驗(yàn),通過檢測(cè)細(xì)胞因子分泌或表面標(biāo)志物變化預(yù)測(cè)致敏潛力。人體斑貼試驗(yàn):將原料封閉貼敷于受試者背部皮膚,48小時(shí)后觀察反應(yīng),是驗(yàn)證原料安全性的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但耗時(shí)長(zhǎng)、成本高。此外,新興的組學(xué)技術(shù)(如轉(zhuǎn)錄組學(xué)、代謝組學(xué))正逐步應(yīng)用于致敏機(jī)制研究,為精細(xì)檢測(cè)提供新思路。
雖然中國(guó)化妝品行業(yè)的科技創(chuàng)新熱情和研發(fā)投入近幾年來都在快速上升,但整體的創(chuàng)新能力還比較弱。作為全球化妝品增量的市場(chǎng)之一,國(guó)內(nèi)的高級(jí)化妝品市場(chǎng)還是以外資品牌為主,本土品牌大都忙于在中低端市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)。產(chǎn)品同質(zhì)化嚴(yán)重、企業(yè)對(duì)產(chǎn)品缺乏內(nèi)驅(qū)性的要求以及缺乏新質(zhì)競(jìng)爭(zhēng)力已經(jīng)成為制約眾多國(guó)產(chǎn)化妝品品牌發(fā)展的主要因素。在外部經(jīng)濟(jì)尚不平穩(wěn)、原材料價(jià)格波動(dòng)的國(guó)際大環(huán)境下,既往依靠“價(jià)格戰(zhàn)”的低價(jià)競(jìng)爭(zhēng)方式正在慢慢失去它昔日一度穩(wěn)固的市場(chǎng)抗風(fēng)險(xiǎn)能力。中國(guó)化妝品行業(yè)亟需在科技創(chuàng)新方面的突破來獲得新的發(fā)展動(dòng)力,既要搶占中國(guó)的高級(jí)市場(chǎng),也要勇敢地在更廣闊的全球市場(chǎng)中去拼搏。美白化妝品人體功效測(cè)試的發(fā)展可以推動(dòng)行業(yè)的規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化,促進(jìn)行業(yè)的健康發(fā)展。
斑馬魚免疫系統(tǒng)與人類高度相似,為抑炎功效研究提供了獨(dú)特模型。實(shí)驗(yàn)通過尾鰭切斷誘導(dǎo)局部炎癥,利用轉(zhuǎn)基因熒光標(biāo)記技術(shù)追蹤中性粒細(xì)胞遷移。例如,某含積雪草苷的乳液可使斑馬魚尾鰭傷口處中性粒細(xì)胞聚集量減少65%,且巨噬細(xì)胞清理率提升40%。該方法基于LPS誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng),通過檢測(cè)活性氧(ROS)水平與炎癥因子(如IL-6、TNF-α)表達(dá)量實(shí)現(xiàn)量化評(píng)估。相較于小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn),斑馬魚模型可減少90%的動(dòng)物使用量,且結(jié)果與人體臨床數(shù)據(jù)相關(guān)性達(dá)0.83。目前,水中銀、廣州魯比生物等機(jī)構(gòu)已開發(fā)斑馬魚抑炎功效評(píng)價(jià)試劑盒,并應(yīng)用于薇諾娜、百雀羚等品牌的產(chǎn)品開發(fā)。斑馬魚的胚胎發(fā)育過程透明,可以清晰觀察到各種細(xì)胞和組織的變化,這對(duì)于研究美白化妝品的效果非常有幫助。化妝品宣稱溫和功效測(cè)試
通過科學(xué)的實(shí)驗(yàn)方法,我們可以更好地了解美白化妝品的功效和安全性。護(hù)膚品功效宣稱檢驗(yàn)
糖化反應(yīng),又稱美拉德反應(yīng),其晚期糖基化產(chǎn)物也被稱為AGEs,AGEs隨著年齡不斷累積,一方面會(huì)通過改變真皮ECM的功能使細(xì)胞形態(tài)改變,另一方面會(huì)通過ji活下游信號(hào)通路,影響細(xì)胞、組織功能,促進(jìn)皮膚衰老。具有抗糖基化活性的天然化合物可能具有較大的抗老潛力。糖基化誘導(dǎo)劑甲基乙二醛(MGO)可誘導(dǎo)糖基化產(chǎn)物的產(chǎn)生,在MGO造模的情況下,SHIN等人利用離體皮膚研究了沒食子酸甲酯的抗糖化作用,沒食子酸甲酯通過降低羧甲基賴氨酸(CML)的表達(dá)、刺激纖維蛋白I的表達(dá)來發(fā)揮其抗糖化作用[57。另一項(xiàng)在離體皮膚中的研究表明,氨基胍、葛根素、綠原酸可促進(jìn)纖維蛋白1的產(chǎn)生和抑制CML的產(chǎn)生,這表明這些活性成分具備抗氧化和抗糖化的功效[58]。此外,與MGO處理相比,水飛薊花提取物水飛薊賓涂抹8天,可明顯降低皮膚外植體中CML的表達(dá)。護(hù)膚品功效宣稱檢驗(yàn)