比色皿一般為長(zhǎng)方體,其底及兩側(cè)為磨毛玻璃,另兩面為光學(xué)玻璃制成的透光面采用熔融一體、玻璃粉高溫?zé)Y(jié)和膠粘合而成。所以使用時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn):1.拿取比色皿時(shí),只能用手指接觸兩側(cè)的毛玻璃,避免接觸光學(xué)面【即,光滑的面】。光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用鏡頭紙或絲綢擦拭。同時(shí),注意輕拿輕放,防止外力對(duì)比色皿的影響,產(chǎn)生應(yīng)力后破損。2.凡含有腐蝕玻璃的物質(zhì)的溶液,不得長(zhǎng)期盛放在比色皿中。3.不能將比色皿放在火焰或電爐上進(jìn)行加熱或干燥箱內(nèi)烘烤。4.當(dāng)發(fā)現(xiàn)比色皿里面被污染后,應(yīng)用無(wú)水乙醇清洗,及時(shí)擦拭干凈。5.不得將比色皿的透光面與硬物或臟物接觸。盛裝溶液時(shí),高度為比色皿的2/3處即可。測(cè)試在紫外區(qū)有吸收的樣品時(shí)用石英比色皿。橙紅色比色液管理
紫外光度實(shí)驗(yàn)中的比色皿通常使用玻璃比色皿和石英比色皿,玻璃比色皿是用光學(xué)玻璃制成的比色皿,只能用于可見(jiàn)光區(qū),適用于330~1000nm波長(zhǎng)范圍,石英比色皿是用熔融石英(氧化硅)制成的比色皿,既適用于紫外光區(qū),也可用于可見(jiàn)光區(qū),適用于200~400nm波長(zhǎng)范圍。利用石英和玻璃比色皿在紫外光區(qū)和可見(jiàn)光區(qū)有無(wú)吸收的差異,在紫外光區(qū)時(shí),由于玻璃比色皿強(qiáng)烈吸收紫外光,對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果有影響,石英比色皿不吸收紫外光,不會(huì)影響數(shù)據(jù),因此在紫外光區(qū)不使用玻璃比色皿而使用石英比色皿。而在可見(jiàn)光區(qū),玻璃的影響非常小,可忽略,和石英比色皿一樣均可以使用,但考慮到節(jié)約經(jīng)濟(jì)的因素,由于玻璃比色皿的價(jià)格遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于石英比色皿,通常選擇可見(jiàn)光區(qū)使用玻璃比色皿,紫外光區(qū)使用石英比色皿。標(biāo)準(zhǔn)比色液哪家好石英比色皿在可見(jiàn)和紫外光區(qū)沒(méi)有吸收,而玻璃比色皿在紫外區(qū)有吸收,所以不能用于紫外光區(qū)。
比色皿有方向性:有些比色皿上標(biāo)有方向標(biāo)記,使用時(shí)必須注意。無(wú)方向標(biāo)記的比色皿應(yīng)予以校正,校正時(shí)要先確定方向并作好標(biāo)記,以減少測(cè)定誤差。石英比色皿?玻璃比色皿?比色皿選擇或使用不當(dāng),造成無(wú)法測(cè)量或引起測(cè)量誤差的現(xiàn)象在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常出現(xiàn),這一問(wèn)題又很容易被實(shí)驗(yàn)人員忽視。紫外區(qū)的定義為190-400nm,石英比色皿可用于190-900nm,玻璃比色皿用于360-900nm,紫外區(qū)的一定要用石英比色皿,必須配置紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì),否則低波長(zhǎng)段不能分析。對(duì)于一般的非光學(xué)專(zhuān)業(yè)人員,用眼睛是不能分開(kāi)石英比色皿和玻璃比色皿的。但兩者硬度差別很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(色調(diào)值)幾十倍,如果把兩個(gè)對(duì)磨,石英比色皿將很少被磨損,而玻璃比色皿磨損非常大。
比色皿誤差規(guī)避:①比色皿的透光面不應(yīng)與硬物或臟物接觸,比色皿使用時(shí)勿碰撞。②比色皿中的液體,應(yīng)沿毛面傾斜,慢慢倒掉,不要將比色皿翻轉(zhuǎn),直接口向下放在干凈的濾紙上吸干剩余液,然后用蒸餾水沖洗比色皿內(nèi)部倒掉(操作同上)避免液體外流,使第2次測(cè)量時(shí)不用擦拭比色皿,不致因擦拭帶來(lái)的誤差。③比色前將各個(gè)比色皿中裝入蒸餾水,在比色波長(zhǎng)下進(jìn)行比較,誤差在±0.001吸光度以?xún)?nèi)的比色皿選出4-8個(gè)進(jìn)行比色測(cè)定,可避免因比色皿差異造成測(cè)量誤差。原理用氯鉑酸鉀與氯化鈷配成標(biāo)準(zhǔn)色列,與水樣進(jìn)行目視比色。
以上都是快速簡(jiǎn)單的鑒別方法,除非是光學(xué)專(zhuān)業(yè)人士,否則極易由于個(gè)人差異產(chǎn)生誤差,一般情況只能作為權(quán)宜之法。并且現(xiàn)在的制備工藝精湛,無(wú)論是玻璃比色皿還是石英比色皿外觀都是澄清透明,厚度、質(zhì)量差別不大,因此只通過(guò)這些感官的直觀鑒別方法在是不可取的。機(jī)試法:使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)來(lái)鑒別玻璃、石英比色皿和配對(duì)比色皿?,F(xiàn)行國(guó)家檢定規(guī)程規(guī)定石英比色皿在250nm下吸光度應(yīng)小于0.07abs,若吸光度大于0.07abs則為玻璃比色皿。比色皿內(nèi)不放置任何樣品,以空氣為介質(zhì),波長(zhǎng)設(shè)置250nm,調(diào)零。將比色皿放置在樣品道,吸光值小于0.07abs的是石英的,反之是玻璃的。同一比色實(shí)驗(yàn)中要使用同樣規(guī)格的比色管。合肥棕紅色比色液
由于石英比色皿的透光范圍從0.12-4.5微米,普遍的譜段范圍內(nèi)沒(méi)有任何吸收峰。橙紅色比色液管理
比色皿清洗:分光光度法中比色皿潔凈與否是影響測(cè)定準(zhǔn)確度的因素之一。因此,比色皿必須保持清潔和無(wú)傷痕,選擇正確的洗凈方法。用完即清洗,清洗后在通風(fēng)陰涼處干燥,等徹底干燥后放入相應(yīng)裝具中。放置時(shí),裝具保持清潔干燥,比色皿應(yīng)秉承“光面朝上,毛面在兩側(cè)”的原則,這樣便于抓取兩毛面拿出使用,不易弄污光面。比色皿清洗液:濃鹽酸:甲醇:水=1:4:3;如果比色皿被有機(jī)物污染,宜用鹽酸—乙醇(1:2)混合液浸洗,也可用相應(yīng)的有機(jī)溶劑如醇醚混合物浸泡洗滌。如:油脂污染可用石油醚浸洗,鉻天青顯色劑污染可用硝酸(1:2)浸洗等。也可用冷的或溫?zé)岬?40~50℃)陰離子表面活性劑的碳酸鈉溶液(2%)浸泡,可加熱10分鐘左右。對(duì)于有色物質(zhì)的污染可用HCL(3mol/L)-乙醇(1+1)溶液洗滌。有色物質(zhì)污染的比色皿用鹽酸:乙醇(1:2)浸泡一段時(shí)間,顏色就去掉了。橙紅色比色液管理
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