對LST(月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí),有時(shí)發(fā)酵管內(nèi)會有氣泡。為防止發(fā)酵管內(nèi)產(chǎn)生氣泡,可以采取以下幾項(xiàng)措施:(1)小倒管浸滿培養(yǎng)基(不留氣泡)后再加入到盛LST的試管中。(2)滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前,將鍋內(nèi)氣體排干凈。(3)試管塞不要塞得太緊(使用硅膠塞的時(shí)候),勿使用橡皮塞。(4)不要過早打開滅菌鍋,要等滅菌鍋內(nèi)氣體和溫度都降到與室溫一致或相差不大時(shí)再打開滅菌鍋。如果以上情況都做到還有氣泡,可用水做培養(yǎng)基組的對照試驗(yàn),若培養(yǎng)基組有氣泡,而對照組沒有氣泡,可確定是培養(yǎng)基自身的原因。**大規(guī)模生產(chǎn)**:優(yōu)先考慮工業(yè)化滅菌釜(如**Systec高壓滅菌器**)或連續(xù)流培養(yǎng)基制備系統(tǒng)。遼寧全自動培養(yǎng)基制備器
微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn):培養(yǎng)基倒入平板,將滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻至五十度后,倒入無菌干燥的培養(yǎng)皿中。微生物培養(yǎng)基制備的溫度不能太高,否則培養(yǎng)皿內(nèi)蓋容易形成過多的冷凝水;溫度太低,中海培養(yǎng)基容易凝固成塊狀,不能做成平板。倒平板時(shí),要靠近酒精的火焰以防止外來細(xì)菌落入盤中。左手托住培養(yǎng)皿,右手托住三角瓶底部。用小指和手掌拉出錐形瓶的棉塞,燒灼燒瓶口,用拇指和食指在培養(yǎng)皿蓋上打開一條縫,直到燒瓶口剛好伸手進(jìn)去,倒入培養(yǎng)基,直到底部被覆蓋。不要超過培養(yǎng)皿高度的三分之一,迅速蓋上蓋子,放在桌子上,輕輕旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基分布均勻,凝結(jié)后即可。廣西培養(yǎng)基制備器哪家好培養(yǎng)基中的維生素、生長因子等易受高溫破壞,高效加熱縮短熱暴露時(shí)間,減少降解。
培養(yǎng)基配置原則:控制pH條件,培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的很適pH條件各不相同,一般來講,細(xì)菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制,往往導(dǎo)致微生物生長速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8。
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1、培養(yǎng)基成分的稱取:培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂,較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱完一種成分即在配方面軍做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后,還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。2、培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。培養(yǎng)基制備器外控高低電平控制啟停,正反,簡易分裝,光耦隔離;外控模擬量調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速!
培養(yǎng)基配制方法:正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)的較基礎(chǔ)步驟之一,使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時(shí),應(yīng)遵守良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配制。如重量(體積)、pH、制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實(shí)驗(yàn)室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,并記錄相關(guān)信息,如:培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間)、配置日期、人員等,以便溯源。高溫下長時(shí)間停留會導(dǎo)致瓊脂過度凝固、糖類焦化或蛋白質(zhì)變性。海南全自動培養(yǎng)基制備器
冷凝水積聚過多應(yīng)清理排水管道過濾器。遼寧全自動培養(yǎng)基制備器
制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):用過的玻璃器皿:凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時(shí)沖洗,吸取過化學(xué)試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數(shù)量后再集中進(jìn)行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經(jīng)過適當(dāng)消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。若用皂液未能洗凈的器皿,可用洗液浸泡適當(dāng)時(shí)間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸,其作用是將有機(jī)物氧化成可溶性物質(zhì),以便沖洗。洗液有很強(qiáng)的腐蝕作用,使用時(shí)應(yīng)特別小心,避免濺到衣服、身體和其他物品上。遼寧全自動培養(yǎng)基制備器