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培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1、培養(yǎng)基成分的稱取:培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂,較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱完一種成分即在配方面軍做出記號(hào),并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后,還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。2、培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。**蒸汽加熱**(高壓滅菌鍋):需關(guān)注蒸汽生成速度及均勻性。西藏大容量 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的稱量和溶解:小心稱量所需量的脫水合成培養(yǎng)基(必要時(shí)佩戴口罩或在通風(fēng)柜中操作,以防吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末),先加入適量的水,充分混合(注意避免培養(yǎng)基結(jié)塊),然后加水至所需的量后適當(dāng)加熱,并重復(fù)或連續(xù)攪拌使其快速分散,必要時(shí)應(yīng)完全溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱前應(yīng)浸泡幾分鐘。注意:培養(yǎng)基的加熱溶解或高溫滅菌盛放使用的容器不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)攪動(dòng)、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。安徽培養(yǎng)基制備器哪家好需具備±1°C以內(nèi)的精確控溫,避免溫度波動(dòng)影響滅菌效果或成分穩(wěn)定性。
在制備培養(yǎng)基時(shí),通常要考慮以下因素:(1)pH值多數(shù)細(xì)胞系在pH=7.4下生長(zhǎng)得很好。盡管各細(xì)胞株之間細(xì)胞生長(zhǎng)*pH值變化很小,但一些正常的成纖維細(xì)胞系以pH=7.4~7.7,轉(zhuǎn)化細(xì)胞以pH=7.0~7.4更合適。據(jù)報(bào)道,上皮細(xì)胞以pH=5.5合適。為確定*佳pH值,做一個(gè)簡(jiǎn)單的生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)或特殊功能分析酚紅常用作指示劑,pH=7.4呈紅色,pH=7.0變橙色,pH=6.5變黃色,而pH=7.6呈紅色中略帶藍(lán)色,pH=7.8呈紫色。由于對(duì)顏色的觀察有很大的主觀性,因而必須用無(wú)菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標(biāo)準(zhǔn)樣,放在與制備培養(yǎng)基相同的瓶子中。(2)緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對(duì)培養(yǎng)物有營(yíng)養(yǎng)作用,因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。(3)滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對(duì)滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點(diǎn)降低或蒸汽壓升高測(cè)定。如果自己配培養(yǎng)基,可通過(guò)測(cè)定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤差。
固體斜面培養(yǎng)基配制:培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補(bǔ)足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正:因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行PH的初步調(diào)正。滅菌過(guò)程數(shù)據(jù)可追溯,符合GLP/GMP質(zhì)量管理規(guī)范。 智能報(bào)警系統(tǒng)即時(shí)提示故障,縮短停機(jī)維護(hù)時(shí)間。
馬鈴薯培養(yǎng)基的制作過(guò)程:(1)稱量和熬煮:按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。(2)加熱溶解:把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂完全溶解后,再補(bǔ)充水分至所需量。(3)分裝:按實(shí)訓(xùn)要求,將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶?jī)?nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。分裝量:固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶?jī)?nèi)以不超過(guò)其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。(4)加棉塞:培養(yǎng)基分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能。液體溢出報(bào)警需檢查容器裝載量是否超標(biāo)。中國(guó)澳門大容量 培養(yǎng)基制備器
全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):具有快速升溫和迅速冷卻功能!西藏大容量 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備程序:全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器可以快速的準(zhǔn)備好滅菌,放入滅菌鍋,“水套系統(tǒng)”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導(dǎo)),加入培養(yǎng)基原料,準(zhǔn)備啟動(dòng)滅菌程序。培養(yǎng)基可以直接在培養(yǎng)基制備器內(nèi)懸浮溶解。強(qiáng)力磁力攪拌培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性得到確保,并避免凝結(jié)。培養(yǎng)基還可以選擇使用水浴模式預(yù)先溶解。沒有經(jīng)過(guò)專門培訓(xùn)的人員由于直觀的圖形化界面也能夠簡(jiǎn)單的進(jìn)行操作。用戶對(duì)于多達(dá)50個(gè)滅菌參數(shù)可以自定義設(shè)置,它們可以被儲(chǔ)存起來(lái)并隨時(shí)調(diào)用。西藏大容量 培養(yǎng)基制備器